1、 河南中医学院河南中医学院 第二临床医学院诊断学科第二临床医学院诊断学科 输血前检测输血前检测 第一节第一节 病毒性肝炎病毒性肝炎 第二节第二节 艾滋病艾滋病 第三节第三节 梅毒梅毒 第一节第一节 病毒性肝炎病毒性肝炎 血清标志物检测血清标志物检测 病毒性肝炎的实验诊断病毒性肝炎的实验诊断 我国属病毒性肝炎高发区，全国有肝炎我国属病毒性肝炎高发区，全国有肝炎病人病人2700万人，每年新发病例万人，每年新发病例900万人，万人，HBsAg携带者达一亿二千万人。慢性肝炎携带者达一亿二千万人。慢性肝炎中有中有5070有活性性病毒复制，有活性性病毒复制，30发发展为肝硬化，展为肝硬化，510发展为肝癌
2、，故我国发展为肝癌，故我国又是原发性肝细胞癌的高发国家，慢性又是原发性肝细胞癌的高发国家，慢性HBV携带者患肝癌危险性较非携带者高携带者患肝癌危险性较非携带者高100倍。倍。病毒性肝炎分类(Classification of Viral Hepatitis)1、已确定的肝炎：甲、乙、丙、丁、戊五种。2、未定论的：己、庚和输血传播病毒（TTV）引起的肝炎。3、非甲戊型肝炎 甲型肝炎甲型肝炎 乙型肝炎乙型肝炎 丙型肝丙型肝炎炎 丁型肝炎丁型肝炎 戊型肝炎戊型肝炎 病毒直径病毒直径 核酸核酸 种属种属 27nm 单链单链RNA 微小微小RNA病毒科病毒科 42nm 双链双链DNA 嗜肝嗜肝DNA病病
3、毒科毒科 3060nm 单链单链RNA 黄病毒黄病毒科科 3537nm 单环单环RNA 缺陷病毒缺陷病毒科科 2738nm 单链单链RNA 杯状病毒杯状病毒科科 主要传播主要传播 途径途径 流行性流行性 季节性季节性 潜伏期潜伏期 发病发病 黄疸黄疸 粪至口粪至口 散发或流散发或流 行行 秋冬秋冬 26周周 急性较多急性较多 多见多见 血液、母婴血液、母婴 散发散发 无无 26月月 缓慢多见缓慢多见 较少见较少见 血液血液 散发散发 无无 26周周 多缓慢多缓慢 多无多无 血液血液 散发散发 无无 420周周 多缓慢多缓慢 多无多无 粪至口粪至口 散发或流散发或流 行行 雨季或洪雨季或洪 水后
4、水后 210周周 急性较多急性较多 较重较重 5型病毒性肝炎病原体、流行病学和临床特征型病毒性肝炎病原体、流行病学和临床特征 甲型肝甲型肝炎炎 乙型肝乙型肝炎炎 丙型肝炎丙型肝炎 丁型肝炎丁型肝炎 戊型肝炎戊型肝炎 慢性病慢性病毒携带毒携带者者 病变慢病变慢 性化性化 肝炎病肝炎病毒标志毒标志物物 无无 无无 抗抗-HAV IgM 抗抗-HAV IgG 有有 有有 HBsAg HBeAg 抗抗-HBe 抗抗-HBc 抗抗-HBs 前前S1蛋白蛋白 前前S2蛋白蛋白 HBV-DNA 有有 有有,多见多见 抗抗-HCV IgM 抗抗-HCV IgG HCV-RNA 有有 有有,较多见较多见 HDA
5、g 抗抗-HD IgM 抗抗-HDIgG 无无 无无 抗抗-HEV IgM 抗抗-HEV IgG 5 5型病毒性肝炎病原体、流行病学和临床特征型病毒性肝炎病原体、流行病学和临床特征 一、甲型肝炎病毒标志物检测一、甲型肝炎病毒标志物检测 1 RNA病毒病毒 2 只有只有1个血清型个血清型 4 引起典型的急性黄疸性肝炎引起典型的急性黄疸性肝炎 3 通过消化道（通过消化道（粪粪-口）途径口）途径传播传播 一、甲型肝炎病毒标志物检测一、甲型肝炎病毒标志物检测 检查：检查：HAV常在转氨酶升高前常在转氨酶升高前56天天就存在于患者的血液和粪便中。发就存在于患者的血液和粪便中。发病病2周开始，粪便中不再排
6、出周开始，粪便中不再排出HAV。目前临床上主要采用酶联免疫吸附目前临床上主要采用酶联免疫吸附试验（试验（ELISA）和放射免疫分析）和放射免疫分析（RIA）法检测）法检测HAV-IgM和和HAV-IgG，其次检测，其次检测HAVAg。HAV-RNA可采用可采用PCR技术检测。技术检测。一、甲型肝炎病毒标志物检测一、甲型肝炎病毒标志物检测【参考值参考值】均为阴性均为阴性 抗抗HAV-IgM、抗抗HAV-IgA、抗抗HAV-IgG HAVAg HAV-RNA 一、甲型肝炎病毒标志物检一、甲型肝炎病毒标志物检测测【临床意义临床意义】（1）抗抗HAV-IgM 是病毒衣壳蛋白抗体，于是病毒衣壳蛋白抗体，
7、于HAV感染感染1周后产生，血中持续周后产生，血中持续36个月，个月，是是 早期诊断甲肝的特异性抗体早期诊断甲肝的特异性抗体。抗抗HAV-IgA是感染早期肠道粘膜分泌的局部抗是感染早期肠道粘膜分泌的局部抗体。体。一、甲型肝炎病毒标志物检测一、甲型肝炎病毒标志物检测【临床意义临床意义】（2）抗抗HAV-IgG 代表着抗代表着抗HAV总抗总抗体，甲肝初期血中滴度已相当高，体，甲肝初期血中滴度已相当高，23个月达高峰。抗个月达高峰。抗HAV-IgG为保护性抗体，为保护性抗体，病愈后可长期存在病愈后可长期存在.对流行病学调查和接种疫苗效果对流行病学调查和接种疫苗效果的观察有重要意义的观察有重要意义。一
8、、甲型肝炎病毒标志物检测一、甲型肝炎病毒标志物检测【临床意义临床意义】（3）HAVAg 存在于存在于HAV感染后感染后1020天的粪便中，其阳性可证实天的粪便中，其阳性可证实HAV在体内的存在在体内的存在.见于急性期甲肝。见于急性期甲肝。发病第发病第1周时粪便阳性率为周时粪便阳性率为42.9%，12周为周为18.3%，2周后消失。周后消失。一、甲型肝炎病毒标志物检测一、甲型肝炎病毒标志物检测【临床意义临床意义】（4）HAV-RNA 从分子水平对从分子水平对HAV抗原给以更准确的说明抗原给以更准确的说明.对甲型肝炎的诊断具有特异性，对甲型肝炎的诊断具有特异性，对早期诊断的意义更大对早期诊断的意义
9、更大。临床少。临床少用。用。二、乙型肝炎病毒标志物检测二、乙型肝炎病毒标志物检测 （一）一）HBV的形态结构的形态结构 形态：形态：球形颗粒，直径约球形颗粒，直径约42nm 外膜：外膜：厚约厚约7nm，HBsAg+脂类脂类 内核（核衣壳）：内核（核衣壳）：直径直径27nm，HBcAg、DNAP、病毒病毒DNA、少量来源于宿主的磷酸激酶、少量来源于宿主的磷酸激酶 Biological Features of HBV 42 nm 22 nm 30-40 nm （二）（二）HBV在血清中的存在形式在血清中的存在形式 完整的病毒颗粒完整的病毒颗粒(Dane颗粒颗粒)，如前述，能，如前述，能复制，有传染
10、性；复制，有传染性；乙肝表面抗原颗粒，为乙肝表面抗原颗粒，为22 nm的小球型颗的小球型颗粒，由粒，由HBsAg和脂类组成，不含和脂类组成，不含DNA，不，不能复制，能复制，不具有传染性不具有传染性*，数量最多；，数量最多；管型颗粒，长管型颗粒，长30-40 nm的，由的，由HBsAg和和脂类组成，不含脂类组成，不含DNA，不能复制，不能复制，不具有不具有传染性传染性*，血清中数量最少。，血清中数量最少。（三三）检查项目及临床意义检查项目及临床意义 目前实验室常用的至少有四对抗原抗体系统：目前实验室常用的至少有四对抗原抗体系统：HBsAg和抗和抗HBs HBcAg和抗和抗HBc HBeAg和抗
11、和抗HBe Pre-S2和抗和抗Pre-S2 及及 乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒DNA 1.乙型肝炎病毒表面抗原乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）参考值参考值 ELISA法为阴性法为阴性（P/N2.1）临床意义临床意义 阳性见于急性乙肝的潜伏期阳性见于急性乙肝的潜伏期，发病时达高峰；如果发病后发病时达高峰；如果发病后3个月不转阴个月不转阴，则易发展成慢性乙型肝炎或肝硬化则易发展成慢性乙型肝炎或肝硬化。携带携带者者HbsAg也呈阴性也呈阴性，HbsAg是是HBV的外壳的外壳，不含不含DNA，故故HbsAg本身不具传染性本身不具传染性。总结总结 HBsAg阳性的意义阳性的意义 （1）HBV感染的潜伏期
12、；感染的潜伏期；（2）乙型肝炎急性期；乙型肝炎急性期；（3）慢性或迁延性乙型肝炎活动期；慢性或迁延性乙型肝炎活动期；（4）肝炎后肝硬化或原发性肝癌；肝炎后肝硬化或原发性肝癌；（5）无症状无症状HBsAg长期携带者长期携带者。(6)HbsAg阴性不能完全排除慢性乙型肝炎阴性不能完全排除慢性乙型肝炎 血清分离不佳或用肝素抗凝血常导致血清分离不佳或用肝素抗凝血常导致 HBsAg假阳性假阳性 注意注意 HBsAg假阴性假阴性 常见的原因为：常见的原因为：5%的急性感染者肝炎症状出现后仍阴性，极少数的慢的急性感染者肝炎症状出现后仍阴性，极少数的慢性感染者也为性感染者也为HBsAg阴性，这种情况需要检测抗
13、阴性，这种情况需要检测抗HBc-IgM及及HBV DNA；注意注意 HBsAg假阴性假阴性 S基因突变导致基因突变导致HBsAg的氨基酸结构改变，由于的氨基酸结构改变，由于多数商用试剂盒检测系统采用的为多克隆抗体检多数商用试剂盒检测系统采用的为多克隆抗体检测测HBsAg的的a决定簇，这一区域的点突变即可导致决定簇，这一区域的点突变即可导致临界测定值或阴性结果；临界测定值或阴性结果；注意注意 HBsAg假阴性假阴性 由于慢性病毒携带者（低水平由于慢性病毒携带者（低水平HBsAg携带者）或携带者）或HBV感染潜伏期，感染潜伏期，HBsAg浓浓度低于检测水平的下限。度低于检测水平的下限。注意注意 2
14、.乙型肝炎病毒表面抗体测定乙型肝炎病毒表面抗体测定 乙型肝炎病毒表面抗体是患者对乙型肝炎病毒表面抗体是患者对HbsAg所产所产生的一种抗体生的一种抗体，它对它对HbsAg有一定的中和作有一定的中和作用用，表明机体具有一定的免疫力表明机体具有一定的免疫力。参考值参考值ELISA法为阴性法为阴性（P/N2.1）；临床意义临床意义 抗抗-HBs是种保护性抗体，可阻是种保护性抗体，可阻止止HBV穿过细胞膜进入新的肝细胞，提示机穿过细胞膜进入新的肝细胞，提示机体对乙肝病毒有一定程度的免疫力。抗体对乙肝病毒有一定程度的免疫力。抗-HBs一般在发病后一般在发病后36个月才出现，可持续多年。个月才出现，可持续
15、多年。总结总结 血清抗血清抗HBs检测的意义检测的意义 （1）在乙型肝炎感染率调查时在乙型肝炎感染率调查时,HBsAg、抗抗-HBs和抗和抗-HBc均为感染率的指标均为感染率的指标。在这三项在这三项指标中指标中,只要其中一项阳性只要其中一项阳性,表示受过表示受过HBV感感染染。（2）抗抗HBs是对是对HBV免疫的指标免疫的指标,抗抗HBs阳性率和滴度表示人群的免疫状况阳性率和滴度表示人群的免疫状况。血清抗血清抗HBs检测的意义检测的意义 （3）乙型肝炎的诊断和鉴别诊断乙型肝炎的诊断和鉴别诊断,在在HBV感染后感染后3个月个月,血清中出现抗血清中出现抗HBs。采集双采集双份血清份血清（急性期和恢
16、复期急性期和恢复期）同时检测同时检测,抗抗HBs阳转阳转，或恢复期与急性期比较或恢复期与急性期比较,抗体滴抗体滴度有度有4倍或倍或4倍以上增长倍以上增长,表示这次感染为表示这次感染为HBV感染感染。血清抗血清抗HBs检测的意义检测的意义 （4）乙型肝炎疫苗免疫效果考察乙型肝炎疫苗免疫效果考察。在疫苗免在疫苗免疫前后疫前后,采集血清检测抗采集血清检测抗HBs,如抗如抗HBs阳转或抗体滴度明显提高阳转或抗体滴度明显提高,表示疫苗免疫效果表示疫苗免疫效果良好良好。否则免疫效果不佳否则免疫效果不佳。（5）对乙型肝炎预后的判断对乙型肝炎预后的判断。抗抗HBs的出的出现表示疾病处于恢复期现表示疾病处于恢复期，预后较佳预后较佳。同时可检出抗同时可检出抗HBs及及HBsAg见于：见于：急性急性HBV感染时一过性存在，两者浓度感染时一过性存在，两者浓度均很低（以免疫复合物的形式出现），均很低（以免疫复合物的形式出现），以后再采血检测仅有抗以后再采血检测仅有抗HBs；前后或同时感染两种亚型前后或同时感染两种亚型HBV，HBsAg短暂或持续存在反映其中一种亚型感染，短暂或持续存在反映其中一种亚型感染，抗抗H
