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BCR-ABL融合基因与免...巴细胞白血病中的相关性研究_常子维.pdf

上传人:哎呦****中 文档编号:209737 上传时间:2023-03-08 格式:PDF 页数:5 大小:2.31MB
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资源描述

1、现代生物医学进展Progress in Modern Biomedicine Vol.23NO.1JAN.2023doi:10.13241/ki.pmb.2023.01.027BCR-ABL 融合基因与免疫表型在急性 B 淋巴细胞白血病中的相关性研究*常子维1,3谈捷1李秋红2唐海龙3张友山1(1 长江大学附属第一医院 湖北 荆州 434000;2 空军军医大学西京医院儿科 陕西 西安 710032;3 空军军医大学西京医院血液科 陕西 西安 710032)摘要 目的:通过回顾性分析急性淋巴细胞白血病的免疫分型结果及融合基因表达情况,研究 BCR-ABL 融合基因与免疫表型的相关性。方法:用运

2、 SPSS23.0 软件及流式分析软件 KALUZA,分类比较 BCR-ABL 阳性和阴性病例中的免疫表型抗体阳性率及荧光强度,同时分析免疫表型亚型与年龄的关系。结果:在阳性率的比较中,CD10、CD34、CD25、TDT、CD38、IgM、CD45、CD303及免疫球蛋白轻链 P0.05,存在统计学意义。在 BCR-ABL 阴性病例,免疫分型四种不同亚型在以 18 和 40 岁分界的三个年龄段的比较中,18 和40 的比较在 Pre-B-ALL 和普通 B-ALL 中存在差异,P0.05,有统计学意义;18-39 和40 的比较在普通B-ALL 中存在差异,P0.05,有统计学意义。CD10

3、、CD34、CD45 的荧光强度在 BCR-ABL 阳性和阴性病例比较中存在差异,具有统计学意义。结论:BCR-ABL 与免疫表型存在相关性,BCR-ABL 阳性的急性淋巴细胞白血病免疫分型更倾向于表达幼稚细胞抗体,如 CD10、CD34,BCR-ABL 阴性病例在免疫表型亚型中主要为成熟 B-ALL,更倾向于表达成熟抗体如膜免疫球蛋白 KAPPA、LAMBDA。CD45 荧光强度在 BCR-ABL 阴性病例中比阳性病例表达更强。关键词:免疫表型;BCR-ABL;免疫分型亚型中图分类号:R733.7文献标识码:A文章编号:1673-6273(2023)01-137-05Correlation

4、between BCR-ABL and Immunophenotype in Acute BLymphocytic Leukemia*CHANG Zi-wei1,3,TAN Jie1,LI Qiu-hong2,TANG Hai-long3,ZHANG You-shan1(1 The First Affiliated Hospital ofYangtze University,Jingzhou,Hubei,434000,China;2DepartmentofPediatrics,XijingHospital,AirForceMilitaryMedicalUniversity,Xian,Shaan

5、xi,710032,China;3 Department ofHematology,XijingHospital,AirForce MilitaryMedical University,Xian,Shanxi,710032,China)ABSTRACT Objective:To study the correlation between BCR-ABL fusion gene and immunophenotype by retrospectively analyz-ing the results of immunophenotyping and fusion gene expression

6、in acute lymphoblastic leukemia.Methods:Using SPSS23.0 softwareand flow analysis software KALUZA,the positive rate and fluorescence intensity of immunophenotype antibody in BCR-ABL positiveand negative cases were classified and compared,and the relationship between immunophenotype and age was also a

7、nalyzed.Results:Inthe comparison of positive rate,CD10,CD34,CD25,TDT,CD38,IgM,CD45,CD303 and immunoglobulin light chain P0.05,therewas statistical significance.In BCR-ABL negative cases,immunophenotyping of four different subtypes in three age groups divided by18 and 40 years,comparison of 18 and 40

8、 in Pre-B-ALL and Common B-ALL There is difference,P0.05,there is statistical signifi-cance;18-39 and 40 have differences in Common B-ALL,P0.05,there is statistical significance.The fluorescence intensities ofCD10,CD34 and CD45 were significantly different between BCR-ABL positive and negative cases

9、.Conclusion:There is a correlationbetween BCR-ABL and immunophenotype.BCR-ABL positive acute lymphoblastic leukemia immunophenotypes are more inclined toexpress immature cell antibodies,such as CD10 and CD34,and BCR-ABL-negative cases are in the immunophenotype.Mainly matureB-ALL,more inclined to ex

10、press mature antibodies such as membrane immunoglobulin KAPPA,LAMBDA.CD45 fluorescence intensitywas stronger in BCR-ABL negative cases than in positive cases.Key words:Immunophenotype;BCR-ABL;Immunotyping subtypeChinese Library Classification(CLC):R733.7Document code:AArticle ID:1673-6273(2023)01-13

11、7-05*基金项目:国家自然科学基金项目(82100218)作者简介:常子维(1986-),男,本科,主治医师,主要研究方向:白血病免疫分型,E-mail:,电话:029-84775205通讯作者:张友山,男,硕士,主任医师,主要研究方向:血液病诊断与治疗,E-mail:(收稿日期:2022-02-27 接受日期:2022-03-24)137现代生物医学进展Progress in Modern Biomedicine Vol.23NO.1JAN.2023前言急性 B 淋巴细胞白血病(B-ALL)是一种以多种遗传异常为特征的异质性疾病1,免疫分型和融合基因对于白血病的诊断必不可少。多参数流式广泛

12、应用于 ALL 的诊断、分型和微小残留病(MRD)监测2,3。免疫表型客观准确,通过大量抗体,针对细胞特异性抗原,快速分析白血病的类型及细胞的恶性程度,区分正常细胞与异常细胞4,而融合基因可以反应疾病发生的本质,对治疗和预后有指导意义。费城(Ph)染色体在 30%的B-ALL 中被发现,是 B-ALL 的一个亚型5。BCR-ABL 融合基因是最常见的遗传基因异常6,与儿童及成人不良预后相关7,8。以往关于免疫表型及融合基因与疾病的关系已经研究很多,但有关于免疫表型和融合基因的关联性研究很少,本文将重点研究BCR-ABL 融合基因与急性 B 淋巴细胞白血病免疫表型的关系,同时分析不同年龄段免疫分

13、型亚型的分布,以对研究疾病所处的细胞阶段及疾病的诊断提供帮助。1 材料与方法1.1 一般资料选取我院 2018-2021 年诊断的 B 急性淋巴细胞白血病120 例,其中 BCR-ABL 阳性 57 例,BCR-ABL 阴性 59 例,通过骨髓或外周血形态学原始细胞大于 20%,过氧化物酶阴性,流式免疫分型诊断为优势表达 B 淋巴系抗原,分子生物学筛查43 种常见融合基因,荧光原位杂交及染色体 R 带筛查异常染色体,依据 WHO 的 MICM 分型标准及张之南 血液病诊断及疗效标准 第四版诊断。1.2 仪器与试剂流式细胞仪及免疫分型抗体均购自美国贝克曼库尔特公司,检测仪器型号为 NAVIOS,

14、白血病抗体包括 CD1a、CD2、CD3、CD7、CD10、CD13、CD14、CD15、CD19、CD20、CD22、CD25、CD33、CD34、CD45、CD38、CD79a、HLA-DR、CD303、CD304、IgM、Kappa、Lambda;检测方案为本实验室 10 色抗体组合。融合基因的检测试剂为上海源齐公司白血病融合基因筛查试剂盒,仪器为安捷伦 8300 和伯乐 CFX96。1.3 分析软件分析软件为 SPSS23 和流式配套软件 KALUZA,抗体阳性为胞膜阳性率大于 20%,胞浆抗体大于 10%。融合基因阳性为PCR 检测曲线 40 循环前开始指数扩增。2 结果2.1 BC

15、R-ABL 融合基因阳性和阴性病例免疫表型差异分析116 例 BCR-ABL 阳性和阴性病例常见流式免疫抗体表达情 况 的 分 析 中 CD10、CD34、CD25、TDT、CD38、IgM、CD45、CD303、免疫球蛋白轻链 P0.05,存在统计学意义,在统计的抗体中,CD19 和 CD79a 阳性率最高,在 BCR-ABL 阳性病例中比例为 100%,在 BCR-ABL 阴性中阳性率为 97%和 98%,跨系表达抗体比较中,CD13、CD33、CD117、CD7 无统计学意义,CD15、CD2、CD25 有统计学意义。跨系表达抗体以 CD33 表达最常见,其次为 CD13。(见表 1)。

16、2.2 免疫表型亚型病例数与 BCR-ABL 阴阳性的相关性分析在按免疫分型亚型的分类比较中,四种不同亚型在BCR-ABL 阳性和阴性病例中的表达比较,均存在统计学意义,P0.05,普通 B-ALL 的发病率最高,分别占 93%和 44%,在BCR-ABL 阳性病例中,成熟 B-ALL 未检出。(见图 2)。2.3 BCR-ABL 阴阳性病例中 CD45、CD34、CD10 的表达差异性分析在 CD45、CD34、CD10 平均荧光强度的分析中,BCR-ABL阳性病例和阴性病例三者均P0.05,存在统计学意义。(见表3)。2.4 不同年龄段 ALL 免疫分型亚型的分布差异分析在年龄段分组的比较中,40 岁和18 岁病例数的比较在 Pre-B-ALL 和普通 B-ALL 中存在差异,P0.05,存在统计学意义;在 18-39 和40 岁病例数比较中,普通 B-ALL 存在差异,P0.05,存在统计学意义。(见表 4)。表 1 BCR-ABL 阳性病例与阴性病例的抗体表达比较Table 1 Comparison of antibody expression between bcr-abl

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