1、 临床检验诊断学教研室临床检验诊断学教研室 第八章第八章 血液及血液成分的制血液及血液成分的制备和保存备和保存 教学目标教学目标 掌握掌握(1)成分输血的概念及意义;)成分输血的概念及意义;(2)血液制品的性质、贮存、运输及注意事项。)血液制品的性质、贮存、运输及注意事项。熟悉熟悉 血液细胞成分的手工制备过程和注意事项。血液细胞成分的手工制备过程和注意事项。了解了解 血细胞分离机的原理及其使用;血细胞分离机的原理及其使用;血液:全血,将血液采集于很有保养液的血血液:全血,将血液采集于很有保养液的血袋,不做任何处理。袋,不做任何处理。含有各种血液成分、抗凝剂和保护剂等含有各种血液成分、抗凝剂和保
2、护剂等 血液保养液针对储存红细胞而设计血液保养液针对储存红细胞而设计 血液成分:将采集的全血用物理方法分离成纯度高血液成分:将采集的全血用物理方法分离成纯度高、临床疗效好的单一血液成分如红细胞、血小板等、临床疗效好的单一血液成分如红细胞、血小板等。血液成分制备:狭义、广义血液成分制备:狭义、广义 狭义的血液成分制备:血液成分制备,仅使用物理狭义的血液成分制备:血液成分制备,仅使用物理方法提取并在临床使用的血液成分;血站方法提取并在临床使用的血液成分;血站 广义的血液成分制备:精细物理和(或)化学,提广义的血液成分制备:精细物理和(或)化学,提炼精制高度浓缩、纯化的,如白蛋白等炼精制高度浓缩、纯
3、化的,如白蛋白等 成分输血的优点 治疗效果好:浓度高、治疗好。治疗效果好:浓度高、治疗好。成分血液保存质量好,保存时间长成分血液保存质量好,保存时间长 节约血液,一血多用节约血液,一血多用 更安全更安全 第一节第一节 全血的制备和保存全血的制备和保存 全血:将一定量的血液采集到含有一定保养液的采血全血:将一定量的血液采集到含有一定保养液的采血袋所制成的血液制剂。袋所制成的血液制剂。我国我国200ml为一单位,国际为一单位,国际450ml为一单位。为一单位。站内采血及时储存再站内采血及时储存再26专用冰箱。专用冰箱。站外采血后站外采血后2h内快速将血液冷却到内快速将血液冷却到2024,此条件,此
4、条件下运输。下运输。血站全血发往临床,温度在血站全血发往临床,温度在210,不超,不超24h。全血保存全血保存 保存温度:保存温度:26 各种保存液的有效期:红细胞在保存期末输各种保存液的有效期:红细胞在保存期末输入到人体入到人体24h后,红细胞存活率后,红细胞存活率70%以上。以上。必须严格按无菌操作规程进行;无凝块、无溶血、无乳糜,采血标示量10;采血速度:200ml全血采集时间应小于3min;400ml全血小于6min;制备成分的全血在采集中如出现血流不畅,不用于制备浓缩血小板。全血采集时的注意事项()保存液是针对红细胞设计的,只对红细胞有保存作用;()白细胞最佳保存条件:室温;()血小
5、板需要在士振荡条件下保存,士保存有害;()凝血因子最佳保存条件:20以下冷冻 凝血因子和不稳定,保存天活性丧失%。全血并不全?血液保存期血液保存期 制备原理:是利用血细胞的比重、各 种血细胞的体积等因素的不同,通过离心分层而得到浓度较高的单一成分。手工法 血细胞分离 机单采法 分离方法 血液成分的分离制备血液成分的分离制备 手工法 多联塑料采血袋:多袋相连成了密闭无菌系统,全血采集到多联袋的首袋,通过离心分成不同的层面。大容量低温离心机:在一定温度、转速、时间等因素下综合分离各种成分。血小板 白细胞 血浆 红细胞 基本设备和器材 血液细胞成分手工制 备所需要注意的事项 制备浓缩血小板要求在采血
6、后制备浓缩血小板要求在采血后6h6h之内进行之内进行,制备新鲜冰冻血浆保养液为制备新鲜冰冻血浆保养液为ACDACD的血液应的血液应6h6h 内分离并速冻;保养液是内分离并速冻;保养液是CPDCPD、CP2DCP2D、CPDACPDA-1 1的血液应在的血液应在8h8h。血小板离心温度为血小板离心温度为222222,冷沉淀离心温度为,冷沉淀离心温度为 2 222,其它血液成分在,其它血液成分在4 4-1010条件下离心制备。条件下离心制备。第二节 红细胞的制备和保存 浓缩红细胞浓缩红细胞 悬浮红细胞悬浮红细胞 少白细胞红细胞少白细胞红细胞 洗涤红细胞洗涤红细胞 冰冻红细胞冰冻红细胞 年轻红细胞年
7、轻红细胞 辐照红细胞辐照红细胞 又称压积红细胞或少浆红:将采集的全血中大又称压积红细胞或少浆红:将采集的全血中大部分血浆在全封闭条件下分离后剩余部分制成部分血浆在全封闭条件下分离后剩余部分制成 含有全血中全部红细胞、白细胞、大部分血小含有全血中全部红细胞、白细胞、大部分血小板和部分血浆板和部分血浆 保存温度:保存温度:2 266 浓缩红细胞 又称添加剂红细胞,又称添加剂红细胞,将全血中的大部分将全血中的大部分(90%)血浆在全封闭条件下分离后并)血浆在全封闭条件下分离后并向剩余物中加入红细胞添加液制成的红向剩余物中加入红细胞添加液制成的红细胞成分血。细胞成分血。应用最广泛应用最广泛 多联袋制备
8、多联袋制备 悬浮红细胞 少白细胞 的红细胞 浓缩少白细胞红细胞浓缩少白细胞红细胞:将采集到多联袋的全血中的将采集到多联袋的全血中的大部分白细胞、血小板及血浆在全封闭的条件下去大部分白细胞、血小板及血浆在全封闭的条件下去除后制成的红细胞成分血。除后制成的红细胞成分血。悬浮少白细胞红细胞:将采集到多联袋的全血中大悬浮少白细胞红细胞:将采集到多联袋的全血中大部分白细胞、血小板及血浆在全封闭条件下去除后部分白细胞、血小板及血浆在全封闭条件下去除后向剩余物中加入红细胞保存液制成的红细胞成分血。向剩余物中加入红细胞保存液制成的红细胞成分血。过滤法:白细胞过滤器,减除白细胞过滤法:白细胞过滤器,减除白细胞9
9、9%。洗涤红细胞 定义:定义:将血液用生理盐水洗涤,去除绝大部分非红将血液用生理盐水洗涤,去除绝大部分非红细胞成分,并将红细胞悬浮在生理盐水中所制成细胞成分,并将红细胞悬浮在生理盐水中所制成的红细胞成分的红细胞成分 血浆清除率血浆清除率9898 白细胞的清除率白细胞的清除率8080,红细胞的回收率红细胞的回收率7070 国内规定在国内规定在2 266保存,保存时间不超过保存,保存时间不超过24h24h 定义:定义:血细胞成分加入红细胞保护剂甘油血细胞成分加入红细胞保护剂甘油,深低温冷冻深低温冷冻保存,经解冻去甘油后,加入一定量的生理盐水或保存,经解冻去甘油后,加入一定量的生理盐水或血浆制成的红
10、细胞成分血血浆制成的红细胞成分血 高浓度甘油冷冻的红细胞保存高浓度甘油冷冻的红细胞保存3 3年,年,-8080保存;低浓保存;低浓度甘油超速冷冻红细胞可以保存度甘油超速冷冻红细胞可以保存1010年。年。解冻去甘油红细胞存储温度解冻去甘油红细胞存储温度2 26 6,保存期,保存期2424小时小时 冷冻解冻去甘 油红细胞 年轻红细胞年轻红细胞 年轻红细胞:具有较多网织红细胞、酶活性年轻红细胞:具有较多网织红细胞、酶活性相对增高、平均细胞年龄较小的红细胞成分相对增高、平均细胞年龄较小的红细胞成分。保存温度与全血相同保存温度与全血相同 含含ACD-B、CPD保养液的年轻红细胞保存期保养液的年轻红细胞保
11、存期为为21天;含天;含CPDA-1保养液的年轻红细胞保存保养液的年轻红细胞保存期期35天。天。辐照红细胞 定义:定义:用射线照射灭活残存在红细胞中的淋巴用射线照射灭活残存在红细胞中的淋巴细胞制成的红细胞成分血细胞制成的红细胞成分血 用于辐射红细胞的射线有用于辐射红细胞的射线有 射线射线 对有核细胞的杀死率对有核细胞的杀死率100%100%保存温度保存温度2 266,欧洲会议推荐红细胞的,欧洲会议推荐红细胞的辐照应在采血后辐照应在采血后1414天内进行,辐照后保存天内进行,辐照后保存时间时间1414天。天。手工制备方法手工制备方法 PRP法 白膜法 血小板制品 浓缩血小板贮存条件为:温度浓缩血
12、小板贮存条件为:温度2020-2424,振动频率,振动频率6060次次minmin,振幅,振幅5cm5cm。普通血袋浓缩血小板保存期为普通血袋浓缩血小板保存期为24h24h,专,专用血袋的浓缩血小板保存期为用血袋的浓缩血小板保存期为5d5d。我国规定一个治疗单位(剂量)我国规定一个治疗单位(剂量)2.52.510101111 血细胞分离机单采法 保存和运输的条件:温度保存和运输的条件:温度2020-2424 血小板的含量血小板的含量2.52.510101111/袋,白细胞袋,白细胞含量含量 5.05.010108 8 /袋,红细胞的含量袋,红细胞的含量 8.08.010109 9/袋。袋。第四
13、节第四节 血浆制品及冷沉淀的制备血浆制品及冷沉淀的制备 物理方法:物理方法:新鲜血浆通过离心,分离出血液细胞,新鲜血浆通过离心,分离出血液细胞,通过快速冷冻的方法将其冷冻并储存在通过快速冷冻的方法将其冷冻并储存在2020以下。以下。物理化学方法:物理化学方法:利用物理方法的基础上联合使用化利用物理方法的基础上联合使用化学方法制备更多的血浆衍生物。如白蛋白、免疫球蛋学方法制备更多的血浆衍生物。如白蛋白、免疫球蛋白、凝血因子等。白、凝血因子等。制备原理 在全血采集后在全血采集后6h6h或或8h8h分离并冻结所制成的成分分离并冻结所制成的成分为新鲜冰冻血浆为新鲜冰冻血浆 保存和运输:保存和运输:-2
14、020以下以下 新鲜冰冻血浆 普通冰冻血浆 新鲜冰冻血浆保存1年以后,可改为普通冰冻血浆 制备冷沉淀后所得血浆在-20以下冰箱冰冻保存也成为普通冰冻血浆 保存期5年 使用前37水浴融化,于26暂存,24h内输用 新鲜冰冻血浆和普通冰冻血浆不同之处新鲜冰冻血浆和普通冰冻血浆不同之处 新鲜冰冻血浆:制品内含有全部凝血因子及白蛋白、免疫球蛋白,主要用于各种凝血因子缺乏症病人的补充治疗。有效期为年。普通冰冻血浆:含有全部稳定的凝血因子,但缺乏不稳定的凝血因子和,主要用于凝血因子和以外的因子缺乏症病人的治疗。有效期为年。新鲜冰冻血浆保存期满年,可改为普通冰冻血浆。冷冷 沉沉 淀淀 定义定义:新鲜冰冻血浆
15、在新鲜冰冻血浆在4 4融化时底部有一层白色不融融化时底部有一层白色不融化胶状物质,含有血浆中大部分化胶状物质,含有血浆中大部分FF 制备方法:制备方法:poolpool方法、快速冷冻离心法、虹吸法方法、快速冷冻离心法、虹吸法 保存和运输条件:冷沉淀保存温度应不低于保存和运输条件:冷沉淀保存温度应不低于1818,保存期为自采集日起保存期为自采集日起1212个月。个月。使用前使用前3737水浴中融化,融化后室温保存水浴中融化,融化后室温保存6h6h内使用内使用 运输应保持冷冻运输应保持冷冻 注意事项 无论哪种制备方法,制备的温度都应控制在16 冷沉淀制备完成后,一定要在1h内重新迅速冻结 冰冻后的塑料袋脆性加大,易破裂,应当轻拿轻放,及时发现破裂袋子并废弃 运输时一定要注意保持冰冻状态 冷沉淀应标记ABO和Rh血型,并应同型输入 粒细胞制品 保存:2024 24h 保养液 注意事项注意事项 脂血过高者不能单采 采前服用皮质类固醇药物者不能有胃肠道疾病 采前不能服用影响献血者的药物 20 24静置保存,保存期24小时