1、GB/T5009.22-2003E=4484681nns(1)c式中:E一重铬酸钾溶液的摩尔消光系数;A一测得重铬酸钾溶液的吸光度;c一重铬酸钾溶液的摩尔浓度。再以此平均值与重铬酸钾的摩尔消光系数值3160比较,即求出使用仪器的校正因素,按式(2)进行计算。f=3160E式中:F一使用仪器的校正因素:E一测得的重铬酸抑摩尔消光系数平均值。若f大于0.95或小于1.05,则使用仪器的校正因素可路而不计。3.14.2黄曲霉毒素B,标准溶液的制备:准确称取1mg1.2mg黄曲毒毒素B标准品,先加入2mL乙腈溶解后,再用苯稀释至100mL,避光,置于4冰箱保存。该标准溶液约为10g/mL。用紫外分光光
2、度计测此标准溶液的最大吸收峰的波长及该波长的吸光度值。结果计算:黄曲露毒素B标准溶液的浓度按式(3)进行计算。X=AX MX1000 x f44440n4n940nnn944an(3)E2式中:X一黄曲霉毒素B标准溶液的浓度,单位为微克每毫升(g/L):A一测得的吸光度值:f一使用仪器的校正因素:M一黄曲霉毒素B,的分子量312:E一黄曲霉毒素B,在苯-乙腈混合液中的摩尔消光系数19800。根据计算,用苯-乙睛混合液调到标准溶液浓度恰为10.0业g/L,并用分光光度计核对其浓度。3.14.3纯度的测定:取5L10g/mL黄曲霉毒素B标准溶液,滴加于涂层厚度0.25mm的硅胶G薄层板上,用甲醇-
3、三氯甲烷(4十96)与丙围-三氯甲烷(8十92)展开剂展开,在紫外光灯下观察荧光的产生,应符合以下条件:3.14.3.1在展开后,只有单一的荧光点,无其他杂质荧光点,3.14.3.2原点上没有任何残留的荧光物质。3.15黄曲霉毒素B,标准使用液:准确吸取1mL标准溶液(10g/mL)于10mL容量瓶中,加苯-乙腈混合液至刻度,混匀。此溶液每毫升相当于1.0g黄曲霉毒素B,。吸取1,0mL此稀释液,置于5mL容量瓶中,加苯-乙腈混合液稀释至刻度,此溶液每毫升相当于0.2g黄曲霉毒素B。再吸取黄曲霉毒素B标准溶液(0.2g/mL)1.0mL置于5mL容量瓶中,加苯-乙晴混合液稀释至刻度。此溶液每毫升相当于0.04g黄曲霉毒素B,3.16次氯酸钠溶液(消毒用):取100g漂白粉,加入500mL水,搅拌均匀。另将80g工业用碳酸钠(Na,CO:10H,O)溶于500mL温水中,再将两液混合、搅并,澄清后过滤。此滤液含次氯酸浓度约为25g/L。若用漂粉精制备,则碳酸钠的量可以加倍。所得溶液的浓度约为50gL。污染的玻璃仪器用10gL次氯酸钠溶液浸泡半天或用50g/L次氯酸钠溶液浸泡片刻后,即可达到去毒效果。4仪器4.1小型粉碎机。2