1、如何根据文献标准做好仿制药质量(zhling)研究,余立,第一页，共六十八页。,仿制(fngzh)药品,在国际上，仿制药从广义上讲是指专利到期的已上市药，因此又被称为非专利药。在我国，仿制药申请是指对国内已批准上市销售的已有国家标准的原料药与制剂的注册申请。（化药6类、中药、天然药物9类、生物制品15类）药品注册管理办法第七十四条：仿制药应当与被仿制药具有同样的活性成分、给药途径、剂型、规格和相同的治疗(zhlio)作用,第二页，共六十八页。,仿制药品(yopn)研究,研发基调 比较(bjio)研究 研发目标 不次于被仿制药 研发基础 被仿药的专利、文献及标准 中国药典 国外药典（EP/USP
2、/BP/JP）包括 局颁标准（转正标准、地标升国标）进口药注册标准,第三页，共六十八页。,其他(qt)参考资料,研发(yn f)要求-已有国家标准化学药品研究技术指导原则,第四页，共六十八页。,已有国家标准化学药品研究技术指导原则 在选择参比制剂时一般遵循以下原则：如原发厂家生产的制剂已在我国上市，一般首选原研厂产品作为参比制剂；如不能获得，次选研究基础较好、临床应用较为广泛的首仿厂产品作为参比制剂；也可以对不同厂家生产的同品种进行(jnxng)质量对比，优选质量较好、占市场份额较高的产品作为参比制剂。,比较研究的标尺(bioch)-被仿制药品的选择原则,第五页，共六十八页。,原研品,认可度高
3、,首仿品,被仿品,注意：可比性-贮存时间大致相同！包装条件相同！真实性 保存好发票、标签、批号(p ho)或照片,比较(bjio)研究的标尺问题-被仿制药品的选择原则,第六页，共六十八页。,研发者困难-有些原研药品不易得到审评者困难-如无对照药品，无法比较(bjio)杂质谱，无法评价质量是否等同、稳定性是否等同 例外-主成分纯度99%以上，单个杂质0.1%以下，稳定性非常好，6个月加速无降解趋势,比较研究的标尺-使用(shyng)对照药品的矛与盾,第七页，共六十八页。,药学比较(bjio)重点：质量与稳定性对比研究对比检验 研究项目原执行标准 考察方法原法定标准,比较(bjio)研究的范围与方
4、法-考察项目与方法的选择,第八页，共六十八页。,物料不同原料、辅料分析对象 工艺不同试剂、中间体、副产物 设备不同质材、参数精度 不全面没的学（复方无有关物质）已有标准(biozhn)不完善不应学（地标升国标标准）不适用不能学（厂送设备,特定杂质）,为什么呢？,第九页，共六十八页。,结合产品生产个性(gxng)应 关注标准隐性变化 借鉴同类最新动态进行纵横向比较,如何在已有文献(wnxin)标准基础上变化拓展,第十页，共六十八页。,分析(fnx)工艺、处方异同点 重点落在差异处 为什么要不同 不同点对产品的影响 质量标准随之改变,结合产品生产(shngchn)个性,第十一页，共六十八页。,第十
5、二页，共六十八页。,单体(dn t),混合物,分子量分布(fnb),组分(zfn)比例,晶型,异构体,结晶水,主成分,多组分生化药的特点,活性成分的比较,第十三页，共六十八页。,第一次飞跃(fiyu),第二次飞跃(fiyu),杂质质控理念(l nin)的变迁,第十四页，共六十八页。,杂质(zzh)谱的定义,Impurity Profile（杂质谱）:A description of the identified and unidentified impurities present in a drug substance.对存在于药品中所有(suyu)已知杂质和未知杂质的总的描述。,第十五页，
6、共六十八页。,Click to edit title style,选择(xunz)最优,物质(wzh)守恒,杂质(zzh)归属,比较杂质的数与量，一致或基本一致，物质基础相同与否决定仿制药可否桥接已上市药品的安全有效性结果,杂质谱分析的意义,杂质谱分析,第十六页，共六十八页。,已鉴定(jindng)杂质Identified Impurity,特定(tdng)杂质Specified Impurity,潜在(qinzi)杂质PotentialImpurity,毒性杂质ToxicImpurity,已确证了结构特征的杂质,在质量标准中规定检查并有自己限度标准的杂质。已鉴定或未鉴定,理论推测在生产或贮藏
7、过程中可能产生的杂质实际产品中不一定存在,具强烈不良生物作用的杂质,第十七页，共六十八页。,新方法(fngf),分析方法的有效性（氨苄西林钠/舒巴坦钠）,原方法(fngf),中国(zhn u)抗生素杂志，2009，34：734,在对各国药典方法比较的基础上确定分析方法,第十八页，共六十八页。,强制降解试验评价方法分离(fnl)能力,粗品强制降解（工艺杂质+降解杂质）强制降解条件的摸索控制以杂质增长10%20%为最佳(zu ji)各峰分离程度的考察比较色谱系统的评价以图谱和数据为基础，针对实验目的，作出相应的结论！,第十九页，共六十八页。,杂质谱的比较方法(fngf)选择最优,柱串联技术适用于溶
8、解度无明显差异但电荷上有明显差异的难分离物质，通过将一根SCX（阳离子交换）短柱与一根MG C18长柱串联就可以简单达到将其分离的目的。原理：有电荷差异的被分离物质进入色谱柱串联系统后，带正电荷的物质（通常是碱性物质）会由于SCX短柱的离子交换作用而被保留在短柱中，而带负电荷的物质（通常为酸性物质）与中性物质则会毫无阻碍的通过短柱进入C18长柱中，从而成功分离；然后由于MGC18长柱中疏水性基团间的相互作用而对中性物质有强保留作用，但对带负电荷物质无强保留作用，这样带负电荷物质与中性物质也简单被分开(fn ki)了如果为了让峰形更好，各峰间分离更开，还可在阳离子交换短柱与C18长柱前接一根NH
9、2短柱（它可与阴离子发生交换作用），进行三根串联，也可以使带负电荷的酸性物质与中性物质达到更好的分离效果。,第二十页，共六十八页。,杂质谱的比较(bjio)多种互补,不同色谱系统（流动相、色谱柱、波长）不同检测器（uv、DAD）不同原理(yunl)的方法-分离或检测,第二十一页，共六十八页。,杂质(zzh)谱的比较,平行列表、图谱叠加、逐峰比较报告新杂质（个数、单个最大、总量）单一新杂质量(zhling)（0.1%？、0.2%？）新杂质总量所占比例,第二十二页，共六十八页。,第二十三页，共六十八页。,杂质(zzh)峰的归属,平行列表、图谱叠加、逐峰比较杂质来源杂质是什么(shn me)物料平衡
10、（计算与归一）,第二十四页，共六十八页。,新杂质的研究 药物(yow)杂质的可能来源,第二十五页，共六十八页。,1.原料：红霉素 A、红霉素 B、红霉素 C、红霉素D、红霉素 E、红霉素 F、阿奇霉素B、阿奇霉素C、阿奇霉素E、阿奇霉素F2.中间体：红霉素A肟（Z）、6，9-亚胺醚、氮红霉素A、红霉素A肟（E）、红霉素 C肟（E）、9，11-亚胺醚、红霉素C 6，9-亚胺醚、红霉素A内酰胺 3.副产物：红霉素-N-氧化物、N-去甲基红霉素A、N-去甲基阿奇霉素A、氨基阿奇霉素A、N-甲酰基-N去甲基阿奇霉素A、N-去甲基-N-苯磺酰基阿奇霉素、阿奇霉素N-氧化物、3-去（二甲(r ji)氨基）
11、-3,4-去氢阿奇霉素、O-甲苯磺酰基红霉素肟、红霉素Z肟重排物、氮红霉素11，12-硼酸酯、N，N-去二甲基N-甲酰基阿奇霉素A、丙基阿奇霉素、3-N，N-去二甲基氨基-酮基阿奇霉素A、阿奇霉素11，12-硼酸酯4.降解产物：去克拉克定糖阿奇霉素A、去克拉克定糖氮红霉素、红霉素8，9-脱水-6，9-半缩酮、红霉素6，9：9，12-螺缩酮,阿奇霉素中可能存在(cnzi)的杂质：37种,第二十六页，共六十八页。,模拟(mn)色谱图,实际(shj)色谱图,第二十七页，共六十八页。,结构(jigu)确证常用的方法,第二十八页，共六十八页。,特定(tdng)杂质 非特定杂质,有效(yuxio)杂质宽管
12、,毒性(d xn)杂质严控,杂质限度的制订,未知单个 0.10%,根据生产现状校正因子,新增杂质限度的考虑,第二十九页，共六十八页。,新增杂质(zzh)限度的考虑,毒性杂质严控：-遵守公认标准-不超越前期标准-以相关安全实验(shyn)数据为科学依据-日服药剂量推算安全限度,第三十页，共六十八页。,新增杂质(zzh)限度的考虑,有效杂质(zzh)宽管：-不能不管-不超越前期标准-以投入产出比等利弊平衡为科学依据,第三十一页，共六十八页。,新增杂质(zzh)限度的考虑,普通杂质：-不超越(choyu)前期标准-未知单个一般不得过0.10%、0.2%（日服剂量）-以安全实验和投入产出比等利弊平衡为
13、科 学依据,第三十二页，共六十八页。,杂质毒性(d xn)快速评价,斑马鱼毒性快速评价法，对杂质的胚胎毒性、神经毒性，心脏毒性等进行评价。优点：杂质用量少无需知道杂质结构实验周期短（34天一个(y)周期）,第三十三页，共六十八页。,第三十四页，共六十八页。,药物耳毒性检测利用一种特殊染料对斑马鱼幼体头部耳蜗区神经丘毛细胞的染色，检测毛细胞的存活状态，来判断检测物的耳毒性。下图中红色圈示耳蜗区域；给药组中红色箭头示给药后毛细胞减少(jinsho)，黄色圈示给药后1神经丘消失。,给药后,系统(xtng)对照组（正常幼体）,第三十五页，共六十八页。,隐性变化举例(j l)钠盐的鉴别反应,重金属检查法
14、：pH测定法：不溶性微粒检查法：可见(kjin)异物检查法：渗透压摩尔浓度：,标准字面(zmin)未改，实质内容已变,第三十六页，共六十八页。,隐性变化(binhu)举例 锌盐的鉴别反应,重金属检查法：pH测定法：不溶性微粒检查法：可见异物检查法：渗透压摩尔(m r)浓度：,新方法做考察:取样(qyng)量,辅料干扰,延伸-环境友好,第三十七页，共六十八页。,Page 38,引湿性试验(shyn),不溶性微粒(wil),高分子聚合物,HPLC,重金属,溶出度,残留(cnli)溶剂,含量均匀度,制剂通则,现行版药典附录修订重点项目提示,第三十八页，共六十八页。,有关(yugun)溶出度的变化,小
15、杯法正在被淘汰！体外模拟，灵敏度高的测定方法，比色池调整 沉降篮使用与否要求标准写明！检验者判断不一，使用与否差异(chy)大，研发决定“可”“应”“照”,第三十九页，共六十八页。,有关含量(hnling)均匀度的变化,10mg 25mg(小剂量规格)5%25%(主药占总量比例)复方(ffng)制剂 重（装）量差异 含量均匀度,第四十页，共六十八页。,参考(cnko)同类最新动态举例,由于某些药物组成的复杂性，特别是一些生物大分子药物，使用传统(chuntng)的分析方法已经不能满足当前的质控需要，2010年版药典逐渐改用现代分析技术。首次运用毛细管电泳法 注射用抑肽酶：检查两个特定杂质 注射
16、用盐酸头孢吡肟：方法1-毛细管电泳法 N-甲基吡咯烷 方法2-HPLC法（羧基柱，电导检测）,第四十一页，共六十八页。,抑肽酶SDS-PAGE凝胶电泳图,本品系自牛胰或肺中提取、纯化制得的肽酶抑制剂。采用SDS-PAGE凝胶电泳的方法抑肽酶的有关物质，结果如图所示，都只有一个条带。可能(knng)是抑肽酶和有关物质的分子量相差不大，使用凝胶电泳不能将其分离,第四十二页，共六十八页。,2010版：品种增加,方法多元化 自填柱和商品玻璃(b l)柱：填料常用葡聚糖凝胶G-10（Sephadex G 10）；短柱子的使用，减少分离时间 商品凝胶柱 TSK-GEL G2000SWXL：头孢地嗪与注射用头孢地嗪,-内酰胺类抗生素的高聚物,第四十三页，共六十八页。,盐酸(yn sun)头孢替安分析方法的比较,Sephadex G-10系统(xtng),TSK-Gel G2000swxl系统(xtng),0.8ml/min,第四十四页，共六十八页。,头孢羟氨苄高分子杂质分析(fnx)图谱,Sephadex G-10系统(xtng),TSK-Gel G2000swxl系统(xtng),0.8ml/mi
