1、作者简介：肖龙敏，男，医师，主要从事临床外科的相关研究。通信作者，：。论著 表达水平对非小细胞肺癌 免疫疗法反应性的影响肖龙敏，韩文健，吴洪恩施土家族苗族自治州民族医院外三科，湖北恩施 摘要：目的探讨 表达水平对非小细胞肺癌 免疫疗法反应性的影响。方法纳入该院 年至 年收治的非小细胞肺癌患者 例，其中男 例、女 例。使用免疫组织化学（）对接受 免疫疗法的非小细胞肺癌患者治疗前样本中的 蛋白水平进行了表征。对患者的疗效展开评估，分为完全缓解（）、部分缓解（）、疾病稳定（）与疾病进展（）。分析 表达水平对疗效的影响。无进展生存期（）曲线和 比例风险模型评估 与治疗反应之间的关联。比较不同 与 表达
2、情况的非小细胞肺癌患者 免疫治疗结果。检测非小细胞肺癌组织中免疫浸润的 细胞与 表达水平的关系。结果根据 染色水平，（）的非小细胞肺癌标本为 阴性（评分），（）分类为评分，（）评分为，（）评分为。与 低表达的肿瘤患者相比（评分为、），治疗前为 高表达的患者（评分为、）的 免疫疗法治疗后表现出较高的 或 率，而 或 率较低。此外，免疫疗法治疗后个月内的 与非小细胞肺癌患者的 高表达肿瘤之间存在明显关联。与 低表达肿瘤相比，高表达肿瘤患者的中位 较短（）。肿瘤为 阴性和 高表达的患者的 反应较差。接受 免疫疗法治疗且肿瘤为 阴性和 高表达的患者的个月 率也更低（），中位 更短（）。相比之下，低表达
3、的 阳性肿瘤患者具有更好的 结果。细胞的数量与增加的 评分有关（）。结论 的表达水平与非小细胞肺癌组织中免疫浸润的 细胞数量具有相关性。此外，靶向 途径的治疗可能会改变非小细胞肺癌患者对 免疫疗法的反应。关键词：；非小细胞肺癌；程序性死亡分子；程序性死亡配体；免疫疗法 ：中图法分类号：文章编号：（）文献标志码：，：（）（），（），（），（），（）（）（），（）（），（），（），（）（，），（，国际检验医学杂志 年月第 卷第期 ，），（）（）（），：；免疫检查点抑制剂（）的使用已成为癌症治疗领域最有前途的方法之一。在已确定的多种免疫调节剂中，程序性细胞死亡蛋白（）程序性细胞死亡蛋白配体（）轴导致
4、慢性感染和肿瘤中细胞免疫耗竭已被广泛研究。因此，针对 或 的阻断抗体已被开发并批准用于治疗各种晚期癌症，包括非小细胞肺癌，使其成为最成功的 。然而，进一步的临床应用面临广泛的挑战，例如一小部分受益人群、原发性和获得性耐药、缺乏预测和预后生物标志物以及治疗相关的不良反应。一种新的 靶标是黏附分子 ，它还充当由肿瘤细胞和肿瘤 相关骨髓细胞表达的免疫 检 查 点 配 体。在多种实体癌类型（包括非小细胞肺癌）的肿瘤细胞上被上调，并且已被证明有利于肿瘤生长和肿瘤存活。目前尚不清楚非小细胞肺癌 对免疫浸润环境的影响程度，或者 在非小细胞肺癌中的表达是否会影响对 免疫疗法的反应性。基于此，本研究旨在探讨 表
5、达水平对非小细胞肺癌 免疫疗法反应性的影响。资料与方法一般资料纳入本院 年收治的非小细胞肺癌患者 例，其中男 例，女 例。诊断标准：根据 中国表皮生长因子受体基因敏感突变和间变淋巴瘤激酶融合基因阳性非小细胞肺癌诊断治疗指南（版）的诊断标准诊断为非小细胞肺癌。纳入标准：（）患者同意且积极配合 免疫疗法者；（）临床资料完整。排除标准：（）患有其他肿瘤者；（）标本采集前接受任何治疗者；（）患有精神疾病者；（）合并高血压、心脏病者。所有患者均由本院病理科确诊并签署知情同意书。所有患者标本采集前未接受任何治疗，标本采集后被快速冷冻在液氮中，保存在。通过电话、门诊、或查阅病例途径开展随访，中位随访时间达
6、个月。对所有入组患者均进行了有效随访，随访时间结束后仍未出现疾病进展的患者将按照截止时间记录。试剂 、抗体购自 公司。购自北京华夏远洋科技有限公司。方法治疗方法和疗效评价使用 的 进行 免疫疗法。为一个治疗周期，个周期后评估患者的治疗效果。将治疗前周内所有入组患者的影像学数据作为基线，并 治疗后每个周期检查一次 或，以评估疗效。通过复查胸腹部、骨扫描、颅脑等检查，与治疗前影像进行对比，根据 的患者的疗效展开评估，存在完全缓解（）、部分缓解（）、疾病稳定（）与疾病进展（）之分。无进展生存期（）定义为入组的患者开始使用 免疫疗法至肿瘤出现（任一方面）进展或（由任一原因）死亡之间的时间，也可为没有出
7、现进展的随访截止时间。免 疫 组 织 化 学 染 色（）使 用 、抗体和 观察染色，并用稀释的苏木精复染。对两个具有代表性的 高倍视野进行 评估，评估阳性肿瘤细胞的百分比和 信号的最大强度（到）。评分使用盲法 评分法，分类如下：（无阳性细胞）、（个阳性细胞）、（个阳性细胞）或（个阳性细胞）。阴性定义为与用阴性 抗体染色相同的组织，阳性定义为 抗体染色为棕色的组织。多重免疫组织荧光分析非小细胞肺癌组织标本在载玻片上以 切片，并用 抗体、抗体、相应荧光二抗、进行染色。载玻片用 复染并盖上盖玻片。使用 分析软件对多光谱图像进行光谱分离，然后进行组织和细胞分割。对来自 的合并数据文件进行预处理，并使用
8、 图像映射工具为每个标记（、）设国际检验医学杂志 年月第 卷第期 ，置荧光阈值，然后使用 中的表格进行分段细胞计数。统计学处理本研究使用 软件进行的统计学分析。使用检验分析 不同分类与治疗反应的相关性。使用 相关分析通过多重免疫荧光进行检测的 表达水平与免疫细胞计数的相关性。认为差异具有统计学意义。结果 限制了非小细胞肺癌患者对抗 联合治疗的反应使用 对接受 免疫疗法的非小细胞肺癌患者治疗前组织标本中的 蛋白水平进行了表征。根据 染色水平，（）的非小细胞肺癌组织标本为 阴性（评分），（）分类为评分，（）评分为，（）得分为，见图。与 低表达的肿瘤患者相比（评分为、），治疗前为 高表达的患者（评分
9、为、）的 免疫疗法治疗后表现出较高的 或 率，而 或 率较低，见图。此外，观察到 免疫疗法治疗后 个月内的疾病进展与的非小细胞肺癌患者的高 肿瘤水平之间存在明显关联，见图。使用 和 和 比例风险模型进一步评估 与治疗反应之间的关联。与 低表达肿瘤相比，高表达肿瘤患者的中位 较短（），见图。高表达 阴性非小细胞肺癌对抗 治疗的反应很差接下来比较了肿瘤 与 阴性和 阳性非小细胞肺癌的 免疫治疗结果。肿瘤为 阴性和 高表达的患者的 反应较差，见图。接受 免疫疗法治疗且肿瘤为 阴性和 高表达的患者的个月 率也更差（），中位 更短（）。相比之下，低表达的 阳性肿瘤患者具有更好的 结果，见图。注：为不同评
10、分的 免疫染色评分；为不同 评分患者的治疗后表现；为 评分与治疗反应性的关系；为 表达水平与存活概率的关系。图 限制了非小细胞肺癌患者对 联合治疗的反应。注：为不同 和 表达情况患者治疗后的表现；为不同 和 表达情况患者对于治疗的反应性；为不同 和 表达情况患者对患者存活概率的影响；表示 高表达；表示 低表达；表 示 阴性表达；表示 阳性表达。图 非小细胞肺癌对 治疗的反应很差国际检验医学杂志 年月第 卷第期 ，与肿瘤浸润性 细胞上 表达增加相关使用多重免疫组织荧光来检查关键抑制性受体 在 细胞上的表达，发现 细胞的数量在 不同表达水平非小细胞肺癌组织中无显著差异（），见图。相反，细胞的数量与
11、增加的 评分显著相关（），见图。图 与肿瘤浸润性 细胞上 表达增加相关讨论针对细胞毒性淋巴细胞抗原（）、或 的 药物的开发在免疫肿瘤学领域获得了巨大的兴趣。虽然 是 年发现的第一个免疫检查点分子，但 轴在 细胞衰竭中的作用已被广泛研究。免疫肿瘤学家将这一概念扩展到抗肿瘤免疫，使 成为药物开发最有希望的靶点。本研究发现在非小细胞肺癌中，的表达表达水平与 免疫疗法疗效存在相关性。与 低表达肿瘤相比，高表达肿瘤患者的中位 较短（）。肿瘤为 阴性和 高表达的患者的 反应较差。与 低表达的肿瘤患者相比（评分为、），治疗前为 高表达的患者（评分为、）的 免疫疗法治疗后表现出较高的 或 率，而 或 率较低。
12、介导 细胞黏附，触发 细胞效应因子功能。结合两种不同的 细胞受体：和 。这些相互作用在细胞细胞接触部位积累，导致 细胞和靶细胞之间形成成熟的免疫突触。这会引起溶解颗粒和 的黏附和分泌，激活 细胞的细胞毒性。这种转移在一些表达大量 的肿瘤细胞中更为重要，并可能触发杀伤型 细胞的激活，为肿瘤提供一种免疫逃避机制。并且在介导肿瘤细胞侵袭和迁移中发挥作用。表达水平影响 免疫疗法的疗效，这表明靶向 通路的治疗可能对非小细胞肺癌患者有 益。肿 瘤 信 号 通 过 免 疫 检 查 点 受 体 和 来促进 细胞抑制。本研究发现 细胞的数量与增加的 评分显着相关，并且这种增加与 非小细胞肺癌患者的早期进展时间相
13、关。鉴于这些数据，共同靶向 通路联合 免疫疗法治疗可能会提高对非小细胞肺癌患者的反应性。综上所述，的表达水平与非小细胞肺癌组织中免疫浸润的 细胞数量具有相关性。此外，靶向 途径的治疗可能会改变非小细胞肺癌患者对 免疫疗法的反应。参考文献 ，（）：，（）：，：，（）：，：，（）：，：，（）：，（）：，（）：，（）：，（）：，（）：中国医师协会肿瘤医师分会，中国抗癌（下转第 页）国际检验医学杂志 年月第 卷第期 ，：，：，（）：，（）：，：，（）：，（）（），（）：，（）：，（）：，（）：，（）：，（）：，：，：，（）：，：，：，（）：，（）：，：，（）：，（）：陈金华，辜祖玄，邓立，等膀胱癌组织中 通过调节 表达促进膀胱癌 细 胞增殖、迁移和血管生成现代肿瘤医学，（）：，（）：（收稿日期：修回日期：）（上接第 页）协会肿瘤临床化疗专业委员会中国表皮生长因子受体基因敏感突变和间变淋巴瘤激酶融合基因阳性非小细胞肺癌诊断治疗指南（版）中华肿瘤杂志，（）：，（）：，（）：，（）：，（）：，（）：（收稿日期：修回日期：）国际检验医学杂志 年月第 卷第期 ，
