1、如何根据文献标准做好仿制药质量研究,余立yuliyy8716vip.sina,第一页，共六十八页。,仿制药品,在国际上，仿制药从广义上讲是指专利到期的已上市药，因此又被称为非专利药。在我国，仿制药申请是指对国内已批准上市销售的已有国家标准的原料药与制剂的注册申请。化药6类、中药、天然药物9类、生物制品15类?药品注册管理方法?第七十四条：仿制药应当与被仿制药具有同样的活性成分、给药途径、剂型、规格和相同的治疗作用,第二页，共六十八页。,仿制药品研究,研发基调 比较研究 研发目标 不次于被仿制药 研发根底 被仿药的专利、文献及标准?中国药典?国外药典EP/USP/BP/JP 包括 局颁标准转正标
2、准、地标升国标 进口药注册标准,第三页，共六十八页。,其他参考资料,研发要求-?已有国家标准化学药品研究技术指导原那么?,第四页，共六十八页。,?已有国家标准化学药品研究技术指导原那么?在选择参比制剂时一般遵循以下原那么：如原发厂家生产的制剂已在我国上市，一般首选原研厂产品作为参比制剂；如不能获得，次选研究根底较好、临床应用较为广泛的首仿厂产品作为参比制剂；也可以对不同厂家生产的同品种进行质量比照，优选质量较好、占市场份额较高的产品作为参比制剂。,比较研究的标尺-被仿制药品的选择原那么,第五页，共六十八页。,原研品,认可度高,首仿品,被仿品,注意：可比性-贮存时间大致相同！包装条件相同！真实性
3、 保存好发票、标签、批号或照片,比较研究的标尺问题-被仿制药品的选择原那么,第六页，共六十八页。,研发者困难-有些原研药品不易得到审评者困难-如无对照药品，无法比较杂质谱，无法评价质量是否等同、稳定性是否等同 例外-主成分纯度99%以上，单个杂质0.1%以下，稳定性非常好，6个月加速无降解趋势,比较研究的标尺-使用对照药品的矛与盾,第七页，共六十八页。,药学比较重点：质量与稳定性比照研究比照检验 研究工程原执行标准 考察方法原法定标准,比较研究的范围与方法-考察工程与方法的选择,第八页，共六十八页。,物料不同原料、辅料分析对象 工艺不同试剂、中间体、副产物 设备不同质材、参数精度 不全面没的学
4、复方无有关物质已有标准不完善不应学地标升国标标准 不适用不能学厂送设备,特定杂质,为什么呢？,第九页，共六十八页。,结合产品生产个性应 关注标准隐性变化 借鉴同类最新动态进行纵横向比较,如何在已有文献标准根底上变化拓展,第十页，共六十八页。,分析工艺、处方异同点 重点落在差异处 为什么要不同 不同点对产品的影响 质量标准随之改变,结合产品生产个性,第十一页，共六十八页。,第十二页，共六十八页。,单体,混合物,分子量分布,组分比例,晶型,异构体,结晶水,主成分,多组分生化药的特点,活性成分的比较,第十三页，共六十八页。,第一次飞跃,第二次飞跃,杂质质控理念的变迁,第十四页，共六十八页。,杂质谱的
5、定义,Impurity Profile 杂质谱:A description of the identified and unidentified impurities present in a drug substance.对存在于药品中所有能看出杂质和未知杂质的总的描述。,第十五页，共六十八页。,Click to edit title style,选择最优,物质守恒,杂质归属,比较杂质的数与量，一致或根本一致，物质根底相同与否决定仿制药可否桥接已上市药品的平安有效性结果,杂质谱分析的意义,杂质谱分析,第十六页，共六十八页。,已鉴定杂质Identified Impurity,特定杂质Speci
6、fied Impurity,潜在杂质PotentialImpurity,毒性杂质ToxicImpurity,已确证了结构特征的杂质,在质量标准中规定检查并有自己限度标准的杂质。已鉴定或未鉴定,理论推测在生产或贮藏过程中可能产生的杂质实际产品中不一定存在,具强烈不良生物作用的杂质,第十七页，共六十八页。,新方法,分析方法的有效性氨苄西林钠/舒巴坦钠,原方法,中国抗生素杂志，2022，34：734,在对各国药典方法比较的根底上确定分析方法,第十八页，共六十八页。,强制降解试验评价方法别离能力,粗品强制降解工艺杂质+降解杂质强制降解条件的摸索控制以杂质增长10%20%为最佳答案各峰别离程度的考察比较
7、色谱系统的评价以图谱和数据为根底，针对实验目的，作出相应的结论！,第十九页，共六十八页。,杂质谱的比较方法选择最优,柱串联技术适用于溶解度无明显差异但电荷上有明显差异的难别离物质，通过将一根SCX阳离子交换短柱与一根MG C18长柱串联就可以简单到达将其别离的目的。原理：有电荷差异的被别离物质进入色谱柱串联系统后，带正电荷的物质通常是碱性物质会由于SCX短柱的离子交换作用而被保存在短柱中，而带负电荷的物质通常为酸性物质与中性物质那么会毫无阻碍的通过短柱进入C18长柱中，从而成功别离；然后由于MGC18长柱中疏水性基团间的相互作用而对中性物质有强保存作用，但对带负电荷物质无强保存作用，这样带负电
8、荷物质与中性物质也简单被分开了如果为了让峰形更好，各峰间别离更开，还可在阳离子交换短柱与C18长柱前接一根NH2短柱它可与阴离子发生交换作用，进行三根串联，也可以使带负电荷的酸性物质与中性物质到达更好的别离效果。,第二十页，共六十八页。,杂质谱的比较多种互补,不同色谱系统流动相、色谱柱、波长不同检测器uv、DAD不同原理的方法-别离或检测,第二十一页，共六十八页。,杂质谱的比较,平行列表、图谱叠加、逐峰比较报告新杂质个数、单个最大、总量单一新杂质量0.1%？、0.2%？新杂质总量所占比例,第二十二页，共六十八页。,第二十三页，共六十八页。,杂质峰的归属,平行列表、图谱叠加、逐峰比较杂质来源杂质
9、是什么物料平衡计算与归一,第二十四页，共六十八页。,新杂质的研究 药物杂质的可能来源,第二十五页，共六十八页。,1.原料：红霉素 A、红霉素 B、红霉素 C、红霉素D、红霉素 E、红霉素 F、阿奇霉素B、阿奇霉素C、阿奇霉素E、阿奇霉素F2.中间体：红霉素A肟Z、6，9-亚胺醚、氮红霉素A、红霉素A肟E、红霉素 C肟E、9，11-亚胺醚、红霉素C 6，9-亚胺醚、红霉素A内酰胺 3.副产物：红霉素-N-氧化物、N-去甲基红霉素A、N-去甲基阿奇霉素A、氨基阿奇霉素A、N-甲酰基-N去甲基阿奇霉素A、N-去甲基-N-苯磺酰基阿奇霉素、阿奇霉素N-氧化物、3-去二甲氨基-3,4-去氢阿奇霉素、O-
10、甲苯磺酰基红霉素肟、红霉素Z肟重排物、氮红霉素11，12-硼酸酯、N，N-去二甲基N-甲酰基阿奇霉素A、丙基阿奇霉素、3-N，N-去二甲基氨基-酮基阿奇霉素A、阿奇霉素11，12-硼酸酯4.降解产物：去克拉克定糖阿奇霉素A、去克拉克定糖氮红霉素、红霉素8，9-脱水-6，9-半缩酮、红霉素6，9：9，12-螺缩酮,阿奇霉素中可能存在的杂质：37种,第二十六页，共六十八页。,模拟色谱图,实际色谱图,第二十七页，共六十八页。,结构确证常用的方法,第二十八页，共六十八页。,特定杂质 非特定杂质,有效杂质宽管,毒性杂质严控,杂质限度的制订,未知单个 0.10%,根据生产现状校正因子,新增杂质限度的考虑,
11、第二十九页，共六十八页。,新增杂质限度的考虑,毒性杂质严控：-遵守公认标准-不超越前期标准-以相关平安实验数据为科学依据-日服药剂量推算平安限度,第三十页，共六十八页。,新增杂质限度的考虑,有效杂质宽管：-不能不管-不超越前期标准-以投入产出比等利弊平衡为科学依据,第三十一页，共六十八页。,新增杂质限度的考虑,普通杂质：-不超越前期标准-未知单个一般不得过0.10%、0.2%日服剂量-以平安实验和投入产出比等利弊平衡为科 学依据,第三十二页，共六十八页。,杂质毒性快速评价,斑马鱼毒性快速评价法，对杂质的胚胎毒性、神经毒性，心脏毒性等进行评价。优点：杂质用量少无需知道杂质结构实验周期短34天一个
12、周期,第三十三页，共六十八页。,第三十四页，共六十八页。,药物耳毒性检测利用一种特殊染料对斑马鱼幼体头部耳蜗区神经丘毛细胞的染色，检测毛细胞的存活状态，来判断检测物的耳毒性。以下图中红色圈示耳蜗区域；给药组中红色箭头示给药后毛细胞减少，黄色圈示给药后1神经丘消失。,给药后,系统对照组正常幼体,第三十五页，共六十八页。,隐性变化举例 钠盐的鉴别反响,重金属检查法：pH测定法：不溶性微粒检查法：可见异物检查法：渗透压摩尔浓度：,标准字面未改，实质内容已变,第三十六页，共六十八页。,隐性变化举例 锌盐的鉴别反响,重金属检查法：pH测定法：不溶性微粒检查法：可见异物检查法：渗透压摩尔浓度：,新方法做考
13、察:取样量,辅料干扰,延伸-环境友好,第三十七页，共六十八页。,Page 38,引湿性试验,不溶性微粒,高分子聚合物,HPLC,重金属,溶出度,残留溶剂,含量均匀度,制剂通那么,现行版药典附录修订重点工程提示,第三十八页，共六十八页。,有关溶出度的变化,小杯法正在被淘汰！体外模拟，灵敏度高的测定方法，比色池调整 沉降篮使用与否要求标准写明！检验者判断不一，使用与否差异大，研发决定“可“应“照,第三十九页，共六十八页。,有关含量均匀度的变化,10mg 25mg(小剂量规格)5%25%(主药占总量比例)复方制剂 重装量差异 含量均匀度,第四十页，共六十八页。,参考同类最新动态举例,由于某些药物组成
14、的复杂性，特别是一些生物大分子药物，使用传统的分析方法已经不能满足当前的质控需要，2022年版药典逐渐改用现代分析技术。首次运用毛细管电泳法 注射用抑肽酶：检查两个特定杂质 注射用盐酸头孢吡肟：方法1-毛细管电泳法 N-甲基吡咯烷 方法2-HPLC法羧基柱，电导检测,第四十一页，共六十八页。,抑肽酶SDS-PAGE凝胶电泳图,本品系自牛胰或肺中提取、纯化制得的肽酶抑制剂。采用SDS-PAGE凝胶电泳的方法抑肽酶的有关物质，结果如下图，都只有一个条带。可能是抑肽酶和有关物质的分子量相差不大，使用凝胶电泳不能将其别离,第四十二页，共六十八页。,2022版：品种增加,方法多元化 自填柱和商品玻璃柱：
15、填料常用葡聚糖凝胶G-10Sephadex G 10；短柱子的使用，减少别离时间 商品凝胶柱 TSK-GEL G2000SWXL：头孢地嗪与注射用头孢地嗪,-内酰胺类抗生素的高聚物,第四十三页，共六十八页。,盐酸头孢替安分析方法的比较,Sephadex G-10系统,TSK-Gel G2000swxl系统,0.8ml/min,第四十四页，共六十八页。,头孢羟氨苄高分子杂质分析图谱,Sephadex G-10系统,TSK-Gel G2000swxl系统,0.8ml/min,1-头孢羟氨苄；2-高分子杂质,第四十五页，共六十八页。,纯化水、注射用水和灭菌注射用水的增修订,纯化水、注射用水的修订增订
16、：,电导率,氯化物硫酸盐钙盐二氧化碳,替代,总有机碳测定,易氧化物,可任选一项,药典中新检验技术的应用,第四十六页，共六十八页。,甲氧基苯胺值,含有不饱和脂肪酸的药物在生产和贮藏过程中易被氧化，初级氧化产物一般不稳定，又可进一步生成醛类等化合物，而甲氧基苯胺值也称p-茴香胺值就是ISO推荐的一种对此类降解产物进行评价的手段，欧洲药典附录2.5.36收载了此测定方法。药物的甲氧基苯胺值越高，说明其劣变程度越严重测定原理：甲氧基苯胺与醛反响生成醇胺，醇胺脱水生成的醛亚胺可采用紫外-可见分光光度法在350nm波长处测定。,第四十七页，共六十八页。,2-乙基己酸-内酰胺类抗生素对生产工艺过程中使用2-乙基己酸的原料，增加此项检查，采用气相色谱法测定；方法增订为附录2022年版药典二部附录 L；如:头孢地嗪钠、头孢呋辛钠、头孢孟多酯钠、氨苄西林钠等。,第四十八页，共六十八页。,2-乙基己酸 勘误：-内酰胺类抗生素对生产工艺过程中使用2-乙基己酸的原料，增加此项检查，采用气相色谱法测定；方法增订为附录2022年版药典二部附录 L；如:头孢地嗪钠、头孢呋辛钠、头孢孟多酯钠、氨苄西林钠等。勘误：,第四
