1、Chinese Journa,of NeW Drugs 2O2332(2)118中国新药杂志 2023 年第 32 卷第 2 期 作者简介卢加琪，女，审评员，主要从事生物制品药学研究。联系电话:(010)85243055，E-mail:lujq cde org cn。李倩，女，审评员，主要从事生物制品药学研究。联系电话:(010)85242986，E-mail:liqian cde org cn。通讯作者何伍，男，主任药师，主要从事生物制品药学研究。联系电话:(010)85242658，E-mail:hew cde org cn。新药注册与审评技术 体外基因修饰系统药学研究与评价技术指导原则(
2、试行)解读卢加琪，李倩，何伍(国家药品监督管理局药品审评中心，北京 100022)摘要 近年来，大量细胞治疗产品申报临床试验，截至 2022 年 10 月，我国已有 2 个细胞治疗产品批准上市，为严重疾病治疗提供了有效的手段。基因修饰系统包括慢病毒、-逆转录病毒、腺病毒、仙台病毒等病毒载体系统，以及 DNA、NA、蛋白质和蛋白质-NA 复合物等非病毒载体类系统，目前已应用于多种细胞产品的基因修饰或编辑。为规范基因修饰系统的药学研究和评价，国家药品监督管理局药品审评中心于2022 年 5 月发布了 体外基因修饰系统药学研究与评价技术指导原则(试行)。本文结合该指南的起草思路，对指南进行解读，以方
3、便读者更好地理解指南内容。关键词 基因修饰系统;细胞治疗产品;技术指南;药学研究 中图分类号 95 文献标志码 A 文章编号1003 3734(2023)02 0118 05Interpretation of guidance on CMC study and evaluation ofex vivo genetic manipulation systemLU Jia-qi，LI Qian，HE Wu(Center for Drug Evaluation，National Medical Products Administration，Beijing 100022，China)Abstract
4、 A large number of investigational new drug(IND)applications of cellular products have beensubmitted in recent years Up to October 2022，two cellular products have been approved to be marketed in China，which provide effective therapeutic approach to treat serious diseases Genetic manipulation systems
5、 are used tomodify or edit genes in various types of cellular products，including lentivirus，-retrovirus，adenovirus，sendaivirusor other viral vectors，as well as DNA，NA，protein，protein-NA complex or other non-viral vector systems Aguidance on CMC study and evaluation of ex vivo genetic manipulation sy
6、stems was issued by CDE，NMPA on May2022，in order to illustrate criterions on CMC research and evaluation of such systems This paper provides adetailed interpretation of the guidance，combined with the guidance drafting logic，to help readers better understandthe content of the guidance Key words genet
7、ic manipulation systems;cellular product;guidance;CMC research近年来，细胞治疗和基因编辑等基础理论、技术手段的发展日新月异，成为生物医药行业发展最为迅速的领域之一，我国基因修饰细胞类产品的研发和注册申报数量也逐年增加。目前申报的细胞治疗产品常涉及细胞的体外基因改造或修饰，所采用的工具为基因修饰系统，该类系统种类多样，其设计和制备过程的差异可直接影响到细胞治疗产品的安全性和有效性。因此，这类产品所用的各类基因修饰系统需经过完整的质量评价，并有必要进一步细化不同类型基因修饰系统药Chinese Journa,of NeW Drugs 2
8、O2332(2)119中国新药杂志 2023 年第 32 卷第 2 期学研究的技术要求。为规范基因修饰系统的研究，指导其研发和申报，结合国内外相关技术要求，本着科学性、可操作性、前瞻性和先进性相结合的原则，国家药品监督管理局药品审评中心(以下简称“药审中心”)起草并于2022 年5 月发布了 体外基因修饰系统药学研究与评价技术指导原则(试行)(以下简称“指南”)。该指南对体外基因修饰系统的药学研究内容分类进行了阐述，内容不具有强制性。申请人可根据基因修饰系统的特性和具体研究情况酌情参考该指南，也可采用其他有效的研究手段和方法，并提供其合理性依据和说明。本文结合该指南的起草修订过程，在基因修饰系
9、统结构设计、风险控制和安全性评价方面提出监管方的考虑，供研发者参考。1国内外相关技术指南截至 2022 年 4 月，国内外各监管机构发布的指南中含有部分基因修饰系统的药学技术要求，但均未针对不同类型基因修饰系统发布完整的技术指南，因此，该研究领域缺乏一定的监管共识。1 1国外监管机构及组织相关技术指南美国FDA 在 2020 年 1 月发布的指南“Chemistry，Manu-facturing，and Control(CMC)information for humangene therapy investigational new drug applications(INDs)”1 中对基因
10、治疗产品的生产用原材料、细胞库、载体系统等提出了建议性的总体药学技术要求，其中不涉及细化的各类基因修饰系统的研究要求。美国 FDA 在 2006，2018 和 2020 年相继发布、修订了逆转录病毒载体质量控制中复制型病毒检测方法的相关指南“Testing of retroviral vector-basedhuman gene therapy products for replication competentretrovirus during product manufacture and patient fol-low-up”2，其中仅涉及对逆转录病毒载体的复制型病毒检测方法的技术要求。
11、欧洲 EMA 于 2005 年针对慢病毒载体发布了相关技术指南“Guideline on development and manufac-ture of lentiviral vectors”3，未针对其他基因修饰系统发布具体技术要求。2018 年，欧洲 EMA 针对体内基因治疗产品发布了指南“Guideline on the quality，non-clinical and clinical aspects of gene therapy medic-inal products”4，其中介绍了基因治疗产品生产用材料、工艺和质量控制等方面的药学技术要求。2020 年，欧洲 EMA 针对基因修饰
12、细胞的研究要求发布了指南“Guideline on quality，non-clinical andclinical aspects of medicinal products containing genet-ically modified cells”5，其中介绍了 CA-T 细胞产品及诱导多能干细胞生产使用的基因修饰系统(包括病毒载体、mNA、基因编辑工具等)的研究内容，但全文重点对基因修饰细胞终产品的药学研究进行了阐述，未阐明基因修饰系统细化的药学研究要求。WHO 于 2021 年 12 月发布了传染病预防用mNA 疫苗的指南“Evaluation of the quality，saf
13、etyand efficacy of messenger NA vaccines for the pre-vention of infectious diseases:regulatory considera-tions”6，提出了 mNA 疫苗(脂质纳米粒包封)的药学技术要求，对本指南 NA 相应部分的撰写具有参考意义。综上所述，国外监管机构有部分指南涉及基因修饰系统的药学研究要求，但是未有细化阐述各类基因修饰系统药学研究内容的指南。1 2国内监管机构相关技术要求中华人民共和国药典 2020 年版新增了“人用基因治疗制品总论”，其中的要求如适用，也可供体外基因修饰系统研发参考7。指导原则层面
14、，2017 年由药审中心起草和原国家食品药品监督管理总局发布的细胞治疗产品研究与评价技术指导原则 提及细胞治疗产品生产用病毒载体的药学总体要求，未涉及细化的研究内容8。2003 年，原国家食品药品监督管理局发布了人基因治疗研究和制剂质量控制技术指导原则，如适用于体外基因修饰系统的研究，研发时也可参考。2起草思路和主要内容该指南撰写过程中，在参考美国 FDA、欧洲EMA 和其他机构相关指导原则的技术要求的同时，综合考虑了国内基因修饰系统的研发现状。与美国FDA、欧洲 EMA 等机构在技术要求方面总体保持一致的同时，在不同章节中，结合审评经验，针对国内企业研发现状对指导原则内容进行了相应补充，以便
15、国内研发企业参考。21起草思路该指南主要针对细胞治疗产品的基因修饰系统的药学研究起草。由于基因修饰系统类型多样，且行业技术发展迅速，因此，指导原则在撰写时提出了基于风险的研发和评价原则，强调申请人需要基于基因修饰系统类型和应用情形，通过风险分析选择适用的研究方案的总体思路。Chinese Journa,of NeW Drugs 2O2332(2)120中国新药杂志 2023 年第 32 卷第 2 期该指南撰写要素基本覆盖了基因修饰系统上市阶段需要完成的所有药学研究，以及技术审评中需要关注的各个方面。为了回应业界关切，在本指导原则适当的章节中，结合审评经验和国内外技术要求，尽可能提供了部分 IN
16、D 阶段的建议，以供参考。起草思路主要围绕风险识别和控制展开，主要包括整体风险识别、不同生产使用情形风险、基因修饰系统变更风险三部分:整体风险识别一般考虑基因修饰系统设计、制备工艺和质量控制中的风险因素，并结合细胞终产品特点进行风险评估和控制。不同生产使用情形包括针对不同类型载体和基因修饰细胞，其基因修饰后细胞建库和不建库 2 种情形进行分类分析。主要针对目前常见的临床期间基因修饰系统变更研究问题，由于变更阶段、事项的不同，研究较复杂，具体要求该指南未进行详细介绍，将在后续技术文件中讨论。22主要内容该指南正文将基因修饰系统药学研究分为病毒载体类和非病毒载体类 2 类阐述，内容可基本覆盖当前阶段研发的基因修饰系统的主要类型。2 类基因修饰系统的撰写内容均包括分子设计、生产用材料、制备工艺、质量研究与质量标准。此外对基因修饰系统的稳定性研究、直接接触性容器/材料的总体药学技术要求进行了撰写。该指南针对目前国内申报常见的整合型载体慢病毒载体、-逆转录病毒载体的药学研究进行了设计和制备工艺等具体技术要求的撰写，技术要求与国外同类指导原则技术要求基本一致。根据国内外研发现状，在借鉴美国和欧盟指
