1、安徽科技学院学报，（）：收稿日期：基金项目：安徽省重点研究与开发计划项目（）；安徽省高校自然科学研究重大项目（）。作者简介：胡建（），女，安徽六安人，硕士研究生，主要从事动物营养与饲料研究。通信作者：胡忠泽，教授，：。绞股蓝水提物对肉鸡血常规、生化指标和抗体水平的影响胡建，胡忠泽，（安徽科技学院 动物科学学院，安徽 凤阳 ；动物营养调控与健康安徽省重点实验室，安徽 凤阳 ）摘要：目的：探究绞股蓝（）水提物对科宝肉鸡血常规、血清生化指标、新城疫和禽流感抗体水平的影响。方法：将 只日龄科宝肉鸡随机分为组，每组 只，对照组饲喂基础饲粮，试验组分别添加、的绞股蓝水提物，试验期。试验第天进行鸡新城疫、传
2、染性支气管炎二联活疫苗免疫，第 天进行鸡传染性法氏囊病活疫苗免疫，第 天进行鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感（亚型）三联灭活疫苗免疫，第 天进行重组禽流感病毒（）三价灭活疫苗免疫。试验 分别用抗凝管和非抗凝管对科宝肉鸡进行采血，检测血常规和血清生化指标。试验第、和 天分别对科宝肉鸡进行采血取血清，通过血凝和血凝抑制试验检测新城疫和禽流感、亚型抗体水平。结果：与对照组相比，添加绞股蓝水提物可显著提高科宝肉鸡血清的白蛋白含量（），添加绞股蓝水提物可显著提高科宝肉鸡血清的总蛋白、球蛋白和白蛋白含量（）；添加、的绞股蓝水提物均能显著降低科宝肉鸡血清中尿素氮含量（）。和的绞股蓝水提物可显著提高科宝肉鸡的
3、新城疫和禽流感 亚型母源抗体水平（）；、的绞股蓝水提物均可以显著提高 科宝肉鸡的新城疫抗体水平（）；绞股蓝水提物可显著提高 科宝肉鸡的禽流感 亚型抗体水平（）。结论：绞股蓝水提物可改善科宝肉鸡的血清生化指标，提高新城疫、禽流感 亚型抗体水平，以剂量添加最优。关键词：绞股蓝；水提物；血常规；血清生化指标；新城疫；禽流感；抗体水平中图分类号：文献标志码：文章编号：（）开放科学（资源服务）标识码（）：，（，；，）：，：，（）（），：，（），（），（）（），（）；（）：，：；养禽业作为我国畜牧业的重要组成部分，在满足家禽及其副产品市场需求的同时，可作为乡村振兴的重要支柱进一步推进农业农村现代化。而伴随
4、着高密度、集约化养禽模式的推广，禽流感、新城疫等禽类疾病的感染风险也逐渐增大。在 年月日我国正式禁止抗生素作为饲料添加剂后，如何保障家禽健康生长成为目前养禽业亟待解决的难题。中草药因富含黄酮、皂苷和多糖等多种活性成分，在预防家禽疾病、提高机体免疫功能等方面具有积极作用，已成为饲料添加剂的研究热点之一。已有研究证实，中草药饲料添加剂可以改善家禽的血常规、血清生化指标及新城疫、禽流感抗体水平。绞股蓝作为富含皂苷、多糖、黄酮、氨基酸和微量元素等多种活性成分的中草药，具有增强免疫、抗氧化、提高生长性能等多种功效，作为饲料添加剂具有广阔的应用前景。研究表明，绞股蓝可以在安全使用的前提下，改善蛋鸡的血清生
5、化指标，提高新城疫抗体水平 。而目前绞股蓝对肉鸡血常规、血清生化指标、新城疫和禽流感抗体水平的作用效果却鲜有研究。因此，本研究通过在肉鸡的基础饲粮中添加不同水平的绞股蓝水提物，探究其对肉鸡血常规、血清生化指标、新城疫和禽流感抗体水平的影响，为绞股蓝作为饲料添加剂应用于家禽生产提供理论基础。安徽科技学院学报 年材料与方法 试验动物日龄相近体重（）的科宝肉鸡 只（公母各半），健康成年公鸡只，均由泗县祺翔农业科技发展有限公司提供。试验药物鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗（株 株）（山东华宏生物工程公司，生产批号：）；鸡传染性法氏囊病活疫苗（株）（山东华宏生物工程公司，生产批号：）；鸡新城疫、传染性
6、支气管炎、禽流感（亚型）三联灭活疫苗（株 株株）（天津瑞普生物技术公司，生产批号：）；重组禽流感病毒（）三价灭活疫苗（株 株，株）（山东信得动物疫苗公司，生产批号：）。鸡新城疫抗原（生产批号：），禽流感病毒 亚型（株）抗原（生产批号：），禽流感病毒 亚型（株）抗原（生产批号：），禽流感病毒 亚型抗原（生产批号：），均购于哈尔滨国生生物科技公司。试验方法 试验设计将 只日龄科宝肉鸡随机分为组，每组 只，对照组饲喂基础饲粮，试验组 分别添加 、的绞股蓝水提物，试验期为。试验第天进行鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗免疫，第 天进行鸡传染性法氏囊病活疫苗免疫，第 天进行鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流
7、感（亚型）三联灭活疫苗免疫，第 天进行重组禽流感病毒（）三价灭活疫苗免疫。分别于试验第、天每组随机抽取只科宝肉鸡，第、天使用非抗凝管进行心脏采血，第、天进行翅下静脉采血，离心 后取血清，保存，用于新城疫、禽流感抗体水平的测定，检测样本数、抗体检测类型及检测时间见表。表抗体检测类型及检测时间 标准抗原类型检测时间及样本数 鸡新城疫抗原 禽流感病毒 亚型（株）禽流感病毒 亚型（株）禽流感病毒 亚型 血常规检测试验，每组随机抽取 只科宝肉鸡，用抗凝管进行翅下静脉采血，按血细胞分析仪要求进行血常规检测。血清生化指标检测试验，每组随机抽取 只科宝肉鸡，用非抗凝管对科宝肉鸡进行翅下静脉采血，离心 后取血清
8、，按血液生化分析仪要求进行血清生化指标测定。红细胞悬液配制使用抗凝管对健康公鸡进行翅下静脉采血，离心 ，弃血浆并缓慢加入 氯化钠注射液，混匀后 离心 ，弃去上清液及白细胞薄膜，继续加入 氯化钠注射液进行离心和洗涤，并不断重复上述步骤至红细胞上层无白细胞薄膜且上清液清澈时弃上清液，取 红细胞与 的 氯化钠注射液混合均匀，即红细胞悬液。血凝试验（）分别向 孔 型微量反应板每孔加入 氯化钠注射液，第孔加入 抗原液混匀，再从第孔吸取 加入第孔，如此进行倍比稀释，至第 孔后吸取 弃去，第 孔为对照，稀释后每孔再加入 氯化钠注射液，最后每孔加入 鸡红细胞悬液（表），振荡 ，于 恒温培养箱培养 后判定结果，
9、并配制 单位的抗原。血凝抑制试验（）分别向 孔 型微量反应板的第 孔中加入 氯化钠注射液，第孔加入 待检血清，混匀后吸取 于第孔，依次倍比稀释至第 孔混合均匀后吸取第 卷第期胡建，等：绞股蓝水提物对肉鸡血常规、生化指标和抗体水平的影响 弃去，第 孔作为抗原对照，稀释后每孔加入 抗原，轻轻震荡 ，置于 恒温培养箱培养 后每孔中加入 鸡红细胞悬液（表），再次震荡 ，培养 判定结果。表试验步骤 项目孔号 滴度 对照 氯化钠注射液 抗原 氯化钠注射液 红细胞悬液 表 试验步骤 项目孔号 血清稀释倍数 抗原对照对照 氯化钠注射液 血清 抗原 红细胞悬液 数 据 分 析依 据 高 致 病 性 禽 流 感
10、诊 断 技 术（国 标 ）、新 城 疫 诊 断 技 术（）对和 试验结果进行判定。所有检测结果均使用 统计软件进行 多重比较，数据结果以平均值标准差表示，表示差异显著。结果与分析 绞股蓝水提物对科宝肉鸡血常规的影响由表可知，与对照组相比，绞股蓝水提物试验组科宝肉鸡的白细胞总数（）、红细胞总数（）、红细胞压积（）、平均红细胞体积（）、红细胞分布宽度（）、血小板数目（）、血红蛋白（）含量、平均红细胞血红蛋白含量（）和平均红细胞血红蛋白浓度（）均没有显著变化（）。表绞股蓝水提物对科宝肉鸡血常规的影响 组别白细胞总数（）红细胞总数（）红细胞压积平均红细胞体积 红细胞分布宽度血小板数目（）血红蛋白含量（
11、）平均红细胞血红蛋白含量 平均红细胞血红蛋白浓度（）对照组 试验组 试验组 试验组 试验组 注：同列数据肩标无字母或相同字母表示差异不显著（.）；不同小写字母表示差异显著（）。下同。绞股蓝水提物对科宝肉鸡血清生化指标的影响由表可知，与对照组相比，绞股蓝水提物试验组 科宝肉鸡血清的总蛋白（）、白蛋白（）、球蛋白（）含量及谷丙转氨酶（）、谷草转氨酶（）活性均没有显著变化（）；试验组肉鸡血清 含量显著提高（），、含量及 和 活性没有显著变化（）；试验组肉鸡血清的 、和 含量显著提高（），和 活性没有显著变化（）。与对照组相比，绞股蓝水提物试验组肉鸡血清中尿素氮（）含量均显著降低（），而肌酐（）和尿酸
12、（）没有显著变化（）。安徽科技学院学报 年表绞股蓝水提物对科宝肉鸡血清生化指标的影响 组别（总蛋白）（）（白蛋白）（）（球蛋白）（）谷丙转氨酶活性（）谷草转氨酶活性（）（尿素氮）（）（肌酐）（）（尿酸）（）对照组 试验组 试验组 试验组 试验组 绞股蓝水提物对科宝肉鸡新城疫及禽流感 亚型、亚型、亚型抗体水平的影响由表可知，与对照组相比，和 的绞股蓝水提物试验组的科宝肉鸡新城疫抗体水平均没有显著变化（）。试验组、试验组科宝肉鸡的新城疫母源抗体水平显著提高（），试验组、试验组肉鸡新城疫抗体水平没有显著影响（）。绞股蓝水提物试验组肉鸡的新城疫抗体水平均显著提高（）。由表可知，与对照组相比，、和 绞股
13、蓝水提物试验组的科宝肉鸡禽流感、亚型抗体水平均没有显著变化（）。与对照组相比，和 绞股蓝水提物试验组的科宝肉鸡禽流感 亚型抗体水平均没有显著变化（）。试验组和试验组科宝肉鸡的禽流感 亚型母源抗体水平在第天显著提高（），试验组和试验组肉鸡的禽流感 亚型抗体水平没有显著变化（）。试验组肉鸡的禽流感 亚型抗体水平显著提高（），试验组、试验组、试验组的禽流感 亚型抗体水平没有显著变化（）。表绞股蓝水提物对科宝肉鸡新城疫、禽流感抗体水平的影响 抗体组别平均抗体滴度（）对照组 试验组 新城疫试验组 试验组 试验组 对照组 试验组 禽流感 亚型试验组 试验组 试验组 对照组 试验组 禽流感 亚型试验组 试验
14、组 试验组 对照组 试验组 禽流感 亚型试验组 试验组 试验组 结论与讨论作为免疫细胞的白细胞通过中性粒细胞和单核细胞的吞噬作用，清除凋亡及损伤的细胞，从而抵御和消灭入侵的病菌；作为血液运送氧气最主要媒介的红细胞因其表面的 抗体具有免疫黏附功效，从而清除免疫复合物，促进吞噬作用；血小板通过识别 样受体、样受体等感知病原体，释放抗感第 卷第期胡建，等：绞股蓝水提物对肉鸡血常规、生化指标和抗体水平的影响染分子，调节免疫信号通路从而参与病毒防御，提高机体免疫功能。因此，通过对家禽血液中血细胞数量、形态、分布等血常规检验，可以直接反映血细胞的免疫指标，从而判断饲料添加剂的耐受剂量。本研究表明，在科宝肉
15、鸡的基础饲粮中添加绞股蓝水提物对其 、和 均没有显著影响，说明本研究中的绞股蓝水提物添加量不会引起血细胞的异常，可以作为饲料添加剂进行安全添加。和 是反映家禽肝肾功能的重要指标，其中 是蛋白代谢的主要产物；具有运输代谢物、调节被运输物质等多种生理功能，包括 和 ，且 是提高机体免疫力、抵抗外来病原体的有效武器 。杨翠等 将连翘、当归和黄芪等 味中草药制备成“连黄”添加剂在基础饲粮中进行添加发现，东兰乌鸡的 含量显著升高，含量显著降低。刘宽辉等 研究表明，党参多糖可以显著提高罗曼蛋鸡的血清 含量，降低 含量。田盈盈等 研究发现，西洋参投料可以显著提高龙凤土鸡的血清、含量。本研究发现，绞股蓝水提物
16、可以显著提高科宝肉鸡血清、和 含量，降低科宝肉鸡血清 含量，同样说明了中草药饲料添加剂可以提高家禽的免疫力，改善其肝肾功能。禽流感是由正粘病毒科中的禽流感病毒感染引起的禽类疾病，根据血凝素（）和神经氨酸酶（）的不同，可分为 个 亚型和 个 亚型，而其中 、亚型较为常见。新城疫是由副粘病毒科中的新城疫病毒感染引起的禽类疾病，具有发病快、病程短、死亡率极高的特点。由于禽流感和新城疫是高度接触性传染病，会给养禽业造成巨大的经济损失，因此在家禽养殖过程中作为常见的免疫防控疾病。有研究表明，随着核桃青皮水提物在基础饲粮中的添加，可以显著提高云南本地土杂鸡的新城疫、禽流感 亚型抗体水平。杨奇林等 研究表明，由党参、白术和茯苓等制备的复方添加剂可以显著提高 肉鸡的禽流感 亚型抗体水平。李少方等 研究表明，在基础饲粮中添加由山楂、麦芽和大青叶等组成的芪楂口服液可以显著提高免疫后、黄羽肉鸡的新城疫和禽流感 亚型抗体水平，提高其免疫功能。马璐等 研究发现，在基础饲粮中添加 和 的甘草多糖均可以显著提高 日龄肉鸡的新城疫抗体水平。杨靖松等 研究发现，、和的党参粗提物可以提高、青脚麻鸡的新城疫抗体水平。家禽在
