1、西藏医药年第卷第期（总期）春传统医学春仁青芒觉对急性肺损伤小鼠免疫功 能的影响孟航张敏刘通张燕丽文泽馨杨依西藏民族大学医学院环境与基因高校重 点实验室教育部 藏药检测工程中心陕西咸阳摘要的观察仁青芒觉对脂多糖（，）诱导的急性肺损伤（，）小鼠免疫功能的影响。方法选取 只野生型小鼠，随机分为六组，每组各只，分为 空白对照组、模型组（）、地塞米松（，）阳性对照组（）、仁青芒觉治疗组共三组（高剂量、中剂量、低剂量）。治 持后，取眼静脉血检测白细胞介素（，）、胖瘤坏死因子（，）表达水平；检测肺水肿状况、肺组织湿干重比及小鼠脏器指数；流式细胞术检测淋巴细胞亚群变化及、细胞占比。结系仁青芒觉三组（高、中、低
2、）与空白对照组相比，均可降低急性肺损伤程度，降低肺组织湿干重比（），提高小鼠脾脏和胸腺指数（）；仁青芒觉的高、中组可以降低血清中、的表达、三组均提高淋巴细胞亚群比例、高、中组降低细胞亚群、细胞的占比（）；中、低组可降低细胞占比（）。结？仁青芒觉、剂量组可以降低小鼠血清中、和水平；、剂量组降低细胞数量，且各剂量组都能下调细胞数量，通过下调炎症因子和免疫细胞对小鼠具有治疗作用。关键词仁青芒觉急性肺损伤免疫调节急性肺损伤（，）是一种以肺内免疫细胞浸润为特征的临床综合征，临床上极易发展为急性呼吸窘迫综合征，最终导致呼吸衰竭，其死亡率高达，严重威胁人类健康，。脂多糖（，）是内毒素的主要活性成分，当内毒素
3、进人体内可引起肺炎性细胞增多、肺微血管通透性增加等病理变化。从而引起严重肺部炎症损伤，影响肺的结构和功能，最终导致。藏药仁青芒觉可用于治疗消化系统疾病和抗炎，如泄泻、食物中毒、强制性脊柱炎、胃肠炎。本研究拟观察仁青芒觉对引发小鼠血清及脾脏中免疫因子及免疫细胞比例的影响，并探讨其对的可能作用及机制，以期为临床应用提供理论依据。材料与方法实验药物藏 药仁青芒觉（西藏 甘露藏 药股份有限公司，国准字号，规格丸），地塞 米 松磷酸钠注射液（辰欣药业股份有限公司，国准字号，规格支）。（北京博奥拓达科技有限公司，支）。动物及建模分组野生型小鼠（许可证号陕）（，）购自于成都达硕人类疾病模型动物中心（雌性，周
4、龄，级），饲养于西藏民族大学基础医学动物房。试剂（支）购自公司，小鼠、试剂 盒 购自武汉伊莱瑞特公司。抗体偶联荧光素、皆购自公司，红细胞裂解液（）购自于西安赫特生物科技公司。仪器流式细胞仪、高速冷冻离心机均购自公司全波长酶标仪购自公司方法动物分组及给药选取只野生型小鼠，随机分为六组，每组各只，分为空白对照组、模型组（）、地塞米松（，）阳性对照组（）、仁青芒觉治疗组共三组（高剂量、中剂量、低剂量）。其中，除空白对照组外，其余各组经腹腔注射建立急性肺损伤模型，后，空白对照组、模型组给予灌胃处理，其通讯作者：张敏项目基金：国家自然科学基金（）；西藏自治区科技厅项目（乂乙，乂乙）；西藏自治区自然基金（
5、）；西藏民族大学应急项目（）。西藏医药年第卷第期（总期）余组给予不同剂量仁青芒觉灌胃处理。观察指标小鼠肺组织干湿重比、免疫器官指数、血常规的测定、胸腺、脾脏称重，计算脏器指数。免疫器官指数脏器质量（）小鼠体质量（）检测细胞因子经处理后小鼠称重，摘眼球取眼静脉血，静置过夜，离心取上清，根据试剂盒说明书检测、的浓度。流式细胞术（检测小鼠脾脏细胞数量及占比脱 颈 处死小鼠，取小鼠脾脏制备淋巴细胞悬液个，细胞活性计数，取各组淋巴细胞悬液于流式管中，加（的在丈、离心，洗涤次，加（重悬细胞，加入表染抗体（、）各，代避光孵育，加 洗涤次，上流式细胞仪器检测。统计学处理采用及软件处理。定量资料以表示，组间比较
6、采用，组与组比较采用，为差异有统计学意义。结果仁青芒觉可降低程度空白对照组小鼠精神状态良好，呼 吸平稳，活动自如。模型组小鼠活动明显减弱，精神不振，与模型组比较，仁青芒觉组精神状态明显较好。处死小鼠观察肺部损伤状况结果如图所示：空白对照组肺组织表面呈粉红色，整肺均匀，无淤血，模型组肺组织肿胀明显，左肺大面积出血，右肺出血面积较小，质地变硬，与空白对照组比较，即可造成典型的模型。与模型组相比，仁青芒觉各剂量组均显著降低程度。仁青芒觉高、中剂量组与组躲相当。图仁青 芒觉对急性肺损伤小鼠肺组 织 影响注：空白对照组；：模型 组；：组；：高剂量组；：中剂 量 组：低剂量 组仁青芒觉可降低小鼠肺组织湿干
7、重比取小鼠肺组织检测肺组织干湿重比，结果如图所示，与 空白对照组比较，模型组值明显升高（，），提示模型组充血变大，其含水量增高，可以造成小鼠肺损伤。与组相比，高 剂量组值显著降 低（，）夕图各组肺湿干 质 量 比值（）的变化 组；组；组仁青芒觉升高小鼠胸腺和脾脏指数检测小鼠胸腺与脾脏指数的结果如图所示，与空白对照组相比较，模型组胸腺指数显著降低（，图与空白对照组比较，组脾脏指数明显降低（，图）与组相比，图显示仁青芒觉高、中、低剂量组脾脏指数虽有差异性变化具有 统计学意义（；，），但其给药后效果与空白对照组无明显差异。？，彳，命图仁青 芒觉对小鼠胸腺指 数和 脾 脏指数的影 响林组；组；组仁青芒
8、觉降低小鼠血清丨、的水平与空白对照组比较，造模组小鼠血清中明显上升（，图）。同时，也显著升高（，图）。与组相比，仁青芒觉高、中剂量组血清中水平差异不显著（；，），统意义同样，与组相比，仁青芒觉高、中剂量组西藏医药年第卷第期（总期）图仁青芒觉提高细胞比例并下调细胞数量注：组；：模型 组；组；：组；：组；：组组；组；？组仁青芒觉对、细胞细胞的影响与组相比，仁青芒觉中、低剂量组无差异（；图仁 青芒觉对炎性细胞因子、的影响 组；组；组；组仁青芒觉对急性肺损伤小鼠细胞的影响结果如图所示，与空白对照组比较，模型组细胞比值显著降低（，图）；与空白对照组相比，模型组数量显著升高（，图）；与组相比，仁青芒 觉高
9、、中剂量组细胞数量无显著性差异（；，）含量差异也不显著（；，），无统计学意义，提示治疗效果与地塞米松相一致。，），无统计学意义。与组相比，仁青芒 觉中、低剂量组无差异（；，），无统计学意义。图仁青芒觉、细胞的占比影响注：组；：模型 组；组；：由组；：组；：组 组；组；组。讨论仁青芒觉为统藏药，是二十多味药材组成的复方制剂，功效主要体现在清热解毒，利胆健胃，提高机体免疫力，在新冠肺炎防治过程中发挥着重要的作用】通过检测仁青芒觉治疗小鼠的免疫指标，结果发现仁青芒觉可以缓解小鼠急性肺损伤程度，与目前关于的研究实验现象相一致。的临床表现为、？等促炎因子的大量合成与释放，这恰恰也反应了肺织炎症反应的强度
10、，。本实验检测到仁青芒觉可以降低小鼠血清中、水平，表明仁青芒觉可以减轻肺组织的炎症程度，这也与目前已发表的关于治疗的药物的表现相一致。细胞能反应机体免疫功能是否正常，并且其下降程度与疾病严重程度和预后密切相关。本实验中，仁青芒觉可以纠正小鼠淋巴细胞亚群的比例异常，该研究结果符合动物实验关于抑炎指标的检测标准，并且仁青芒觉可以降低小鼠、细胞的占比。综上所述藏药仁青芒觉能减轻肺组织损伤程度，平衡淋巴细胞比例，改变免疫细胞的活化程度，抑制、的合成和释放，为临床治疗提供了一定参考价值。【参考文献】，（：？广 西藏医药年第卷第期（总期），（）：，：，：，（）：，（）：格柔措藏药仁青芒觉治疗慢性胃炎的疗效
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