1、GB/T23322-20094.5固相萃取装置。4.6固相萃取柱：Oasis HLB,60mg,3mL,或相当者。使用前依次用2mL甲醇、4mL水活化。4.7有机相过滤膜：0.45m。5分析步骤5.1试样的制备和提纯取代表性试样，剪成约5mm5mm的碎片，混匀。称取1g试样（精确至0.01g),置于索氏提取装置中，加人150L甲醇到接收瓶中，抽提3h,每秒流速12滴。用旋转蒸发器将提取液浓缩至干。准确加入2.0mL甲醇或异丙醇溶解残渣。用0.45m滤膜将样液过滤至小样品瓶中，供仪器分析用。当试样（如蚕丝类）中杂质干扰测试结果时，可采用以下净化方法。用10mL甲醇-水溶液(3.6)溶解上述浓缩瓶
2、中的残渣，全部转移至固相萃取柱(4.6)中，控制流速为1mL/min2mL/min。减压抽干10mi,用5mL甲醇-二氯甲烷溶液(3.7)洗脱，收集洗脱液。将洗脱液用氨气吹干，准确加入2.0mL甲醇或异丙醇溶解残渣。用0.45m滤膜将样液过滤至小样品瓶中，供仪器分析用。注：正相HPC分析时，建议用异丙醇溶解残渣。5.2反相高效液相色谱筛选法由于测试结果取决于所使用的仪器，因此不可能给出色谱分析的普遍参数。采用下列参数已被证明对测试是合适的。5.2.1反相HPLC分析条件a)色谱柱：Cs反相柱，5.0m,4.6mm250mm,或相当者；b)色谱柱温度：35，c)流动相：甲醇-水-乙腈(81十13
3、十6，体积比)：d)荧光检测器激发波长230nm,发射波长296nm:e)流速：1.0mL/min:D进样量：10L。5.2.2反相HPLC测定根据样液中APEO含量，选择浓度相近的标准工作溶液(3.11)。对标准工作溶液和样液等体积穿插进样测定。标准工作溶液和样液中APEO的响应值均应在仪器检测的线性范围内。在上述色谱条件下，APE0的保留时间和液相色谱图参见附录A。当样液的色谱峰保留时间与标准工作溶液一致时，待测物需要用正相HPLC法或LC-MS/MS法进一步分析确证。5.2.3计算按式(1)计算试样中APnEO的含量。X=AXc.XVA.Xm式中：X一试样中OPEO或NPnEO的含量，单
4、位为毫克每千克(mg/kg):A一样液中OPnEO或NPEO的色谱峰面积：c,一标准工作溶液中OPnEO或NPEO的浓度，单位为毫克每升(mg/L);V一样液最终定容体积，单位为毫升(mL):A,一标准工作溶液中OPEO或NPEO的色谱峰面积：1一样液所代表试样的质量，单位为克(g),5.3正相高效液相色谱法由于测试结果取决于所使用的仪器，因此不可能给出色谱分析的普遍参数。采用下列参数已被证明对测试是合适的。2GB/T23322-20095.3.1正相HPLC分析条件a)色谱柱：Agilent氨基柱，5.0m,4.6mmX250mm,或相当者；b)色谱柱温度：30；c)荧光检测器激发波长230
5、nm,发射波长296nm:d)流速：l.0ml/min;c)进样体积：20L:D流动相：流动相A:正己烷-异丙醇(90十10，体积比)，流动相B:异丙醇-水(90十10，体积比)；g)梯度淋洗程序：见表1。表1正相HPLC梯度淋洗程序时间/min流动相A/%流动相B/%010002070303070304040604540605010005510005.3.2正相HPLC测定根据样液中APEO含量，选择浓度相近的标准工作溶液(3.12)。对标准工作溶液和样液等体积穿插进样测定。标准工作溶液和样液中APEO的响应值均应在仪器检测的线性范围内。在上述色谱条件下，APEO的保留时间和液相色谱图参见附
6、录B。5.3.3计算按式(2)、式(3)和式(4)计算试样中APEO的含量。X=X.1195151n（2）X.=A.Xcxv(3）A XmCa=A.X M X c.(A,XM)44（4）式中：X一试样中各聚合度n(n=2一16)的OPnE0或NPnEO含量总和，单位为毫克每千克(mg/kg):X,一试样中聚合度为n的OPEO或NPEO的含量，单位为毫克每千克(mg/kg):A,一样液中聚合度为n的OPEO或NPEO的峰面积：c一标准工作溶液中聚合度为n的OPEO或NPnEO的浓度，单位为毫克每升(mg九)：V一样液最终定容体积，单位为毫升(mL):A一标准工作溶液中聚合度为n的OPEO或NPnEO的峰面积；一样液所代表试样的质量，单位为克(g):M.一聚合度为n的OPnEO或NPnEO的相对分子质量：c,一标准工作溶液中OPEO或NPEO的浓度，单位为毫克每升(mg/L)。5.4液相色谱-串联质谱法由于测试结果取决于所使用的仪器，因此不可能给出色谱分析的普遍参数。采用下列参数已被证明对测试是合适的。3
