1、GB/T5009.84-2003食品中硫胺素（维生素B,)的测定1范围本标准规定了各类食品中疏胺素的测定方法。本标准适用于各类食品中硫胺素的测定。本方法检出限为0.05g,线性范围为0.2g10g。2原理硫胺素在碱性铁氰化钾溶液中被氧化成噻嘧色素，在紫外线照射下，噻嘧色素发出荧光。在给定的条件下，以及没有其他荧光物质干扰时，此荧光之强度与噻嘧色素量成正比，即与溶液中硫胺素量成正比。如试样中含杂质过多，应经过离子交换剂处理，使硫胺素与杂质分离，然后以所得溶液作测定。3试剂3.1正丁醇：需经重蒸馏后使用。3.2无水硫酸钠。3.3淀粉酶和蛋白酶。3.40.1mol/L盐酸：8.5mL浓盐酸（相对密度
2、1.19或1.20）用水稀释至1000mL.3.503mol/L盐酸：25.5mL浓盐酸用水稀释至1000mL。3.62mol/L乙酸钠溶液：164g无水乙酸钠溶于水中稀释至1000mL,3.7氯化钾溶液(250g/L):250g氯化钾溶于水中稀释至1000mL。3.8酸性氯化钾溶液(250g/L):8.5mL浓盐酸用25%氯化钾溶液稀释至1000mL。3.9氢氧化钠溶液(150gL):15g氢氧化钠溶于水中稀释至100mL,3.101%铁氰化钾溶液(10g/L):1g侠氰化钾溶于水中稀释至100mL,放于棕色瓶内保存。3.11做性铁化钾溶液：取4mL10g/L铁氙化钾溶液，用150g/L氢氧
3、化钠溶液稀释至60mL。用时现配，避光使用。3.12乙酸溶液：30mL冰乙酸用水稀释至1000mL。3.13活性人造浮石：称取200g40目60目的人造浮石，以10倍于其容积的热乙酸溶液(3.12)搅洗2次，每次10min:再用5倍于其容积的250g/L热氣化钾溶液(3.7)搅洗15min:然后再用稀乙酸溶液(3.12)搅洗10mi:最后用热蒸馏水洗至没有氯离子。于蒸馏水中保存。3.14硫胺素标准储备液(0.1mg/mL):准确称取100mg经氯化钙干燥24h的硫胶素，溶于0.01mol/L盐酸中，并稀释至1000mL。于冰箱中避光保存。3.15硫胶素标准中间液(10g/mL):将硫胺素标准储备液用0.01mol/L盐酸稀释10倍，于冰箱中避光保存。3.16硫胶素标准使用液(0.1g/mL):将硫胶素标准中间液用水稀释100倍，用时现配。3.17溴甲酚绿溶液(0.4gL):称取0.1g溴甲酚绿，置于小研钵中，加入1.4mL0.1mol/L氢氧化钠溶液研磨片刻，再加入少许水继续研磨至完全溶解，用水稀释至250L。4仪器4.1电热恒温培养箱。4.2荧光分光光度计。4.3 Maizel-Gerson反应瓶：如图1所示。
