1、水溶性多糖的提取及结构测定方案 1多糖的生产及提取 种子液制备。单菌落入50ml(葡萄糖2%,蛋白胨1%,乙酸0.4%,磷酸二氢钾0.15%、硫酸镁0.03%,乙醇1.5%,naoh0.25%,115-120维持20min。)120r/m48h。将种子液按5%(v/v)转接入20230ml上述种子液中,120r/m,4d。 4000r/m去bc,0.22m膜过滤去细胞或14000r/m,20min去细胞。50旋转蒸发浓缩至原体积的1/5。参加无水乙醇,使其浓度为85%。沉淀再经90%乙醇洗涤3次。50真空枯燥24h。 1杜秀菊,徐伟,穆红梅,彭向前,冯玮.桦褐孔菌多糖的药理活性与化学结构研究进
2、展j.食用菌学报,2023,01:20230-20234. 1林华娟,田晓春,秦小明,路垚,杨基柱.金花茶多糖单一成分的化学结构特征解析j.食品科学,2023,03:141-146. 2多糖除杂 (sevag法)多糖参加适量蒸馏水溶解,按多糖溶液:氯仿:正丁醇=25:5:1比例参加氯仿及正丁醇,漩涡振荡20-30min,静置分层(或者3400r/m,15min),提取水层多糖液,反复操作3次,获得多糖水溶液,将其稀释至2023倍,在紫外-可见分光光度计扫描,直至260-280nm处没有吸收峰为止。(张倩,张民,王超,等.枸杞多糖的别离纯化及结构研究j.食品与发酵工业,2023,40(12):4
3、1-47.) 1李娟.桦褐孔菌子实体和发酵多糖的促生细胞因子作用及化学结构研究d.浙江理工大学,2023. 3分子量测定 经除杂的多糖水溶液参加无水乙醇,使其浓度为90%,经50真空枯燥24h,保存备用。称取一定量的多糖,参加蒸馏水溶解,以葡聚糖为标准物质,上gpc进行分子量测定。(1罗建光.鲍氏层孔菌菌丝体多糖别离纯化、结构鉴定及其生物活性的研究d.南京农业大学,202223.) 4多糖组成测定 (1)称取适量多糖于具塞试管中,参加2mol/l三氟乙酸(tfa)4ml,在120下水解2h。(2)减压蒸干(低于40)。 (3)然后参加3ml甲醇蒸干,重复以上操作4一5次,以完全除去tfa。 1
4、姜军.山药多糖的别离纯化及其化学结构的初步研究d.扬州大学,202223.1毛丰玮.亚麻籽壳多糖的提取、别离纯化与结构研究d.浙江工商大学,2023. 1凡军民.毛头鬼伞菌丝体多糖的别离、纯化和化学结构鉴定及生物活性研究d.南京农业大学,2023.(4)hplc测定色谱条件为: 色谱柱为shodexks804sugar(300mm7.8mm)柱温40度流动相为水 -1 流速0.8mlmin 检测用42023r示差检测器,数据处理用82023gpc软件进行。 同时用鼠李糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖、葡萄糖醛酸8种单糖进行对照,根据峰值确定样品的单糖组成。 (1李军.阿魏侧耳子实体多糖别离纯化及其化学结构的初步研究d.华中农业大学,2022.) 5红外光谱确定多糖结构 水溶性多糖的提取及结构测定方案.doc免费为全国范文类知名网站,下载全文稍作修改便可使用,即刻完成写稿任务。 支付6元已有11人下载 下载这篇word文档 第3页 共3页