1、 第第1 1章章 组织学绪论组织学绪论 一、组织学的研究内容一、组织学的研究内容 组织学组织学(histology):):研究机体研究机体微细结构微细结构及其及其 相关功能相关功能的科学。的科学。组织组织 上皮组织上皮组织 结缔组织结缔组织 肌肉组织肌肉组织 神经组织神经组织 细胞细胞 细胞间质细胞间质 器官器官和和系统系统(细胞外基质细胞外基质)基本组织基本组织 结缔组织结缔组织connective tissue 上皮组织上皮组织epithelial tissue 肌组织肌组织muscle tissue 神经组织神经组织nervous tissue primary tissue 组织组织 t
2、issue:组织学结构观察组织学结构观察 组织学组织学 结构结构 光镜结构光镜结构用光学显微镜观察的结构用光学显微镜观察的结构(LM)(light microscope,LM 简称光镜简称光镜)电镜结构电镜结构电子显微镜下观察的结构电子显微镜下观察的结构(EM)(electron microscope,EM简称电镜)简称电镜)又称超微结构又称超微结构(ultrastructure)二、组织学的研究方法和常用技术二、组织学的研究方法和常用技术 (一一)光学显微镜技术光学显微镜技术 1 1、常用组织切片标本制备技术、常用组织切片标本制备技术 石蜡切片术石蜡切片术 取材和固定取材和固定;脱水和包埋脱
3、水和包埋;切片和染色切片和染色;封片。封片。其他;火棉胶包埋其他;火棉胶包埋,冰冻切片冰冻切片,涂片涂片,铺片铺片,磨片等磨片等 苏木精苏木精 伊红伊红 碱性染料碱性染料 酸性染料酸性染料 染成红色染成红色 (嗜酸性)(嗜酸性)细胞核中的染色质、细胞核中的染色质、细胞质中的核糖体细胞质中的核糖体 细胞质细胞质 细胞间质成份细胞间质成份 染成蓝色染成蓝色 (嗜碱性)(嗜碱性)常用染色方法:常用染色方法:HE染色染色(Hematoxylin)(Eosin)HE染色染色 嗜碱性:可使细胞核内的染色质嗜碱性:可使细胞核内的染色质 及细胞质内的核糖体等及细胞质内的核糖体等 结构染成蓝紫色。结构染成蓝紫色
4、。嗜酸性:可使多数细胞的细胞质嗜酸性:可使多数细胞的细胞质 染成粉红色。染成粉红色。中性:中性:与两种染液亲合力都不强。与两种染液亲合力都不强。HE染色后组织结构的嗜色性染色后组织结构的嗜色性 嗜碱性嗜碱性 嗜酸性嗜酸性 A 嗜银性嗜银性 B 嗜铬性嗜铬性 C 异染性异染性 其它染色方法其它染色方法 几种特殊显微镜术几种特殊显微镜术 (1)相差显微镜)相差显微镜 (phase contrast microscope)用于观察生活细胞和未经染色细胞的形态结构。用于观察生活细胞和未经染色细胞的形态结构。神经干细胞培养神经干细胞培养(2)荧光显微镜荧光显微镜(fluorescence microsc
5、ope)用以观察细胞、组织内用以观察细胞、组织内 荧光物质的分布。荧光物质的分布。(二二)共焦激光扫描显微镜共焦激光扫描显微镜 共焦激光扫描显微镜共焦激光扫描显微镜 (laser scanning confocal microscope,LSCM)由激光光源、共焦成像扫描由激光光源、共焦成像扫描 系统、电子光学系统和微机系统、电子光学系统和微机 图象分析系统所构成。图象分析系统所构成。可对样品进行断层扫描重建可对样品进行断层扫描重建 三维图像,进行体视学分析;三维图像,进行体视学分析;测定细胞内测定细胞内pH、钙浓度等;、钙浓度等;更精确地检测、识别,更精确地检测、识别,组织细胞的微细结构及其
6、变组织细胞的微细结构及其变 化。化。CLSM又称细胞又称细胞CT。LSCM (三三)电子显微镜技术电子显微镜技术 (electron microscope,EM)透射电镜透射电镜(transmission electron microscope,TEM)分辨率为分辨率为0.1-0.2nm,可放大几万可放大几万几十万倍几十万倍 观察细胞内部结构观察细胞内部结构 扫描电镜(扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)观察组织或细胞表面的立体结构观察组织或细胞表面的立体结构 1.糖类显示法糖类显示法-PAS反应:反应:过碘酸过碘酸雪夫反雪夫反应应(periodic a
7、cid Schiff reaction,PAS):检测组织或细胞中有无多糖存在。检测组织或细胞中有无多糖存在。原理:原理:多糖多糖 PAPA 氧化氧化 醛醛 SchiffSchiff 试剂试剂 紫红色沉淀紫红色沉淀(四四)组织化学和细胞化学技术组织化学和细胞化学技术 PAS反应阳性部位即表示多糖和蛋白多糖的存在反应阳性部位即表示多糖和蛋白多糖的存在 PASPAS阳性阳性 小肠上皮小肠上皮 组织细胞化学染色图片组织细胞化学染色图片 酶细胞化学酶细胞化学 神经元神经元ACPACP酶阳性酶阳性 脂类显示法 苏丹 脂类显示法脂类显示法 苏丹苏丹 锇酸锇酸 髓鞘染色髓鞘染色 核酸显示法核酸显示法 利用抗
8、原(利用抗原(antigen,Ag),抗体(),抗体(antibody)特异)特异 结合的原理,用已知抗体检测未知抗原的一种方法。结合的原理,用已知抗体检测未知抗原的一种方法。免疫免疫组织化学与组织化学与细胞化学原理细胞化学原理(五五)免疫组织化学与细胞化学技术免疫组织化学与细胞化学技术 (六六)组织培养和组织工程组织培养和组织工程 A 获取组织获取组织 B 分离、培养种子细胞分离、培养种子细胞 C 制备三维支架制备三维支架 D 将种子细胞种植于支架将种子细胞种植于支架 E 将细胞将细胞-支架复合物植支架复合物植 入组织缺损处入组织缺损处 组织工程基本方法示意图组织工程基本方法示意图 学习绪论
9、的要求:熟悉人体组织学的研究内容熟悉人体组织学的研究内容。掌握掌握HEHE染色的基本原理染色的基本原理。了解光学显微镜了解光学显微镜、电子显微镜术和电子显微镜术和 组织化学技术组织化学技术。掌握人体结构与功能的学习方法掌握人体结构与功能的学习方法。细细 胞胞的的基基本本结结构构 细胞膜细胞膜 细胞质细胞质 细胞核细胞核 细胞基质细胞基质 细胞器细胞器 包涵物包涵物 线粒体线粒体 内质网内质网 核糖体核糖体 高尔基复合体高尔基复合体 溶酶体溶酶体 微体微体 中心体中心体 细胞骨架细胞骨架 糖原糖原 脂滴脂滴 色素色素 第第2章章 细细 胞胞(cell)细胞光镜结构与超微结构模式图细胞光镜结构与超
10、微结构模式图 细胞超微结构模式图细胞超微结构模式图 1.1.细胞核细胞核 2.2.细胞质细胞质 (一一)细胞器细胞器 1、核糖体、核糖体 由核糖体核糖核酸和蛋白质组成。由核糖体核糖核酸和蛋白质组成。功能:功能:合成蛋白质。合成蛋白质。两种存在形式:两种存在形式:游离核糖体游离核糖体(free ribosome)附着核糖体附着核糖体(attached ribosome)二、细胞质二、细胞质 核糖体及蛋白质合成与核糖体电镜结构核糖体及蛋白质合成与核糖体电镜结构 核糖体及蛋白质合成示意图核糖体及蛋白质合成示意图 核糖体核糖体(TEM)(一一)细胞器细胞器 2内质网内质网(endoplasmic re
11、ticulum,ER)扁平囊状或管泡状膜性结构扁平囊状或管泡状膜性结构。粗面内质网粗面内质网(rough endoplasmic reticulum,RER)膜表面有附着核糖体膜表面有附着核糖体 滑面内质网滑面内质网(smooth endoplasmic reticulum,SER)膜表面不附着核糖体膜表面不附着核糖体 (一一)细胞器细胞器 主要合成分泌蛋白质主要合成分泌蛋白质 粗面内质网(粗面内质网(TEM)粗面内质网粗面内质网(RER)(一一)细胞器细胞器 滑面内质网滑面内质网(SER)功能:功能:(1)合成类固醇激素)合成类固醇激素 (2)合成脂类)合成脂类 (3)解毒作用)解毒作用 (
12、4)离子贮存与释放)离子贮存与释放 滑面内质网滑面内质网(TEM)(一一)细胞器细胞器 EM:扁平囊扁平囊、小泡小泡、大泡大泡 凸凸面面形成面,形成面,有小泡有小泡 凹凹面面成熟面成熟面,有大泡,有大泡 功能:进行蛋白质加工、功能:进行蛋白质加工、浓缩、修饰、糖化浓缩、修饰、糖化 高尔基复合体高尔基复合体(TEM)3.3.高尔基复合体高尔基复合体(Golgi complex,Gol)(一一)细胞器细胞器 标志酶标志酶ACPase 初级溶酶体初级溶酶体(primary lysosome)是新生成的溶酶体是新生成的溶酶体 次级溶酶体次级溶酶体(secondary lysosome)-又称吞噬性溶酶
13、体又称吞噬性溶酶体 功能细胞消化器功能细胞消化器 溶酶体溶酶体(TEM)4 4溶酶体溶酶体(1ysosome,Ly)(一一)细胞器细胞器 (2)(2)次级溶酶体次级溶酶体 可分为:可分为:自噬溶酶体吞噬衰老和破损的细胞器自噬溶酶体吞噬衰老和破损的细胞器 异噬溶酶体吞噬外源性物质异噬溶酶体吞噬外源性物质 残余体残余体 脂褐素等脂褐素等 (1)(1)初级溶酶体初级溶酶体 (一一)细胞器细胞器 5.5.线粒体线粒体(mitochondrion,Mit)功能:能量代谢中心,称“供能器”。功能:能量代谢中心,称“供能器”。线粒体嵴分为两类:线粒体嵴分为两类:板层状嵴板层状嵴 一般细胞线粒体一般细胞线粒体
14、 管泡状嵴管泡状嵴 合成类固醇激素细胞合成类固醇激素细胞 线粒体线粒体(TEM)(一一)细胞器细胞器 6 6过氧化物酶体过氧化物酶体(peroxisome)又称微体又称微体(microbody,Mb),标志酶标志酶过氧化氢酶过氧化氢酶 功能:功能:参与脂肪酸氧化;参与脂肪酸氧化;分解过氧化氢,解毒。分解过氧化氢,解毒。过氧化物酶体(过氧化物酶体(TEM)(一一)细胞器细胞器 7 7中心体中心体(centrosome)一对互相垂直的中心粒构成一对互相垂直的中心粒构成。功能:参与细胞分裂功能:参与细胞分裂,形成纺锤体形成纺锤体,使染色体的分离使染色体的分离。中心粒(中心粒(TEM)()()右下图横
15、断右下图横断 中心粒卫星中心粒卫星 (一一)细胞器细胞器-细胞骨架细胞骨架 8细胞骨架细胞骨架(cytoskeleton)组成:微管、微丝、中间丝。组成:微管、微丝、中间丝。(1)微管)微管(microtubule Mt)由微管蛋白由微管蛋白(tubulin)聚合。聚合。单微管单微管不稳定不稳定 二联微管二联微管于纤毛、鞭毛中于纤毛、鞭毛中 三联微管三联微管构成中心体、基体构成中心体、基体 功能:功能:支架作用、维持细胞形状、参与支架作用、维持细胞形状、参与 细胞运动;物质运输、信号转导。细胞运动;物质运输、信号转导。A 微管微管 (一一)细胞器细胞器-细胞骨架细胞骨架 (2)微丝)微丝(mi
16、crofilament,Mf)粗丝肌球蛋白粗丝肌球蛋白(myosin)组成组成 细丝肌动蛋白为主细丝肌动蛋白为主 功能:支持作用功能:支持作用 (伪足、微绒毛中丰富)(伪足、微绒毛中丰富)细胞收缩、变形运动。细胞收缩、变形运动。B 微丝微丝 (一一)细胞器细胞器-细胞骨架细胞骨架 分为五种,(免疫组化方法)分为五种,(免疫组化方法)角质蛋白丝角质蛋白丝分布上皮细胞分布上皮细胞 结蛋白丝结蛋白丝 分布于肌细胞分布于肌细胞 波形蛋白丝波形蛋白丝 分布于间充质细胞分布于间充质细胞 分化来的细胞,分化来的细胞,神经丝神经丝分布于神经元中分布于神经元中 神经胶质丝神经胶质丝分布于星型胶质细胞,分布于星型胶质细胞,GFAP阳性表达。阳性表达。(3 3)中间丝)中间丝(intermediate filament)C 中间丝中间丝(二二)包涵物包涵物(inclusions)1.糖原颗粒糖原颗粒 LM:PAS染色时呈紫红色。染色时呈紫红色。EM:电子密度高,无膜包裹,电子密度高,无膜包裹,两种类型:两种类型:颗粒不规则,散在于肌细胞;颗粒不规则,散在于肌细胞;颗粒花簇状,多见于肝细胞。颗粒花簇状,多见于