1、交叉配血试验标准操作规程（微柱凝胶抗人球蛋白法）1. 目的为规范微柱凝胶抗人球蛋白法在交叉配血试验中的应用，保证检测结果准确及临床输血安全有效，依据输血实验室管理程序的要求制定本规程。2. 适用范围适用于医疗机构输血科作交叉配血试验。3. 职责医疗机构输血科技术人员负责对交叉配血的试验。4. 原理红细胞血型抗原与不完全抗体（IgG），在抗人球蛋白的桥梁作用下，经一定的离心力，产生特异性免疫凝集复合物或红细胞血型抗原与完全抗体（IgM）直接产生的特异性免疫凝集复合物，被排阻在具有三维空间网状结构的凝胶表层或凝胶颗粒间隙之中，判为阳性结果，表示待检血标本中含有相应红细胞血型抗原抗体；红细胞全部沉积
2、于凝胶孔腔底部，即判断为阴性反应，表示待检血标本中无相应的红细胞血型抗原抗体。5. 所需设备和试剂 普通离心机、微注凝胶卡专用离心机、微柱凝胶卡专用孵育器、微量移液器、抗人球蛋白微柱凝胶卡 6. 检测环境条件室湿应控制在1827，湿度应保持30%70%。7. 操作步骤7.1先将供（受）血标本制备0.5%红细胞低离子介质（LIM）悬液。7.2撕开卡的封膜，于反应胶中主（次）侧管加供（受）者 0.5% 红细胞LIM悬液100l，加入受（供）血者血浆或血清25l（或50l）。7.3将检测卡37孵育15min取出，置离心机1800r/min离心1min,2500r/min离心1min。7.4取出，判定
3、结果，结果判定标准按下表：（可参照结果判定示图）阳性4+表示RBC绝大部份凝聚于凝胶表层3+表示RBC多数凝聚于凝胶表层，少数RBC凝集颗粒悬浮于近胶表层2+表示部份RBC沉积于胶底，部分RBC凝集颗粒悬浮于凝胶中1+表示RBC多数沉积于胶底，可见少数RBC凝集颗粒悬浮于凝胶中表示RBC绝大多数沉积于胶底，极少数RCB凝集颗粒悬浮于近胶底dcp表示混合凝集外观，部份RBC凝集颗粒集结于凝胶表层，部分RBC沉于胶底PH表示部分溶血，凝胶管中液体呈清澈透明红色，凝胶中有残留RBCH表示完全溶血，凝胶管中液体呈清澈透明红色，凝胶中无RBC阴性表示RBC全部沉积于胶底检验结果的解释：阳性结果，表示受（
4、供）血者血浆或血清中含供（受）血者红细胞血型抗原相应的抗体（不完全抗体IgG或完全抗体IgM），供受血者血液不相容。 阴性结果，表示供受血者血液相容。8. 质量控制8.1微柱凝胶试剂卡在有效期内使用，每批试剂卡在使用前用已知阴、阳性对照确认其有效性。8.1试剂质量控制方法8.1.1即作阴、阳性对照试验：撕开检测卡的封膜，于2个反应腔中分别加入已致敏IgG抗D的1%O型RhD(+)红细胞LIM悬液50l、健康者1%O型RhD(+)红细胞LIM悬液50l。8.1.2将检测卡于离心机1800r/min离心1min,2500r/min离心1min。8.1.3取出，结果判定同7.39.注意事项9.1检测卡若在冰箱储存，使用前须放置实验室平衡至室温。9.2检测卡试验前，应3000r/min离心1min，正立放置待用。9.3如因运输过程产生的气泡，可将检测卡放置在漩涡震荡器上震荡，使气泡漂移至胶面为止，3000r/min离心2min。9.4细菌污染、纤维蛋白析出、抗凝不佳的血，可产生假阳性。9.5离心速度过快，时间过长，试剂失效等因素均可导致假阴性。10.相关文件中山市生科试剂仪器有限公司抗人球蛋白检测卡说明书
