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血细胞形态学讲义2.ppt

上传人:g****t 文档编号:209292 上传时间:2023-03-07 格式:PPT 页数:237 大小:5.74MB
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资源描述

1、血细胞形态学 概论 血液和骨髓细胞瑞氏染色形态学血液和骨髓细胞瑞氏染色形态学 检查法检查法 通过分析血液和骨髓中有核细胞数量、相对构成比、形态改变,了解骨髓造血功能状态和异常改变的形态学检查方法。形态学检查方法的价值形态学检查方法的价值 发现血细胞构成和形态异常 了解骨髓造血功能状态 对血液病提供确诊依据或提供重要线索 是各种血液病形态学检查的基础 形态学检查方法的局限性形态学检查方法的局限性 不能了解骨髓结构 不能了解细胞分子生物学特性和功能 内内 容容 第一部分 标本制作 第二部分 单个血细胞形态(重点)第三部分 骨髓和外周血有核细胞构成比 第四部分 骨髓报告书写格式(重点)第一部分 标

2、本 制 作 一、骨髓血细胞检查适应症 多次检查外周血有异常(数量、形态)原因未明的肝、脾、淋巴结肿大 不明原因的发热 恶性肿瘤史 有无转移,不名原因骨痛、骨质破坏等。助诊溶酶体贮积症(即类脂质沉积病)进行血液病鉴别诊断和疗效观察 骨髓血细胞检查禁忌症 凝血因子严重缺乏的出血性疾病,如血友病。穿刺部位有炎症或畸形 晚期妊娠的妇女做髂骨穿刺要谨慎 二、血液和骨髓标本的来源 部位:髂前上棘或髂后上棘穿刺 必要时行胸骨穿刺,胫骨(儿童)骨髓穿刺成功的标志:1.抽吸骨髓时患者感锐痛 2.外观红色粘稠状、有骨髓小粒、油滴。3.显微镜下见有骨髓成分(如幼红细胞、幼粒细胞、巨核细胞、浆细胞、网状细胞等)三、血

3、液和骨髓标本的三、血液和骨髓标本的制作制作 四、血液和骨髓标本的瑞氏染色四、血液和骨髓标本的瑞氏染色 选取长短厚薄适宜的涂片(骨髓2张、血片2张)瑞氏染液:缓冲液 1:2,时间1小时,小水流冲洗,自然晾干后备检。瑞氏染液含美蓝和伊红两种成分 美蓝偏碱性,与细胞内酸性物质有亲和力(胞 浆),染成兰色;伊红偏酸性,与细胞内碱性物质有亲和力(胞核),染成紫红色。偏酸 合适 偏碱 五光学显微镜使用 显微镜使用注意事项 低倍镜(10倍):判断取材、涂片、染色是否满意,小粒、油滴分级 骨髓增生程度 估计小粒细胞面积 计数全片巨核细胞数目 寻找瘤细胞团 油镜下(100倍):观察单个血细胞形态。骨髓小粒分级(

4、1)肉眼及低倍镜下观察:(-)无骨髓小粒(+)骨髓小粒稀疏,相隔较远(+)骨髓小粒较密集,于血膜尾部甚 易发现(+)骨髓小粒十分密集,彼此紧密 相连,全片都易发现 骨髓小粒分级(2)显微镜(100 倍油镜):估计骨髓小粒细胞面积:各种有核细胞(除脂肪细胞外)占整个骨髓小粒面积的百分比,在正常骨髓中,小粒细胞面积50-75%。小粒分级(3)细胞成份分析:造血细胞、非造血细胞。造血细胞:幼稚粒、红细胞 非造血细胞:脂肪细胞、成熟淋巴细胞、浆细胞、组织嗜碱细胞、网状细胞等。骨髓小粒分级(4)临床意义 骨髓小粒:正常骨髓中+-+急、慢性髓系细胞白血病多为 (+)或(+)淋巴细胞白血病多无粒、无油 骨髓

5、小粒细胞面积及细胞成分:慢性再障多在50%以下,以非造血细胞为主 各种白血病及增生性贫血多在75%以上,以 造血细胞为主。油滴分级(1)(-)无油滴(+)油滴少且小,细沙状均匀分布,涂片后于血膜尾部有很少油滴(+)油滴稍多且大,有的直径达1mm 以上,涂片后血膜尾部易见油 滴。(+)油滴聚集成片,不易干燥 油滴分级(2)临床意义:正常骨髓一般(+-+)慢性再障:最为多见,达+或+各型急、慢性白血病多数为(-),少数为(+)增生程度分级 增生程度增生程度 RBC与有核细胞之比与有核细胞之比 常见病常见病 增生极度活跃 1:1 各类白血病 增生明显活跃 10:1 各类白血病 增贫 增生活跃 20:

6、1 正常骨髓、某些贫血 增生减低 50:1 慢性再障、MDS 增生极度减低 300:1 急性再障 、急停 临床分类过程中,增生程度介于两者之间,以+/-号表示。如:增生活跃+或-。第二部分 正常骨髓细胞形态(一)骨髓细胞分化 正常情况下,在造血干细胞分化、发育、成熟的整个演变过程中,存在一定的规律性。造血干细胞逐级分化形成各系列、各阶段的骨髓血细胞,造血干、祖细胞在形态上无法鉴别,分化发育为各系列原始、幼稚细胞后,其形态学特征才较明显,才能辨认。1-1 血细胞成熟过程规律 胞体:大 小 巨核 小 大 胞浆:细胞越幼稚,染色越深;细胞越成熟,染色越浅淡 胞浆染色:深蓝(原始)-蓝色(早幼)-浅

7、蓝(中幼)-粉色 颗粒变化:无颗粒(原始)-嗜天青颗粒(早 幼)-特异性颗粒(中性粒、嗜酸 粒、嗜碱粒)。胞浆量:少 多 胞核:体积由大-小,成熟红细胞无核 染色质:细致疏松-粗糙紧密块状 核膜:不显著-显著 核仁:清楚-不清-消失 胞核与胞浆体积之比:大-小 细胞发育成熟过程:原始-早幼-中幼-晚幼-成熟细胞 以红细胞系统的成熟过程为例 1-2 单个细胞观察顺序 细胞大小、形状 胞浆量多少、颜色、颗粒 细胞核形状、染色质结构(粗细、凝聚)、核仁数目、大小。核、浆比例。(二)(二)各系列各阶段细胞形态各系列各阶段细胞形态 1 红细胞系统红细胞系统:临床四阶段划分(有些 学者提出六阶段划分)正常

8、骨髓中 约占15%-25%原始红细胞 细胞圆形或椭圆形,直径1525m 胞核圆形或椭圆形,居中 染色质粗颗粒网状,深紫红色,核仁23个 胞浆浓(深)蓝色,着色不均,边缘着色深,核周浅染,无颗粒,有钝伪足 比例 0.03-0.05%早幼红细胞 圆形,直径15-18m 核圆形,略偏位,染色质开始凝聚,核仁消失 胞浆量增多,蓝色,无颗粒 比例 0.92-0.41%中幼红细胞 胞体圆形,直径818m 核圆形,居中,或偏位,染色质凝聚小块直至碎墨块状 核、浆各占半,浆灰兰色,淡兰色 比例 7.41-1.91%晚幼红细胞 直径713m 核圆形,偏位明显,染色质凝聚成大块或团块状,甚至固缩不能看出任何结构(

9、碳核)胞浆量增多,淡灰或粉红色 比例 10.75-2.36%成熟红细胞 呈双面凹圆盘形,直径7-8m 中央为1/3淡染区 原始红、早、中、晚幼红比较 巨幼细胞贫血(MegA)叶酸、VB12 缺乏,骨髓中出现巨幼红巨幼红细胞,分早巨幼红细胞、中巨幼红细胞、晚巨幼红细胞三个阶段 与相对应阶段的正常幼红细胞比,其特点:1 胞体大 2 胞浆丰富 3 核发育落后于浆,染色质疏松 早巨幼和早幼红 中巨幼和中幼红 晚巨幼和晚幼红 病理情况下成熟红细胞形态 H-J小体 成熟红细胞或幼红细胞胞浆内1个或多个直径1m暗紫红色小体 见于HA、MDS、MEGA 异形红细胞 红细胞呈不规则形,盔甲形、梨形、半月形等,是

10、红细胞破坏加速的证据之一 见于HA,TTP。(根据病种 不同)球形红细胞 小而实心,中心浅染区消失,见于HS。多嗜性红细胞 胞浆灰红或灰兰色,为晚幼红脱核后,反映骨髓造血旺盛,HA时多见,再障时少见。Cabot环 淡紫红色线条,“8”形,圆形。多见于HA。椭圆形红细胞 见于遗传性椭圆形红细胞增多症。口形红细胞 红细胞中心一条苍白裂隙,似金鱼嘴。泪滴形红细胞 多见于骨髓纤维化。红细胞大小不均 同一患者涂片红细胞大小显著,直径相差2-3倍,多见于HA,MDS、MegA等 点彩红细胞 红细胞胞浆有许多大小不一,形状不整嗜碱性点状物。(瑞氏)注意与网织红细胞鉴别(煌焦油蓝染色)靶形红细胞 红细胞周边、

11、中央着色深,间隔空白带,见于地贫 (小细胞低色素)中心浅染 成熟红细胞中浅染区扩大,多见于IDA、MDS(RAS)、地中海贫血、慢性病贫血 红细胞缗钱状排列 红细胞沿长轴一个个 相联,多见于浆 细胞疾病 2 粒细胞系统粒细胞系统 在正常骨髓中约占50%-65%嗜中性粒细胞在粒细胞系统占绝大部分,嗜酸性粒细胞小于5%嗜碱性粒细胞小于1%嗜酸粒细胞增多,见于CML,嗜酸粒细胞增多症,嗜酸粒细胞白血病,过敏性疾病等 嗜碱性粒细胞增多,见于CML,嗜碱性粒细胞白血病。粒细胞系统 原始粒细胞 早幼粒 中幼粒(特异性颗粒)嗜中性 嗜酸性 嗜碱性 中幼粒 中幼粒 中幼粒 晚幼粒 晚幼粒 晚幼粒 杆状核 杆状

12、核 杆状核 分叶核 分叶核 分叶核 原始粒细胞 胞体圆形或椭圆行,直径1220m 胞核圆形或椭圆形,居中或稍偏 染色质淡紫红色细颗粒,细颗粒网状,均匀平坦,淡蓝色小核仁3-5个,外凸 胞浆量少,天蓝色透亮,无颗粒(1型)原粒1型 原粒11型 在在I型基础上型基础上 胞浆有少数胞浆有少数 细小颗粒,细小颗粒,但无但无Golgi区区 早幼粒 胞体较原始细胞大,胞浆稍多胞体较原始细胞大,胞浆稍多 胞浆出现胞浆出现粗大嗜天青颗粒粗大嗜天青颗粒,Golgi发育发育(核附(核附近有淡染区近有淡染区)胞核圆形,有偏位胞核圆形,有偏位 染色质粗网状染色质粗网状,聚集,核仁聚集,核仁1-4个或消失个或消失 约占

13、约占1.570.6 中幼粒 胞浆出现特异性颗粒胞浆出现特异性颗粒 嗜中性中幼粒:粉黄底色,不透亮,约占6.49+-2.04%。嗜酸性中幼粒:大小一致,圆形颗粒,灰黄色 嗜碱性中幼粒:大小不一,暗褐色,分布散乱,覆盖核上 嗜中性、酸性、碱性颗粒比较 胞体圆形或椭圆性,直径15-20m,核偏于一侧,肾型或半圆型,染色质粗网状,凝聚,核核仁消失仁消失。晚幼粒(嗜中性、嗜酸性、嗜碱性)直径10-16m 胞核肾型,有凹陷,凹陷度在假设圆径1/2-3/4,小于1/2为中幼粒,大于3/4为杆状核 约占7.9+-1.97%杆状核(嗜中性、嗜酸性、嗜碱性)直径10-13m 胞核如杆状、带状,胞核之凹陷度大于3/

14、4 染色质凝固块状。约占23.72+-3.5%分叶核(嗜中性、嗜酸性、嗜碱性)直径10-13m 核呈分叶状,3-4 叶,很少5叶,叶与叶之间有一丝相连或断开 染色质块状,分叶小于2叶,见于pelger-huet畸形,粒细胞分叶能力减退,(MDS),分叶大于5叶,见于 Meg A 约占9.44+-2.92%嗜酸性中、晚、杆、分 3 淋巴细胞系统 原始淋巴细胞 圆形或椭圆形,直径10-20m,核居中,略偏位,有切迹,染色质深紫红色,粗糙,正副染色质不透亮,排列成粗网状,厚,核仁模糊1-2个,有凹陷 胞浆天兰色,兰色窄带绕核,透亮,无颗粒(正常骨髓中见不到,多见于ALL,或淋巴细胞增殖性疾病)幼稚淋

15、巴细胞 体积与原淋相似,胞核有小凹陷 染色质粗糙,核仁消失 胞浆淡蓝色,偶有少许嗜天青颗粒(ALL,CLL)成熟淋巴细胞 直径5-18m 染色质致密块状,有假核仁 胞浆量少,兰色,透亮,少许嗜天青颗粒,大淋巴细胞,胞浆量多 存在于正常骨髓中,约占15%-25%晚幼红和淋巴细胞鉴别 尤其小淋巴细胞与碳核样晚幼红鉴别:相同点:胞体小,胞浆量少,无颗粒,核致密、固缩,无结构。不同点:晚幼红胞浆颜色接近成熟红细胞,核膜不如淋巴细胞光滑、刀切样。多见于IDA、AA。淋巴细胞与晚幼红比较 4 单核细胞系统 原始、幼稚、成熟阶段,在正常骨髓中仅见成熟单核细胞 原始单核细胞 不规则形或圆形,直径14-25m

16、胞核不规则,有折叠扭曲,染色质纤细网状,紫红色,核仁大,1-3个 胞浆灰兰色,浅兰色,似毛玻璃,不透亮,有伪足,有时有内外浆,无颗粒(见于单核细胞白血病)幼稚单核细胞 染色质纤细,有凝聚,或粗网状,核仁不清楚或消失 胞浆量多,灰兰色,许多细小沙砾状嗜天青颗粒(见于急、慢性单核细胞白血病)成熟单核细胞 胞体稍小,直径12-20m 核居中或偏一侧,形状不规则 染色质凝聚如筛底或粗线条状,不形成块状 胞浆量多,灰兰色,散布细小粉红色颗粒。在正常骨髓中约占5-8%5 浆细胞系统 来源于B细胞 原始浆细胞:胞体15-25m,核偏位于细胞一端 染色质粗颗粒网状,紫红色,有核仁 胞浆灰兰色,近核处有一半圆形透明区,无颗粒(见于浆白、MM)原浆 幼稚浆细胞(浆细胞样淋巴细胞)染色质开始凝聚,呈车轮 状,无核仁 胞浆量多,灰兰色,有时少许紫红色小颗粒(见于浆白、MM)原、幼浆比较 幼浆 成熟浆细胞 椭圆形,直径8-20m 核圆形,明显偏位,染色质粗凝块,车轮状,胞浆丰富,灰兰色,无或少许嗜天青颗粒,近核处明显半圆形空白区 在正常骨髓中约占3%。骨髓瘤细胞 原、幼浆细胞、多核浆细胞见于浆细胞疾病。Mott

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