1、细胞(xbo)信号转导,Cellular Signal Transduction,第一页，共八十四页。,第一章,细胞(xbo)间信号,第二页，共八十四页。,1.细胞间通讯(tngxn)的类型,细胞是机体结构和功能的基本(jbn)单位。机体行使的每一项功能都是多个细胞之间甚至多种细胞之间协同作用的结果。细胞间通讯的形式,直接(zhji)接触型,间接联系型,直接联系型,第三页，共八十四页。,一种细胞(xbo)表面的膜蛋白可以被另一种细胞(xbo)膜上的受体识别；,信号(xnho)细胞 靶细胞,B,小分子可能通过间隙连接直接(zhji)转运,信号细胞 靶细胞,C,一种细胞释放的分子可以被 另一种细胞
2、上的受体识别,第四页，共八十四页。,1.1.1 特点：信号转导的细胞相互接触，通过质膜表面分子直接相互识别、结合进行胞间联系。可发生于同种同类(如低等生物细胞聚集)、同种异类（如动植物性细胞授粉(shufn)受精）、异种同类（如输血与器官移植）、异种异类（如病原微生物对寄主细胞的侵染）。,1.1 直接(zhji)接触型：识别与黏合,第五页，共八十四页。,1.1.2 分子(fnz)基础,本世纪初，wilson在利用海绵细胞作混合、分离实验时，发现细胞有选择识别适当邻居(ln j)的现象。之后证实这种细胞间的识别和粘附受控于细胞表面的糖蛋白，即细胞粘附分子（cell adhension molec
3、ule，CAM）细胞粘附分子是一大类膜蛋白，介导细胞之间以及细胞与细胞外基质以及某些血浆蛋白间的识别与结合，并在细胞的增殖、分化、移行；细胞的信号转导；免疫调节；炎症反应；血栓形成；损伤修复；病毒和原虫感染；肿瘤转移等生理和病理生理过程中发挥重要作用。,第六页，共八十四页。,第七页，共八十四页。,粘附分子(fnz)的结构、分类,绝大多数粘附分子是存在于膜上的整合糖蛋白，由较长的细胞外区、跨膜区和较短的细胞内区组成。配体（胞外区）粘附分子（胞内区）ABP细胞骨架 根据编码基因及产物的结构功能特点通常(tngchng)分为5大家族:钙粘素（cadherin）家族；整合素(integrin)家族；选
4、择素(selectin)家族；免疫球蛋白超家族；CD44家族。另外还有一些尚未归类的粘附分子。,第八页，共八十四页。,细胞粘附分子家族(jiz)结构示意图,第九页，共八十四页。,细胞中主要(zhyo)的粘附分子家族 _ 粘附分子家族 主要成员 Ca2+/Mg2+依赖性 相关细胞连接 粘附方式 _ 钙粘素家族 E,N,P钙粘素+粘合带 嗜同性 桥粒钙粘素+桥粒 选择素家族 P,L,E选择素+嗜异性 免疫球蛋白 NCAM 嗜同性 家族 ICAM 嗜异性 整合素家族 51 等多种+粘合斑、半桥粒 嗜异性 _,第十页，共八十四页。,第十一页，共八十四页。,sCAM,粘附分子还能以溶解(rngji)或循
5、环形式存在于血清和其他体液中，被称为可溶性粘附分子（sCAM）。他们是粘附分子细胞外区脱落形成，与炎症、肿瘤转移等有关，由于他们易于检测，故有较大临床价值。能与膜型相应的粘附分子竞争结合配体，抑制由膜型黏附分子介导的相应反应（如内皮细胞与白细胞的粘附）,第十二页，共八十四页。,细胞(xbo)粘附分子的配体,1）细胞外基质：ECM成分是一些粘附分子的重要配体，如透明质酸是CD44家族的配体；胶原，纤维结合素，纤连蛋白、层粘连蛋白等是整合素家族的配体。ECM分子中含有典型的三肽序列Arg（精）-Gly（谷）-Asp（门冬），简称(jinchng)RGD序列。含有RGD序列的合成肽可抑制整合素与细胞
6、外基质的结合，从而阻断由整合素介导的血小板聚集、感染、炎症、肿瘤转移等过程。2）同种或者异种粘附分子的胞外区,第十三页，共八十四页。,3）细胞表面的寡糖4）血浆中的可溶性蛋白：纤维蛋白原表面有多个RGD序列，可作为连接分子介导血小板之间的粘附反应。另外细胞表面的CAM通过与一个可溶性的多价分子结合介导细胞之间的粘附，是细胞间粘附的又一方式。5）细菌(xjn)、病毒等：HIV（RGD）；鼻病毒，疟原虫（通过气道上皮和红细胞表面ICAM-1）。,第十四页，共八十四页。,细胞(xbo)粘附分子与细胞(xbo)骨架的联系及信号转导,已证明多种粘附分子的胞内区通过肌动蛋白结合蛋白（actin bindi
7、ng protein，ABP）与肌动蛋白组成的细肌丝相连。这种结合不仅加强了粘附的力度(ld)，还参与细胞的信号转导。已知多种信号转导蛋白，如酪氨酸蛋白激酶（PTK）、酪氨酸蛋白磷酸酶（PTP）等通过对粘附分子胞内区和与其结合的ABP可逆磷酸化反应，调节肌动蛋白依赖的多种细胞功能（粘附、变形和运动）,第十五页，共八十四页。,细胞(xbo)粘附分子的调节,粘附分子在胚胎发育期、免疫炎症反应以及肿瘤转移过程中有严格的时相性表达，受到胞外信号，包括激素、生长因子、细胞因子和炎症介质等因素的调节。这些胞外信号与细胞表面的受体结合后能激活多条信号转导通路，在这些通路中激活的PTK等可使粘附分子胞内区磷酸
8、化进而激活多条胞内信号转导途径，导致细胞骨架重组，造成(zo chn)细胞形态的变化以及细胞的增殖、分化、凋亡等改变。,第十六页，共八十四页。,（1）钙粘素家族（cadherin）：钙依赖(yli)的细胞粘附分子家族,一类依赖Ca2+的跨膜单链糖蛋白，在Ca2+存在条件下，通过同种亲和性结合介导同源细胞间的粘附，参与构建细胞间的粘合连接（adherence junction）。（桥粒、粘着带，配体为它本身(bnshn)）对胚胎发育中的细胞识别、迁移和组织分化以及成体组织器官构成具有重要作用。不同细胞及其发育的不同阶段，其表面的cadherin的种类与数量均有所不同。,重要粘附分子的结构(jig
9、u)与功能,第十七页，共八十四页。,A.结构(jigu)、分类,不同cadherin体内分布和抗原性不同，但分子结构相似，胞外区有5个钙粘素重复序列（CAD），其4个Ca2+结合部位均含有His（组）-Ala（丙）-Val（缬）三肽序列（HAV），胞内区通过连环蛋白与细胞骨架中的肌动蛋白丝相连。目前已发现(fxin)四十多种cadherin，多以所在组织的第一个字母命名：上皮-钙粘素（E-cadherin）；胎盘-钙粘素(P-cadherin)；神经-钙粘素（N-cadherin）等。,第十八页，共八十四页。,Adhesion,NIH3T3,Strong,stableE-cadherin ba
10、sed,Loose,transientN-cadherin based,MDCK,第十九页，共八十四页。,第二十页，共八十四页。,第二十一页，共八十四页。,Motility,第二十二页，共八十四页。,ExtracellularSpace,第二十三页，共八十四页。,B.功能(gngnng),i）表达同种钙粘素的细胞之间的特异性识别对胚胎发育和维持组织结构的完整性和极性具有重要意义。将小鼠E-、N-、P-cadherin的cDNA分别转染到不表达cadherin的细胞中去，然后(rnhu)混合培养，则表达同种cadherin的细胞彼此粘附，而表达不同种cadherin的细胞则不能形成集落。,第二十
11、四页，共八十四页。,ii）胞外区为CAD重复序列，胞内高度(god)保守，通过连接蛋白与细胞骨架成分相连，稳固细胞间的粘附。iii）钙粘素表达异常与肿瘤转移关系密切，钙粘素为肿瘤抑制因子。（多种具有侵袭转移性的上皮细胞癌中E-cadherin表达减少或者有结构异常，基因转染实验也证实钙粘素可限制或者逆转肿瘤的转移行为）,第二十五页，共八十四页。,Steps in Malignant Progression,原位癌,发育(fy)异常/腺瘤,正常(zhngchng)上皮细胞,EMT：上皮间叶转化(zhunhu),第二十六页，共八十四页。,4.Increases in extracellular p
12、roteolytic activity5.Proliferative,1.Complete EMT（Epithelium-to-mesenchyme transitions）A process wherein static epithelial cells:1.Loose cell-cell contacts2.Acquire mesenchymal morphology3.Manifest a migratory phenotype,Functional Definition of EMT,第二十七页，共八十四页。,E-cadherin Loss/Downregulation,Mutatio
13、n-Seen in gastric carcinoma(胃癌(wi i)and lobular breast cancer（小叶乳腺癌）Post-transcriptional down-regulationHakai,p120-dependencyPromoter methylationTranscriptional Repression,第二十八页，共八十四页。,Wnt,BMP,Notch,E-cadherin Transcriptional Repression,Bind E-box,第二十九页，共八十四页。,（2）整合素（integrins）,Integrin 是由和亚基以非共价键结合
14、形成的异二聚体，与配基结合依赖二价阳离子，它们介导细胞与细胞及细胞与ECM之间的粘附(zhn f)反应。一种Integrin可以结合多种配体，而一种配体也可以结合多种Integrin。16种亚基和8种亚基，相互结合组成20多种Integrins。分三个主要的亚族，其中每个亚族为一共同的亚基和一组特定的亚基组成。,第三十页，共八十四页。,1 subgroup,Adhsion of cells with matrixHoming of lymphocyteAdhesion of leukocyte with EC,第三十一页，共八十四页。,2 subgroup,2 gene mutation:Le
15、ukocyte adhesion deficiency syndrome,第三十二页，共八十四页。,3 subgroup,第三十三页，共八十四页。,A.整合素的活化(huhu),生长因子、细胞因子等胞外信号启动的细胞信号转导通路，能激活细胞内酪氨酸蛋白激酶，使整合素胞内区的酪氨酸残基磷酸化，促进其与细胞内骨架蛋白的连接，导致整合素的聚集，从而提高整合素与配体结合的亲和力，增强其粘附(zhn f)力，该过程被称之为整合素的活化。,第三十四页，共八十四页。,B.整合素的各亚族的功能(gngnng),i）1亚族：VLA（very late antigen)亚族：是淋巴细胞受到丝裂原刺激24W后表达的
16、新抗原。主要介导细胞与细胞外基质成分的结合（细胞外基质的受体）；参与细胞间的粘附(zhn f)，介导淋巴细胞的归巢以及白细胞与活化内皮细胞的粘附(zhn f)反应。,第三十五页，共八十四页。,ii）2亚族也称白细胞粘附分子(LEU-CAM),由3种白细胞表面的粘附分子组成：淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)：参与白细胞之间及白细胞与内皮细胞之间的粘附 巨噬细胞分化抗原-1(Mac-1)：主要存在于中性粒细胞和单核细胞，有多种配体。现已发现它除介导白细胞与内皮细胞、上皮细胞粘附外，还与巨噬细胞与大肠杆菌等病原菌的结合有关 糖蛋白150/95(GP150/95)：主要存在于组织中的巨噬细胞膜上，血中的单核细胞和某些激活的淋巴细胞也可表达少GP150/95，GPl50/95可能(knng)还参与细胞毒T细胞与靶细胞的粘附。,第三十六页，共八十四页。,iii）3亚族,又称细胞粘附素，可与纤维蛋白(xin wi dn bi)原、纤连蛋白、血小板反应蛋白和von Willebrand Factor等结合，介导血小板的聚集和血小板与基底膜的粘附，参与血栓形成。血小板GPIIb/IIIa的表达量减
