1、 夏兆飞博士 (中国农业大学动物医学院)犬的血型 犬的血型1通过直接或间接凝集反应以及溶血反应,人们逐渐认识了犬的各种红细胞抗原(DEA) 。到目前为止,已报道的犬血型有: -红细胞抗原1.1(A1); -红细胞抗原1.2(A2); -红细胞抗原3(B); -红细胞抗原4(C); -红细胞抗原5(D); -红细胞抗原6(F); -红细胞抗原7(Tr)和红细胞抗原8(He)。犬的血型2最近澳大利亚又发现犬有红细胞抗原1.3(A3)血型。最强的抗原性因子: -红细胞抗原1.1 -红细胞抗原1.2 -红细胞抗原7犬的血型3犬的红细胞表面不只有一个红细胞抗原,如红细胞可以是DEA1.1阳性或DEA1.
2、1阴性,同时DEA1.1阴性的红细胞也可以是DEA1.2阳性或DEA1.2阴性,这些血型表现为等显性遗传。犬的血型4血型为DEA1.1、DEA1.2和DEA7阳性的犬血只能给相同血型的犬输;如果血型为DEA1.1、DEA1.2和DEA7阴性的犬首次输入上述三种阳性血型中的任何一种或两种以上以后,第二次输入同一阳性血型时肯定会发生严重的输血反应。目前未发现犬体内含有天然抗DEA1.1和DEA1.2的抗体,但犬体内确实存在抗某些血型的天然抗体。另外,由于地域的不同以及各品种的分布数量的差异,各地犬的不同血型所占比例也不尽相同。犬的血型5目前还未就某一品种犬的血型分布情况做出详细研究,但研究发现Gr
3、eyhound出现DEA1.1和DEA1.2阳性的机率很小 。犬的血型6Pitoler e等对美国不同品种犬调查得出 - DEA1.1占40%, - DEA1.2占20%, - DEA3 占5%, - DEA4 占98%, - DEA5 占2025%, - DEA6 占98%, - DEA7 占4550%, - DEA8 占40%。输血疗法的适应症 输血疗法可适用于各种原因引起的贫血;车祸、手术、外伤等引发的大失血;剧烈呕吐、腹泻引起的血容量降低;老年性疾病;血小板和凝血因子缺乏引起的凝血不良;华法令鼠药中毒;白细胞减少症和低蛋白血症等病症。 输血的作用输血可以起到迅速补充循环血量、维持一定的
4、血压、增加血液的凝固性和血红蛋白的浓度、增加血液运输氧的能力以及刺激机体的造血机能等作用。另外对供血犬采取相应的免疫后,其血制品对犬细小病毒、犬瘟热可产生特异性的抗病力。 输血的标准当犬出现下列情况: - 循环血量减少超过30%; - 红细胞压积小于20%; - 持续性出血; - 粘膜苍白; - 毛细血管充盈时间大于2秒; - 呼吸急促和心动过速等症状; 则必须紧急输血。供血犬的选择 要求供血犬的体重应大于25公斤;年龄在2-8岁之间;临床检查正常(包括血常规及血液生化);红细胞压积大于40%;定期注射疫苗;供血犬不应有红细胞抗原1.1、红细胞抗原1.2或红细胞抗原7。如果受血犬需大量输入血小
5、板和凝血因子,应检测供血犬的凝血时间;根据地域的不同,相应淘汰存在巴贝丝虫病、利什曼原虫病、埃利希氏病、疏螺旋体病、布鲁菌病和犬恶丝虫病的供血犬。特别应注意供血犬不可有受血经历。 采血量不应超过20毫升/公斤体重;一般间隔三周采集一次。供血犬的日粮中应添加硫酸铁制剂,剂量为10mg/kg体重。由于Greyhound血液的红细胞压积很高,静脉容易采血并且血液中很少含有DEA1.1、DEA1.2和DEA7,可将Greyhound作为理想的供血犬。血液的采集及保存 常用的保存液可以从犬的颈静脉或从麻醉犬的股内动脉采集血液。采血常用的保存液: - 枸橼酸磷酸葡萄糖(CPD); - 枸橼酸磷酸葡萄糖腺嘌
6、呤(CPD-A1) - 酸性枸橼酸葡萄糖(ACD); - 肝素。血液的保存犬的全血制品应保存在3-6的条件下,温度高于37,易破坏血液的成分,低于2,可形成纤维蛋白。另外应使抗凝剂和采血袋在采血前保持在5左右,以防止溶血。采血过程中必须轻轻晃动采血袋。配血实验输血前应给犬做交叉配血试验,但在紧急输血情况下,如果犬是第一次输血,可以不做配血试验。受血犬过去曾被输过不明血型的血液或需多次输血,必须做配血试验,否则,易产生输血反应。 交叉配血试验交叉配血试验可以分为主侧配血和次侧配血两部分,主侧配血是受血犬的血浆或血清和供血犬的红细胞反应与否;次侧配血是受血犬的红细胞与供血犬的血浆或血清反应与否。由
7、于受血犬血清中很少含有天然抗体,一般可不做次侧配血试验。任何程度的凝集反应或溶血反应都表明血型不相容。盐水配血法可利用盐水配血法进行检测,具体实验步骤为: a. 分别取供血犬和受血犬的新鲜血液,用EDTA抗凝。 b. 用0.9%氯化钠溶液洗三遍红细胞,分别以1000转/分钟离心15秒,去掉上清液。 c. 将红细胞泥配成4%红细胞盐水悬液。 d. 主侧配血:向1075毫米的试管加入两滴供血犬的4%红细胞盐水悬液和两滴受血犬的 血清或血浆。 e. 次侧配血:向1075毫米的试管加入两滴受血犬的4%红细胞盐水悬液和两滴供血犬的 血清或血浆。 f. 以1000转/分钟离心1分钟。 g. 取出观察上清液
8、有无溶血,轻轻晃动试管,观察有无凝血。简易的“三滴法”配血实验简易的“三滴法”配血实验:方法为取供血犬血液1滴、受血犬血液1滴及抗凝剂1滴于载玻片上,混合后肉眼观察有无凝集,若无凝集,则可输血。 输血方法静脉输血是最常用的一种方法。如果静脉输血确实有困难,也可进行腹腔输血,但腹腔输血的作用比较慢。腹腔输血24小时后,有50%血细胞被吸收进入循环系统。腹腔输血2-3天后,约70%的血细胞进入循环血液。腹腔输血对慢性疾病(如慢性贫血)效果较好。幼犬静脉输血失败,可以进行骨髓内输血,用消毒后的20号针头或骨髓穿刺针刺入股骨或肱骨近端,输血后约95%左右的血细胞可以被吸收进入血液循环系统。输血前15分
9、钟,可以给犬注射苯海拉明防止过敏。将血袋取出后反复颠倒数次,使沉积的红细胞充分混匀。输血过程中发生阻塞时,须立即更换输血器具,也可在输血前向血袋内注入50-100毫升生理盐水以稀释浓缩的红细胞,有利于降低血液的粘稠度。输血量的计算静脉输血的剂量一般为10-20ml/kg。输入20ml/kg的全血或10ml/kg浓缩的红细胞,则红细胞压积增加10%左右。 输血量的计算公式为:所输血量=2.2受血犬的体重(kg)40(正常血细胞比容-受血犬血细胞比容/供血犬血细胞比容)。 静脉输血的速度静脉输血的速度一般应小于10ml/kg/h;输血最初30分钟一定要慢,大约0.25ml/kg/h。输血过程中犬如
10、果出现荨麻疹,则马上停止输血。一般情况下血制品不用预热,但输血速度达50ml/kg/h,则必须预热。 血小板或其它凝血因子如果要输入血小板或其它凝血因子,必须使用新鲜的血液,这是由于血小板只能存活4-8小时,而凝血因子和在1-6条件下也只能保存6小时。输血反应输血血型发生不相容时,犬输血后710天产生抗体,此时发生凝集和溶血反应。临床上犬在输血后初期虽表现为好转,但12周后则会死亡。但犬的肾脏可以排泄大量的血红蛋白,肾脏几乎不发生任何病理变化,而人体内红细胞释放的血红蛋白可以引起肾脏病变。由于此原因,有时给同一条犬几次输入不相容血型也不会引起死亡。输血维持的时间必须注意输血的疗效是暂时的,患非
11、再生性贫血和非溶血性贫血的犬一次性输入新鲜血液后可以维持三周左右。过量输血以及经常性输血,可以抑制自身红细胞的生成。输血并发症如果供血犬和受血犬的血型相同,一般很少发生并发症。犬输血的并发症主要有: - 发热、 - 过敏、 - 溶血、 - 循环负荷过重、 - 低钙血症 - 以及血凝病等。 发热和过敏主要表现为高热、红斑和瘙痒等症状,临床处理措施为减慢输血速度,给予退热剂,应用抗组织胺药物,如盐酸苯海拉明,剂量为2mg/kg;溶血主要表现为血红蛋白血症、血红蛋白尿症、乏力、呕吐、发热、心动过速、急性肾衰和凝血等症状,如果发生溶血反应,应立即停止输血,给予静脉输液以及皮质类固醇和抗组织胺药物; 循环负荷过重是由于输血量过大造成的,可以引起肺水肿,应用速尿处理,用量为2-4mg/kg;低钙血症:输入大量含枸橼酸盐抗凝剂的血液可使犬产生低钙血症,犬临床表现为肌肉震颤、心率不齐或者呕吐。发生上述症状可以停止输血,一般可用葡萄糖酸钙治疗;血凝病:大量输入全血或浓缩红细胞可以造成犬发生血凝病,可用富含血小板的血浆进行治疗。