1、第 29 卷第 5 期2023年 3 月中国实验方剂学杂志Chinese Journal of Experimental Traditional Medical FormulaeVol.29，No.5Mar.，2023补肾法治疗男性不育症相关动物实验王继升1，孟繁超1，李海松1，王彬1，冯隽龙1，邓省1，李曰庆1*，张霄潇2*（1.北京中医药大学 东直门医院，北京 100700；2.中华中医药学会，北京 100029）摘要 男性不育症的实验研究是研究男性不育症发病机制和评价药物治疗的关键。该文回顾了近年来关于男性不育症的动物实验研究。有关男性不育症实验模型主要包括少弱精子症、畸形精子症、无精子
2、症及精索静脉曲张动物模型等。少弱精子症动物模型的构建最常见的包括雷公藤多苷模型、腺嘌呤模型、氢化可的松模型、辐射模型 4种类型，多以化学手段为主。无精子症动物模型的构建多采用腹腔注射双磺酸基烷化剂白消安和将小鼠阴囊浸泡在 43 的水中的方法。关于畸形精子症动物模型的研究相对较少，灌胃雷公藤多苷（GTW）和甲基磺酸甲酯（MMS）的方法较为常见。精索静脉曲张不育症动物模型多采用手术的方式进行，结扎下腔静脉外侧和精索静脉内侧间的左肾静脉中分对睾丸形态学及附睾精子质量有明显影响。相关动物实验研究表明，以五子衍宗丸为代表的补肾生精经典名方和现代研究的临床验方对男性不育症都起到了显著的治疗作用。补肾法治疗
3、男性不育症的机制多集中于抑制生精细胞凋亡的研究方向。补肾法调控生精细胞凋亡，为中医药在男性生殖领域开辟了新的治疗思路、提供了可靠的科学依据。关键词 男性不育症；动物实验；补肾法；五子衍宗丸中图分类号 R242；R2-0；R2-031；R256.56；R698+.2 文献标识码 A 文章编号 1005-9903（2023）05-0229-07doi 10.13422/ki.syfjx.20230593 网络出版地址 https:/ 2022-08-16 13:35:02Animal Experiments on Male Infertility Treated by Tonifying Kidn
4、eyWANG Jisheng1，MENG Fanchao1，LI Haisong1，WANG Bin1，FENG Junlong1，DENG Sheng1，LI Yueqing1*，ZHANG Xiaoxiao2*（1.Dongzhimen Hospital，Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100700，China；2.China Association of Chinese Medicine，Beijing 100029，China）Abstract Experimental research on male infertilit
5、y is critical to the study of the pathogenesis of male infertility and the evaluation of drug therapy.This paper reviewed animal experiments on male infertility in recent years.The experimental models of male infertility mainly include oligoasthenozoospermia（OA），teratozoospermia，azoospermia，and vari
6、cocele animal models.The OA animal models are mostly induced by glycosides of Tripterygium wilfordii（GTW），adenine，hydrocortisone，and radiation，which are mainly chemical means.The animal models of azoospermia were usually constructed by intraperitoneal injection of bissulfonyl alkylating agent busulf
7、an and immersion of scrotum in 43 water.There are few studies on animal models of teratozoospermia，and the induction methods by GTW and methyl methanesulfonate（MMS）are 收稿日期 2022-04-27基金项目 中国博士后创新人才支持计划（BX20220047）；国家自然科学基金项目（81774320）；中国博士后科学基金面上项目（2022M720528）；北京市科学技术协会青年人才托举工程（BYESS2022182）；中华中医药学
8、会青年人才托举工程项目（CACM-2021-QNRC2-B04）第一作者 王继升，博士后，从事中西医结合治疗男科疾病研究，E-mail：通信作者 *李曰庆，主任医师，教授，博士生导师，从事中医药标准化与产业发展研究，E-mail：*张霄潇，博士，从事中医药标准化与产业发展研究，Tel：010-64205923，E-mail：229第 29 卷第 5 期2023年 3 月中国实验方剂学杂志Chinese Journal of Experimental Traditional Medical FormulaeVol.29，No.5Mar.，2023common.The animal models
9、of varicocele-caused infertility are usually induced by operation.The ligation of the middle division of the left renal vein between the lateral inferior vena cava and the medial spermatic vein has a significant influence on testicular morphology and epididymal sperm quality.Animal experimental stud
10、ies have shown that classic prescriptions for tonifying the kidney and promoting spermatogenesis represented by Wuzi Yanzongwan and clinical empirical prescriptions by modern research have played a significant role in the treatment of male infertility.The mechanism of tonifying the kidney in the tre
11、atment of male infertility mainly focuses on inhibiting spermatogenic cell apoptosis.The kidney-tonifying method can regulate the apoptosis of spermatogenic cells，which provides a new treatment idea and a reliable scientific basis for traditional Chinese medicine in the field of male reproduction.Ke
12、ywords male infertility；animal experiment；kidney-tonifying and spermatogenic method；Wuzi Yanzongwan世界卫生组织规定，夫妇同居 1年以上，未采取避孕措施且性生活正常，因男性因素造成正常女方不能自然受孕的称为男性不育症1。在不孕不育的夫妇中，男方因素约占 50%2。据报道全世界约有15%的夫妇受到影响，某些地区的患病率更高3。男性不育症的很多病因仍不清楚，多数病例为特发性男性不育症，可以明确的病因包括药物治疗、化疗、放疗、感染、手术中的医源性损伤、隐睾、性功能障碍和遗传性疾病，如先天性双侧输精管缺失
13、、Y染色体微缺失，以及核型异常4-5。男性不育症中最常见的为少弱精子症，而最严重的是无精子症，即射精中没有精子，可分为阻塞性无精子症（OA）和非阻塞性无精子症（NOA）6。NOA 发生在精子生成障碍时，而 OA 则是由于睾丸和生殖器导管闭塞引起的7。畸形精子症包括广泛的异常精子表型，单独或同时影响头部、颈部、上腹部和尾部8-9。此外，精索静脉曲张也是导致男性不育的常见因素之一10。黄帝内经上古天真论 有云：“丈夫八岁，肾气实，发长齿更。二八，肾气盛，天癸至，精气溢泻，阴阳和，故能有子七八肝气衰，筋不能动，天癸竭，精少，肾脏衰，形体皆极；八八，则齿发去形体皆极”。文中所说的精气溢泻、精少、肾脏衰
14、等都与男性得生殖功能息息相关，可见男性的生育能力与肾中所藏之精气密不可分11。通过回顾研究发现，补肾法在男性不育症的治疗方面，经验丰富，并取得了良好的疗效，但其作用机制尚不完全清楚，需要后人不断探索。近年来，中医药通过建立多个不育症动物模型，并在此基础上开展了大量的动物实验，进行中药疗效机制的研究，并取得了可喜的成果。本文将回顾关于男性不育症的相关动物实验，并对未来相关研究提出思考与展望。1 男性不育症动物模型的构建根 据 目 前 文 献 报 道 的 有 关 男 性 不 育 症 实 验模型主要包括少弱精子症、畸形精子症、无精子症及精索静脉曲张动物模型等。在实验研究中，因鼠类生长发育较快，繁殖能
15、力强，故多选用鼠类为研究对。小鼠对疾病抵抗力差，对环境变化敏感。大鼠的抗病能力及对环境的适应性强，最常用的是 SD大鼠和 Wistar 大鼠。灵长类动物更接近人体的情况，但因其价格昂贵，故较少选用。现有男性不育症动物模型对比分析见表 1。1.1少弱精子症动物模型构建 少弱精子症动物模型的构建最常见的包括以下 4 种类型：雷公藤多苷（GTW）模型、腺嘌呤模型、氢化可的松模型、辐射模型12。GTW 是一种常用的治疗风湿病的中药提取物，但其不良反应是生殖毒性，会对生殖功能造成损害。正是这一药物特性来构建少弱精子症的动物模型。据文献报道，灌胃 GTW 8 周后，可引起大鼠精子密度和活力显著降低。王世平
16、等13在造弱精症大鼠模型使用 GTW 剂量为 20 mg kg-1d-1。JIAO 等14按照 40 mg kg-1d-1的剂量给成年雄性 SD大鼠灌胃 GTW 28 d 后，发现大鼠的睾丸重量和睾丸脏器指数下降，精子浓度和活力显著降低，生精细胞和间质细胞明显减少，支持细胞的胞浆空泡化，睾 丸 组 织 氧 化 应 激 活 性 氧（ROS）和 丙 二 醛（MDA）升高。使用 40 mg剂量的文献居多15-18。虽然不同文献报道的剂量不完全一致，但最终都会导致精子数量及活力下降。腺嘌呤导致生精功能下降是通过促使睾丸组织萎缩实现的。灌胃给予大鼠腺嘌呤的剂量一般为 50200 mg kg-1，周期为 1030 d。造模成功后，会导致精子总数和活力下降，并且会抑制相关激素230第 29 卷第 5 期2023年 3 月中国实验方剂学杂志Chinese Journal of Experimental Traditional Medical FormulaeVol.29，No.5Mar.，2023的合成，其机制可能与肝肾损害有关19。然而其明显的不良反应，可能会引起严重的肾功能衰竭。因此，不能排除肾衰
