1、论著临床研究 ：网络首发 ：（）例先天性大疱性表皮松解症伴皮肤缺损的临床及遗传学分析付郁强，程亚颖，王鑫（华北理工大学研究生学院，河北唐山 ；河北省人民医院儿科，石家庄 ）摘要目的探讨先天性大疱性表皮松解症（）伴先天性皮肤缺损（）的临床特点及基因遗传学特征，为临床诊治提供参考。方法回顾性分析河北省人民医院确诊的例 伴 患儿的临床特点及基因学特征，并结合该病的研究进展进行文献复习。结果例患儿出生即出现大片皮肤破损和水疱，入院后水疱及血疱反复出现，破溃可见糜烂面。其中例患儿行基因检测均发现编码型胶原蛋白的基因（）存在突变。病例存在 （）及 （）复合杂合突变，变异分别来自其父母。病例存在 （）及 （
2、）复合杂合突变，变异分别来自其父母。其中 、突变为首次报道。例患儿均确诊为 伴 。经皮肤黏膜护理、预防感染等治疗后创面缩小、逐渐愈合，患儿均好转出院。结论本文中病例扩大了 伴 患儿的基因变异谱。关键词先天性；大疱性表皮松解症；皮肤缺损；基因；基因检测；突变 中图法分类号 文献标识码 文章编号 （），（.，；.，）（）（），（），（）（），（）（），；先天性大疱性表皮松解症（，）是临床较为少见的遗传性疾病，在美国的总体发病率为每 万活产婴儿 例。该疾病以皮肤脆性增加、轻微摩擦或外伤即可导致皮肤或黏膜水疱、糜烂为临床特点，呈常染色体显性（，）或常染色体隐性（，）遗传。先天性皮肤发育不全（，）又称先
3、天性皮肤缺损（，），是一种界限清楚的非炎性病变，其特点是皮肤及邻近组织的缺损，该病病因及严重程度表现多样，可发生于身重庆医学 年月第 卷第期基金项目：河北省卫生健康委员会医学科学研究课题计划（）。作者简介：付郁强（），在读硕士研究生，主要从事儿童保健及内分泌代谢病研究。通信作者，：。体的任何部位，大多为浅表皮肤的小面积缺损。当前国内对于 伴 的病例报道较少，本文回顾性分析河北省人民医院收治的例 伴 患儿的临床特征及基因变异遗传学特点，现报道如下。临床资料 病例患儿女，生后 ，胎龄 周，第胎第产，其母瘢痕子宫剖宫产娩出，胎盘、羊水、脐带未见异常，评分均 分。出生即发现皮肤剥脱、缺损。其母对磺胺类
4、药物过敏，孕期常规产检。父母体健，否 认 家 族 中 有 相 关 病 史。入 院 查 体：体 温 ，脉搏 次 ，心率 次 ，出生体重（）。左侧面部两处皮肤剥 脱，大 小均约；颈 部 可 见 水 疱，大 小 约 ；左下肢伸侧，以及双侧踝部、足背、部分足底、第一趾指皮肤缺损，菲薄，血管显现，界限清楚，边界不规则，约占全身皮肤面积（图）；余身体部位皮肤表皮松脱，易剥离，舌尖、牙龈处可见两处黏膜缺损，大小均约。住院期间患儿颈面部、手指、下肢皮肤出现新发水疱，后渐破溃结痂。口腔内舌尖、牙龈、上鄂出现溃疡面。血常规、病毒项、生化全项、尿便常规等辅助检查均未见明显异常。基因检测：取得家属知情同意后，抽取患儿
5、及父母外周静脉血，乙二胺四乙酸（）抗凝管保存。将血液标本送至北京迈基诺基因科技有限责任公司行全外显子检测。发现患儿编码型胶原蛋白的基因（）存在 （）杂合突变，为错义突变，突变来源于其父亲（图）；（）杂合突变，为剪接突变，突变来源于其母亲（图）。：患儿右足皮肤缺损；：患儿左下肢皮肤缺损。图患儿入院时双下肢皮肤缺损情况 病例患儿男，生后 ，胎龄 周，第胎第产，顺产娩出，脐带、羊水及胎盘未见异常，评分均 分。生后即发现患儿多处皮肤缺损。母孕期规律产检，父母体健，非近亲结婚，否认家族中有相关病史。入院查体：体温 ，脉搏 次 ，心率 次 ，。右足拇趾、足背、足底、脚踝大片皮肤缺损，菲薄，血管显现，边界清
6、楚，边界处表皮轻拭 可 剥脱；右 手 第 指 间 隙 可 见 约 大小皮肤缺损，双手拇指指甲可见瘀斑，甲床完整。住院期间患儿皮肤受压或摩擦处，以及手指、足趾仍有新的大疱出现，大疱破溃后露出新的糜烂面。辅助检查：血常规、反应蛋白（）、急诊全项、心肌酶、甲状腺功能项、尿便常规、病毒项基本正常。心脏、颅脑超声基本正常。基因检测：患儿 基因存在 （）杂合突变，为无义突变，突变来源于其父亲（图）；（）杂合突变，为错义突变，突变来源于其母亲（图）。红色箭头所示：患儿及其父亲存在 杂合变异，患儿母亲该位点无变异。图患儿及其父母 基因 变异位点测序结果 病例患儿女，生后，胎龄 周，第胎第产，顺产娩出，羊水度污
7、染，脐带、胎盘未见异常，评分 分，、均 分。生后即发现多处皮肤缺损、渗液。母孕期规律产检，父母体健，非近亲结婚，均 否 认家族 中 有 相 关病史。入院 查体：体温 ，脉 搏 次 ，心 率 次 ，。右足母趾、足背、足底、脚踝、小腿、膝关节、大腿伸测可见大片皮肤缺损，菲薄，血管显现，界限清楚，边界不规则，边界处表皮轻拭可剥脱；左足拇趾、示趾、足背、足底、脚踝皮肤缺损，最长约 ，菲薄，界限清楚，边界不规则，边界处表皮部分剥脱；左手拇指可见约 大小皮肤缺损，左手中指指甲可见瘀斑，甲床完整；上牙龈黏膜可见 缺损。住院期间患儿唇部、牙龈黏膜、口腔内黏膜、舌面、头部、四肢及躯干摩擦受压处重庆医学 年月第
8、卷第期均反复出现皮损、水疱及血疱，自然破溃或刺破后剥脱结痂。部分指甲下可见青紫，指甲脱落（图）。辅助 检 查：血 常 规 中 白 细 胞 计 数（），中性粒细胞百分比 ，术前项、病毒项均阴性，生化全项、尿便常规未见明显异常，培养无细菌及真菌生长。家属拒绝基因检测。红色箭头所示：患儿及其母亲存在 杂合变异，患儿父亲该位点无变异。图患儿及其父母 基因 变异位点测序结果红色箭头所示：患儿及其父亲存在 杂合变异，患儿母亲该位点无变异。图患儿及其父母 基因 变异位点测序结果红色箭头所示：患儿及其母亲存在 杂合变异，患儿父亲该位点无变异。图患儿及其父母 基因 变异位点测序结果：患儿右下肢皮肤缺损；：患儿左
9、足及踝部皮肤缺损。图患儿入院时皮肤缺损伴少量渗出：患儿左手皮损及拇指、示指、中指甲下青紫；：患儿右手皮损及拇指、示指指甲下青紫。图患儿经过治疗后手部皮肤缺损干燥脱皮及指甲下青紫重庆医学 年月第 卷第期：患儿右足底 澄清水疱；：患儿左足胫前 水疱；：患儿右下肢皮损逐渐愈合。图住院期间反复新发水疱或血疱：患儿右下肢皮肤缺损；：患儿左下肢皮肤缺损。图患儿出院前皮肤缺损干燥结痂例患儿入院后均根据典型临床表现或基因检测明确诊断为 伴 ，经过补液、营养支持、预防感染、皮肤护理、清洁创面、湿敷换药及促进愈合等治疗，水疱及血疱逐渐干燥结痂，部分脱落，皮损面积较前缩小，边缘可见新生皮肤组织。例均好转出院。讨论例
10、患儿共同临床特点：（）均为足月儿，生产史无特殊。（）起病早，出生即出现大片皮肤破损和大疱，提示皮肤病变在宫内已经发生。水疱及血疱分布以四肢为主，集中分布在双下肢、手腕部，反复出现，特别是在皮肤易摩擦和受压处。（）父母体健，无阳性家 族 史。（）例 基 因 检 测 发 现 突 变 均 位 于 基因的相应位点。的分型及特点 根据靶蛋白和超微结构中皮肤裂隙位置的不同可分为型：单纯型（，）、交界型（，）、营养不良型（，）和 综合征（），每个型别又有多种亚型。种主要类型有以下不同点：（）的裂隙在基底层角质形成细胞内，水疱位于表皮的中层或上层；（）的裂隙发生在透明板内；（）水疱发生在致密板下的真皮上部；（
11、）的裂隙可能发生在基底层角化细胞中，透明板层或致密板下。本文中例患儿出生时即发现四肢、面部存在境界清楚的皮肤缺损，且有口腔黏膜受累，机械损伤后出现皮肤水疱及大疱，愈合后被光滑的羊皮纸样瘢痕组织替代，可以确诊 伴 。病因尚不明确，目前认为多种因素均可造成该病，可能与皮肤血液供应不良、胎儿和胎盘缺血、宫内感染、妊娠早期羊膜破裂 形 成 羊 膜 带、药 物、毒 物、遗 传 及 创 伤 等 有关，常并发于。的发病机制及遗传学分析有研究表明，发病原因是参与皮肤基底膜稳定性的蛋白基因缺陷，包括编码表皮、基底膜区域或真皮上部具有结构功能的蛋白质，对于皮肤的完整性及真皮与表皮之间的粘附非常重要。目前发现至少
12、个致病基因会导致，不同的突变类型所引起的临床表现与预后存在差异，基因突变已被证明会导致 的发生。基因位于 ，全长 ，包含 个外显子。编码的型胶原蛋白分子结构上是由个相同的（）链构成的同源三聚体。每条 多肽链包含中心胶原三螺旋结构域（相对分子质量 ），两侧为非胶原性氨基末端结构域（相对分子质量 ）和羧基末端结构域（相对分子质量 ），三螺旋结构域由 重复序列构成。该多肽链主要由表皮的角质形成细胞合成，但也可由真皮成纤维细胞合成，在合成完 整 的 多 肽 后，个 多 肽 通 过 羧 基 末 端（结构域）结合成三聚体分子，它们的胶原结构域折叠成三螺旋构象，其中两个型胶原分子排列成个反向平行二聚体，并且
13、在除去部分羧基末端（）后，通过分子间二硫键形成稳定的二聚体，随后这些二聚体横向聚集形成锚定原纤维。通过同源性与致 密 层 的 蛋 白 质 结 合，稳 定 该 层 与 真 皮 的 联系，。基因突变使得型胶原蛋白合成受到影响，无法组装成有功能的锚原纤维导致 发生。据报道，中有 多种致病变异位点。根据遗传方式可分为常染色体隐性营养不良重庆医学 年月第 卷第期型大 疱性表皮松 解 症（，）和常染色体显性营养不良型大疱性表皮松解症（，）。和 的致病基因均为 ，但 的症状更重，预后更差并缺乏有效的治疗，部分亚型与形成致残性瘢痕和侵袭性鳞状细胞癌有关，对患儿预后有较大影响。中国 患者的表型相对较轻，严重 约
14、占所有 患者的 。病例患儿在 上检测到 及 （）复合杂合突变。前者为错义突变，会导致外显子 中第 号核苷酸由鸟嘌呤变异为腺嘌呤，使第 号氨基酸由甘氨酸变异为天冬氨酸，为三螺旋结构域甘氨酸替代。甘氨酸是最小的氨基酸分子，当发生甘氨酸替代时，大分子氨基酸可能干扰型胶原蛋白三螺旋功能域的形成，妨碍多肽的正确折叠、聚合、分泌。隐性遗传时在杂合子状态下，这些替代通常不表现出临床表型，但当与另一种突变（无义、剪接位点、插入或缺失突变）结合时可表现出不同程度的 。后者为剪接突变，位于 结构域。结构域介导锚定纤维附着到上方基底膜和下方真皮，突变可能导致该基因功能丧失。在人类基因突变数据库（）、数据库均未见此两
15、个位点的相关报道。病例患儿 上检测到 及 复 合 杂 合 突 变。在 外 显 子 中 的突变，使得谷氨酸密码子（）被改为停止密码子（），氨基酸发生无义突变，从而使多肽过早终止，转录物水平明显降低，无法组装成功能性锚定纤维。外显子 位于 结构域的中间，结构域包含参与形成二硫键的保守半胱氨酸，这 使 得型 胶 原 蛋 白 同 源 三 聚 体 之 间 能 够 连接。该变 异位于编码 区最 后，已 有 该 位 点 的病例报道，研究表明靠近 端的提前终止密码子（）并不能完全消除型胶原蛋白的，可能会产生一些功能性锚定纤维而使得患儿临床表现相对较轻 。后者为错义突变，导致外显子 中 号核苷酸由鸟嘌呤变为胸腺
16、嘧啶，导致第 号氨基酸由甘氨酸变为缬氨酸，亦为三螺旋结构域中甘氨酸替代，、数据库未见此位点的相关报道。本文中新发现的个突变位点有助于扩大 中 突变的数据库。的诊断 的诊断除了典型临床表现，还需结合皮肤免疫组织化学（）、免疫荧光图谱（）、透射电子显微镜（）及基因检测等方法。尽管 对于诊断 有很大帮助，但此项检查需要专业的检查设备和人员，不宜得到推广，逐渐被 替代。在理想情况下，应同时进行基因检测和，以便获得 在 和蛋白质水平上完整的分子表征 。的治疗 的治疗在婴儿期主要是加强护理，防止机械性损伤和感染，增强营养促进创面愈合。后期部分患儿因反复多次溃疡、糜烂或因患表型严重的 亚型，导致关节挛缩、手足畸形、食管挛缩、气道损伤、幽门闭锁等，甚至发生鳞状细胞癌，则需 要及时手术治疗。目前对 暂无特别有效的治疗方法，一些临床前或临床试验的进展为 患者带来了希望，如基因疗法（基因替代、基因编辑、基于 的疗法、天然基因疗法）、基于细胞的疗法（成纤维细胞、骨髓移植、间充质基质细胞、诱导多能干细胞）、重组蛋白疗法及应用药物选择性诱导核糖体读取无义突变的密码子等方法。的预防目前 缺少特效的治疗手段，早期患儿
