1、血细胞分析及标本采集血细胞分析及标本采集 血液标本采集及抗凝剂选择 血液标本种类 全血:由血细胞和血浆组成,主要用于临床血液学检 查,如血细胞计数,分类和形态学检查 血浆:为全血除去血细胞部分,适合临床生化检查,内 分泌激素测定,血栓与止血检查 血清:是离体后的血液自然凝固后析出的液体部分,除 纤维蛋白原等凝血因子,其他成分与血浆基本相 同,多用于临床化学和临床免疫学检查 血清与血浆的主要区别 血浆含有纤维蛋白原而血清没有 二,血液标本采集方法 1.毛细血管采血法 2.静脉采血法 3.动脉采血法 静脉采血法 1,普通静脉采血法(开放式)2,真空负压静脉采血法(封闭式)1,普通静脉采血法 方法:
2、将肘部静脉上端用压脉带系紧,使静脉充分暴露,局部消毒,用注射器刺入取血;用途:需血量较多或采用全自动血液分析仪时使用;评价:采集的血量可任意控制,但操作环节多,在移液或丢弃注射器时可能造成环境污染 2,真空负压静脉采血法 方法:消毒与选择穿刺部位同普通法。采血器有套筒式和头皮静脉式二种,具有软橡皮套管式止血装置,穿刺回血后将另一端插入真空定量的试管中,血液足量后,拔出试管即止血,再插另一试管又可采血 用途:同普通静脉采血法 评价:操作规范,采血过程中血标本不与外界接触,避免血源性交叉感染 标本采集时的质量控制 1.标本采集时应规范操作,以减少误差 2.毛细血管采血时应避开损伤部位,避免用力挤压
3、皮肤,血液应自然流出 3.静脉采血时压脉带压迫时间不宜太长 4.动脉采血后应立即与空气隔绝,阻止血气交换 5.容器要干净,干燥,避免强力振荡引起溶血 6.血液标本采集后应立即送检 7.抗凝的标本其比例要准确,必要时需修正 8.尽量避免输液时采血,因可干扰测试结果 抗凝剂的选择和应用 抗凝:用物理或化学方法除去或抑制血液中的某些凝血因子的活性,以阻止血液凝固,称为抗凝。抗凝剂:能够阻止血液凝固的物质,称为抗凝剂 2,乙二胺四乙酸(EDTA)盐 常用其钾盐与钠盐,钾盐溶解度明显高于钠盐。原理:EDTA能与血液中钙离子结合成螯合物,使钙离子失去凝血作用,从而阻止血液凝固 用途:用于多项血液学检查,E
4、DTA钾盐特别适合于血细胞分析仪和血细胞比容测定,室温下6小时红细胞体积不变 用量:EDTA-K2-2H2O 1.5-2.2mg/ml血液 血液常规检验 红细胞参数 包括红细胞计数、血红蛋白浓度、血细胞比容、平均红细胞容积、平均红细胞血红蛋白量、平均红细胞血红蛋白浓度、红细胞容积分布宽度等。红细胞参考范围 红细胞计数(1012/L)及血红蛋白浓度(g/L)参考范围:成年男性:4.05.5 120 160 成年女性:3.55.0 110 150 新生儿:6.07.0 170 200 红细胞平均指数 红细胞平均指数:平均红细胞容积(MCV)平均红细胞血红蛋白量(MCH)平均红细胞血红蛋白浓度(MC
5、HC)红细胞容积分布宽度(RDW)贫血的实验室诊断 贫血的定义:全身循环红细胞总量减少。贫血是一种临床综合征。目前我国标准沿用红细胞计数、血红蛋白定量、和血细胞比容等指标均低于相同年龄、性别和地区人群参考范围的底限。贫血的诊断标准 成年男性:Hb120g/L,RBC 4.01012/L,Hct 0.40 成年女性:Hb110g/L,RBC 3.51012/L,Hct 0.35 贫血的诊断标准 老年人:Hb110g/L,RBC 3.51012/L,Hct 0.35 妊娠中晚期:Hb100g/L,Hct 0.30 贫血的诊断 临床诊断 病史收集 临床表现 实验诊断 贫血的实验诊断 应用Hb、RBC
6、 和Hct诊断有无贫血;用Hb诊断贫血的程度;应用MCV、MCHC、MCH决定贫血的形态学分类,必要时了解骨髓增生程度;成人贫血分级 Hb 症状 轻度 90g/L 轻微 中度 90-60g/L 劳动时心慌气短 重度 59-30g/L 休息时心慌气短 极重度 正常 正常 正常 巨幼细胞性贫血,MDS 正常细胞性贫血 正常 正常 正常 急性失血,再障,溶贫 单纯小细胞贫血 正常 正常 正常 感染,中毒 小细胞低色素性贫血 正常 正常 正常 缺铁性贫血,慢性失血,珠蛋白合成障碍性贫血 贫血的分类诊断 小细胞低色素性:用血象、骨髓象和铁代谢检验等诊断缺铁性贫血;大细胞性:用血象、骨髓象和叶酸、维生素B
7、12测定诊断巨幼细胞性贫血;正常细胞性:用血象、骨髓象、骨髓活检和祖细胞培养诊断再生障碍性贫血;用间接胆红素、尿胆原、游离Hb、结合珠蛋白、乳酸脱氢酶等实验诊断有无溶血。红细胞形态 正常形态:红细胞病理形态 大小:红细胞病理形态 色素 贫血病因 红细胞生成减少:造血干细胞或红系祖细胞增殖与分化异常 DNA合成障碍:巨幼细胞性贫血 血红蛋白合成障碍:缺铁性贫血 其他:慢性疾病性贫血 贫血病因 红细胞破坏增多:内在异常:遗传性:遗传性球形红细胞增多症、镰 型细胞贫血 获得性:阵发性睡眠性血红蛋白尿 外在异常:免疫性,机械性,理化因素,感染,脾功能亢进 丢失过多:急慢性失血 红细胞,血红蛋白增多 成
8、年男性:Hb 170g/L,RBC 6.01012/L 成年女性:Hb 160g/L,RBC 5.51012/L 临床意义 相对性增多:各种原因导致血浆量减少,见于剧烈呕吐、严重腹泻、大面积烧伤、多汗、多尿导致的脱水。绝对性增多:继发性:由于缺氧等原因导致促红细胞生成素增多,红细胞计数增多程度与缺氧程度成正比。原发性:真性红细胞增多症 血细胞比容 Hct 红细胞压积指抗凝全血经离心沉淀后,测得下沉的红细胞在全血中所占的容积的百分比值。不仅反映红细胞计数增多或减少,而且与红细胞的体积大小及血浆容量改变有关。临床意义 增加:各种原因导致的血液浓缩,如严重呕吐、腹泻、大量出汗等;在纠正贫血、脱水及电
9、解质失调时,Hct是治疗的参考指标;减少:见于各种类型贫血 红细胞分布宽度(RDW)RDW是反映红细胞体积异质性的参数,用红细胞体积大小的变异系数来表示,比血涂片上红细胞形态大小不均的观察更客观,准确。红细胞容积分布宽度 用于缺铁性贫血和轻度地中海贫血鉴别:缺铁性贫血RDW明显增高,而88%左右的地中海贫血患者正常;用于缺铁性贫血的早期诊断:早期有RDW增高;指导治疗:治疗后贫血已经纠正,但RDW未正常,提示体内贮存铁尚未完全补足;帮助贫血分类鉴别。白细胞参数 白细胞参数包括白细胞计数及白细胞分类计数 白细胞分类:中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞、单核细胞、。白细胞计数 参考范
10、围:成人410109/L 增多与减少受中性粒细胞数量的影响 其次受淋巴细胞数量的影响 临床意义 生理性增高:下午较早晨高,妊娠后期,剧烈运动后,饱餐或淋浴后,高温或严寒等。中性粒细胞临床意义 增多:急性感染:革兰阳性球菌感染;急性失血;严重的组织损伤及大量血细胞破坏;急性中毒;白血病,骨髓增殖性疾病及恶性肿瘤 核象变化 核左移:外周血中出现不分叶核粒细胞(包括杆状核粒细胞、晚幼、中幼及早幼粒细胞等)的百分率超过5%见于急性化脓性感染、急性失血、急性中毒及急性溶血反应、白血病及类白血病反应等。核象变化 核右移:外周血中性粒细胞核在5叶以上者的百分率超过3%见于营养性巨幼细胞性贫血、恶性贫血、炎症
11、恢复期等。核象变化 核左移与核右移:临床意义 白细胞减少:白细胞计数4109/L称白细胞减少 中性粒细胞减少症:绝对值1.5109/L 中性粒细胞缺乏症:绝对值0.5109/L 中性粒细胞减少 感染性疾病:革兰阴性杆菌(伤寒、副伤寒),某些病毒,某些原虫(疟疾)血液系统疾病:再障 其他:理化损伤,自身免疫性疾病 淋巴细胞 增多:感染性疾病:主要为病毒感染 肿瘤性疾病:急慢性淋巴细胞白血病 急性传染病恢复期 移植排异反应 减少:药物、理化损伤,免疫缺陷病 嗜酸性粒细胞 增多:过敏性疾病:哮喘,药物过敏 寄生虫疾病 皮肤病 血液病 恶性肿瘤 传染病:猩红热 其他 嗜碱性粒细胞 增多:过敏性疾病 血
12、液病 恶性肿瘤:转移癌(原因不明)其他:糖尿病,传染病 单核细胞 增多:生理性见于婴幼儿及儿童 病理性:感染,急性感染恢复期,活动性肺结核 血液疾病 血小板 减少:生成障碍:造血功能损害,再障等 破坏过多:特发性血小板减少性紫癜(ITP)、脾功能亢进 消耗增多:DIC 分布异常:脾大,肝硬化 血小板 增多:原发性:骨髓增殖性疾病 继发性:急慢性炎症、缺铁性贫血、恶性肿瘤早期等 网织红细胞 定义:未完全成熟的红细胞,是晚幼红细胞脱核后到完全成熟的过渡型细胞。直接反映骨髓红细胞生成能力 网织红细胞 增多:提示骨髓红细胞系增生活跃;见于急性溶血,急性失血;临床用来判断出血是否停止:网织红细胞回复正常 减少:提示骨髓红细胞系增生减低 再障 谢谢 2011.9