1、1 阴道分泌物检测新技术阴道分泌物检测新技术 阴道炎五联检阴道炎五联检 2 提纲提纲 背景背景 1.1.阴道微生态环境阴道微生态环境 2.2.常见的阴道疾病常见的阴道疾病 3.3.白带检测方法白带检测方法 4.4.方法优势方法优势 3 背景背景 女性生殖道感染性疾病是全球重大社会问题和公共卫生问题女性生殖道感染性疾病是全球重大社会问题和公共卫生问题 WHO1995WHO1995年统计年统计 全球每年有全球每年有3.333.33亿可治愈的新病例发生,主要在发展中国家。亿可治愈的新病例发生,主要在发展中国家。生殖道感染造成不育达生殖道感染造成不育达2020-60%60%不等,发达国家不等,发达国家
2、36%36%,不发达国家达,不发达国家达85%85%中国中国 20112011年年8 8月月6 6日公布日公布 每年有每年有2 2亿人感染,亿人感染,5%5%-8%8%患者一年中有患者一年中有3 3次以上复发,治疗费达次以上复发,治疗费达400400亿人亿人 民币。民币。60%60%的输卵管性不育为感染造成。的输卵管性不育为感染造成。常见病、多发病导致不孕不育、流产,出生人口素质下降,增加感染常见病、多发病导致不孕不育、流产,出生人口素质下降,增加感染HIVHIV 的机会,危害女性身心健康,对婚姻质量及家庭稳定产生潜在和深远影响的机会,危害女性身心健康,对婚姻质量及家庭稳定产生潜在和深远影响。
3、4 背景背景 常见疾病发病率常见疾病发病率 1 1、念珠菌外阴阴道炎发病率、念珠菌外阴阴道炎发病率31.3%31.3%2 2、细菌性阴道病发病率、细菌性阴道病发病率10.44%10.44%3 3、滴虫性阴道炎、滴虫性阴道炎7.44%7.44%4 4、生殖道菌群失调:、生殖道菌群失调:89.26%89.26%中国实用妇产科杂志中国实用妇产科杂志20092009年年1212月第月第2525卷第卷第1212期期阴道炎的诊治进展阴道炎的诊治进展文文 章,对章,对69826982例门诊就诊女性的统计分析。作者:吴文湘、廖秦平例门诊就诊女性的统计分析。作者:吴文湘、廖秦平 5 20062006年年3 3月
4、月-20072007年年1010月,月,对北京大学第对北京大学第一人民医院妇一人民医院妇产科门诊的产科门诊的69826982例女性就例女性就诊者数据分析诊者数据分析 微生态正常微生态正常 微生态失调微生态失调 例数例数 750 6232 背景背景 6 背景背景 下生殖道微生态状况下生殖道微生态状况11.70%24.50%1.52%19.72%42.55%BVVVCBV+VVC菌群异常pH、清洁度、过氧化氢功能异常BV VVC BV+VVC 菌群异常菌群异常 pH、清洁度、清洁度、H2O2功能异功能异常常 729 1527 95 1229 2652 7 一一.阴道微生物群阴道微生物群 定植于阴道
5、内的定植于阴道内的微生物主要微生物主要由:细菌、真菌、由:细菌、真菌、原虫和病毒组成。阴道菌群约有原虫和病毒组成。阴道菌群约有2929种,由多种厌种,由多种厌氧菌和需氧菌构成。氧菌和需氧菌构成。1.1.革兰氏阳性需氧菌及兼性厌氧菌:革兰氏阳性需氧菌及兼性厌氧菌:乳酸杆菌、棒状杆菌、乳酸杆菌、棒状杆菌、非溶血性链球菌、肠球菌及表皮葡萄球菌非溶血性链球菌、肠球菌及表皮葡萄球菌 2.2.革兰氏阴性需氧菌及兼性厌氧菌:革兰氏阴性需氧菌及兼性厌氧菌:加德纳菌、大肠埃希加德纳菌、大肠埃希菌及摩根菌菌及摩根菌 3.3.厌氧菌:厌氧菌:消化球菌、消化链球菌、类杆菌、动弯杆菌、梭杆菌消化球菌、消化链球菌、类杆菌
6、、动弯杆菌、梭杆菌及普雷沃菌及普雷沃菌 4.4.其它条件致病菌:支原体、衣原体、念珠菌其它条件致病菌:支原体、衣原体、念珠菌 8 阴道微阴道微生态环境生态环境中,保持着协调平衡的状态中,保持着协调平衡的状态 虽然正常阴道内有很多种细菌存在,但是由于阴道与这些菌群虽然正常阴道内有很多种细菌存在,但是由于阴道与这些菌群之间形成生态平衡并不致病,在维持阴道生态平衡中,雌激素、之间形成生态平衡并不致病,在维持阴道生态平衡中,雌激素、乳酸杆菌及阴道乳酸杆菌及阴道PHPH起重要作用。阴道正常酸性环境(起重要作用。阴道正常酸性环境(PH4.5PH4.5,多在多在3.83.8-4.44.4)但是阴道生态平衡一
7、旦被打破或外源性病原体侵入,即可导致但是阴道生态平衡一旦被打破或外源性病原体侵入,即可导致炎症发生。若体内雌激素下降或阴道炎症发生。若体内雌激素下降或阴道PHPH升高,如频繁性交(性升高,如频繁性交(性交后交后PHPH可上升至可上升至7.27.2维持维持6 6-8 8小时)、阴道灌洗等均可使阴道小时)、阴道灌洗等均可使阴道PHPH升高,不利于乳酸杆菌生长。此外长期应用抗生素抑制乳酸杆升高,不利于乳酸杆菌生长。此外长期应用抗生素抑制乳酸杆菌生长,或机体免疫力低下,均可使其他致病菌成为优势菌,菌生长,或机体免疫力低下,均可使其他致病菌成为优势菌,引起炎症。引起炎症。9 阴道优势菌的特点阴道优势菌的
8、特点 乳酸杆菌乳酸杆菌:革兰氏阳性杆菌革兰氏阳性杆菌、无芽孢、鞭毛、荚膜,细长有弯曲或呈、无芽孢、鞭毛、荚膜,细长有弯曲或呈球杆状、杆状球杆状、杆状、单个、双极、单个、双极 链状无动力的链状无动力的厌氧或兼性厌氧菌厌氧或兼性厌氧菌。生长适宜温度。生长适宜温度3030-4040,最适,最适PH3.0PH3.0-4.84.8 阴道内最常见乳杆菌有:阴道内最常见乳杆菌有:1 1、嗜酸、卷曲、格氏、詹氏乳杆菌嗜酸、卷曲、格氏、詹氏乳杆菌主要产主要产H H2 2O O2 2 2 2、唾液乳杆菌、唾液乳杆菌 3 3、发酵乳杆菌、发酵乳杆菌 等等2020多种多种 10 阴道优势菌的作用阴道优势菌的作用 乳酸
9、杆菌的作用:乳酸杆菌的作用:1 1、分解糖原,、分解糖原,维持维持阴道阴道酸性酸性环境环境 2 2、产生产生多种多种抑菌物质抑菌物质:乙酸、:乙酸、H H2 2O O2 2、乳酸菌素、硬脂酸等乳酸菌素、硬脂酸等 3 3、竞争粘附:也称占位性保护、竞争粘附:也称占位性保护 4 4、竞争营养:大量定制于阴道中的乳酸杆菌营养处于竞争优势状、竞争营养:大量定制于阴道中的乳酸杆菌营养处于竞争优势状态,利用阴道上皮细胞中的糖原,减少其它菌群的碳源供应,态,利用阴道上皮细胞中的糖原,减少其它菌群的碳源供应,通过竞争营养物而干扰其它菌的生长。通过竞争营养物而干扰其它菌的生长。11 二二.阴道最常见感染阴道最常
10、见感染 常见感染性疾病常见感染性疾病 1 1、细菌性阴道病(、细菌性阴道病(BVBV)细菌性阴道病(细菌性阴道病(Bacteral Vaginosis,Bacteral Vaginosis,简称简称BVBV)它是)它是由于阴道内由于阴道内微生态平衡失调微生态平衡失调,对人体有益的优势菌,对人体有益的优势菌乳乳酸杆菌的大量减少或消失,而加特纳氏菌、动弯杆菌属、酸杆菌的大量减少或消失,而加特纳氏菌、动弯杆菌属、类杆菌属、普氏杆菌属等厌氧菌大量增生所引起的一种类杆菌属、普氏杆菌属等厌氧菌大量增生所引起的一种无阴道粘膜炎症性表现的综合症。无阴道粘膜炎症性表现的综合症。12 致病机理致病机理 细菌性阴道
11、病为内源性感染,主要是由于正常阴道菌群细菌性阴道病为内源性感染,主要是由于正常阴道菌群(乳酸杆菌(乳酸杆菌)被阴道加特纳杆菌、厌氧菌及人型支原体等混合被阴道加特纳杆菌、厌氧菌及人型支原体等混合菌群替代所致。促发阴道正常菌群发生转变,发展成菌群替代所致。促发阴道正常菌群发生转变,发展成BVBV的启动的启动因素和机制尚不清楚。因素和机制尚不清楚。乳酸杆菌对维持正常阴道的生态内环境十分关键。患乳酸杆菌对维持正常阴道的生态内环境十分关键。患BVBV时时乳酸杆菌减少而其它细菌增多,导致乙酸浓度降低,胺类和氨乳酸杆菌减少而其它细菌增多,导致乙酸浓度降低,胺类和氨增加,使阴道分泌物增加,使阴道分泌物PHPH
12、值增加,厌氧菌的代谢产物如腐胺、尸值增加,厌氧菌的代谢产物如腐胺、尸胺和三甲胺,使阴道分泌物具有鱼腥样气味。胺和三甲胺,使阴道分泌物具有鱼腥样气味。BVBV相关的病原体可产生毒力因子包括细胞毒素、唾液酸酶、相关的病原体可产生毒力因子包括细胞毒素、唾液酸酶、粘多糖酶和胶原酶,造成上皮细胞损伤,使液体渗出及阴道鳞粘多糖酶和胶原酶,造成上皮细胞损伤,使液体渗出及阴道鳞状上皮细胞脱落,产生典型的细菌性阴道病的分泌物。状上皮细胞脱落,产生典型的细菌性阴道病的分泌物。13 流行病学流行病学 细菌性阴道病的患病率随种族及人群而异。国外资细菌性阴道病的患病率随种族及人群而异。国外资料表明在非选择性人群中料表明
13、在非选择性人群中BVBV的患病率为的患病率为10%10%-20%.20%.在性病在性病门诊就诊妇女中的患病率门诊就诊妇女中的患病率3636-50%.50%.因该病除分泌物异常因该病除分泌物异常外,无其它症状,患者常不就医,因此很难估计人群中外,无其它症状,患者常不就医,因此很难估计人群中的发病情况。的发病情况。14 2 2、霉菌性阴道炎、霉菌性阴道炎(VVC(VVC)主要分为白色念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠主要分为白色念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌、克柔氏念珠菌。对菌、克柔氏念珠菌。对 909 909 例培养阳性的例培养阳性的 VVC VVC 进行研究进行研究 ,白念珠菌占白念珠菌占77.1%
14、,77.1%,光滑念珠菌占光滑念珠菌占 14.14.6%,6%,克柔念珠菌占克柔念珠菌占 4.0%,4.0%,热带念珠菌占热带念珠菌占 2.3%,2.3%,近平滑念珠菌占近平滑念珠菌占 0.6 0.6,其它占,其它占 1.2%1.2%。15 3 3、滴虫性阴道炎(、滴虫性阴道炎(TV)TV)一种常见的妇科感染性疾病,一种常见的妇科感染性疾病,1 1、滴虫性阴道炎的危害、滴虫性阴道炎的危害主要主要是会令人难受及主要主要是会令人难受及疼痛不适疼痛不适;2 2、滴虫性阴道炎可并发、滴虫性阴道炎可并发滴虫性滴虫性尿道炎、膀胱炎、肾盂炎尿道炎、膀胱炎、肾盂炎;3 3、由于滴虫能吞噬精子,、由于滴虫能吞噬
15、精子,可引起不孕症,影响生活质量;可引起不孕症,影响生活质量;4 4、阴道毛滴虫长期存在于阴、阴道毛滴虫长期存在于阴道内,消耗或吞噬阴道上皮细胞内的糖原,阻碍乳酸生成,不道内,消耗或吞噬阴道上皮细胞内的糖原,阻碍乳酸生成,不仅破坏阴道的弱酸性环境,还有可能引起阴道细胞发育异常,仅破坏阴道的弱酸性环境,还有可能引起阴道细胞发育异常,诱发癌前期诱发癌前期病变病变 16 三三.目前常规检测方法目前常规检测方法:阴道分泌物检查阴道分泌物检查 镜检项目:白细胞(清洁度)念珠菌(霉菌)滴虫 线索细胞(显微镜下很难观察)是判定BV的一个必要条件。17 1.4 清洁度判断标准 清洁度 白细胞 上皮细胞 乳酸杆
16、菌 杂菌 度 0-5(-)大量大量+大量大量+度度 5-15()中量中量+中量中量+少少 度度(+)15-30(+)少少+少少+较多较多 度度 30(+)少少+大量大量 18 优势菌及病原体染色图片优势菌及病原体染色图片 优势菌:乳酸杆菌优势菌:乳酸杆菌 念珠菌念珠菌 白细胞、滴虫白细胞、滴虫 线索细胞线索细胞 19 目前检测现状目前检测现状 由于分泌物标本成份复杂,湿片高倍镜检下易漏检、由于分泌物标本成份复杂,湿片高倍镜检下易漏检、误判误判 20 目前白带常规镜检特点及存在问题:目前白带常规镜检特点及存在问题:1 1、镜检观察,检测标准不统一,操作人员需依赖较强的工作经验,、镜检观察,检测标准不统一,操作人员需依赖较强的工作经验,人为因素影响大,主观性强,稍有疏忽或经验欠缺者,容易漏人为因素影响大,主观性强,稍有疏忽或经验欠缺者,容易漏检,误判。检,误判。2 2、医院标本量大、劳动强度大,易视觉疲劳致漏检,误判。、医院标本量大、劳动强度大,易视觉疲劳致漏检,误判。3 3、一般是不进行染色,因此乳酸杆菌不好辨认;、一般是不进行染色,因此乳酸杆菌不好辨认;4 4、观察清洁度容易受到涂片厚