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实验动物 近交系小鼠、大鼠免疫标记检测法 GBT 14927.2-2008.pdf

上传人:g****t 文档编号:2474452 上传时间:2023-06-25 格式:PDF 页数:9 大小:1.37MB
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资源描述

1、GB/T14927.2-2008体重注射0.1mL。因不同品系动物对麻醉剂敏感性不同,注射量可适当增减(手术时室温应控制在25C28C之间).2.2.2.5待动物麻醉失去知觉后,将其背部朝上放在固定板上,固定动物,剪去被毛,并用3%碘酒棉球和75%酒精棉球消毒。2.2.2.6在背部剪下直径5mm10mm的皮肤左右各一块(其中一块用做自体移植,另一块用做异体移植)。2.2.2.7将剪好的皮片翻转过来放入带少量生理盐水的双碟(直径为6m)中,用眼科剪刀,轻轻地切去皮下组织至直皮,然后放在无菌生理盐水中冲洗一下。2.2.2.8两只动物的皮片,除左侧皮片做自体移植外,右侧皮片循环交换,逆毛方向移植并使

2、之吻合。2.2.2.9覆盖涂过凡士林和青霉素G钠的纱布块,3层4层,用1m宽橡皮膏固定,松紧适度。2.2.2.10手术结束待动物苏醒后,把动物放入鼠盒内,并挂上标记卡片,10d后拆除包扎。2.2.3结果观察2.2.3.1拆包后,发现皮片干瘪、脱落则为技术失败。如皮片脱痂,手术部位平整、一周后有新毛长出则为手术成功。对照自体移植,技术失败率不得大于10%。2.2.3.2如果皮片在2周3周内脱落,则为急性排斥。遗传污染通常引起急性排斥。2.2.3.3如果皮片在3周脱落,则为慢性排斥。移植物有否慢性排斥至少观察100d,遗传突变通常引起慢性排斥。2.2.3.4如果对结果怀疑,则要进行重新移植,可以使

3、用一批新的动物,也可以使用已做过移植但对结果产生怀疑的动物。如果是后者,则排斥更迅速、更典型。2.3尾部皮肤移植法2.3.1设备和材料2.3.1.111号手术刀柄。2.3.1.211号手术尖刀片。2.3.1.3玻璃套管(直径8mm,大鼠可适当大些)。2.3.1.4其他材料见2.2.1。2.3.2操作步骤2.3.2.1随机取同性别4周龄一8周龄的动物10只,动物可来自于基础群、血缘扩大群或生产群。2.3.2.2每只动物分别编号并称取体重,详细记录品系名称、性别、出生年月日、谱系及其他特征。2.3.2.3用无菌生理盐水配制0.7%戊巴比妥钠溶液。2.3.2.4采用腹腔注射麻醉0.7%戊巴比妥钠溶液

4、动物,小鼠每10g体重注射0.1mL,大鼠每20g体重注射0.1mL。因不同品系动物对麻醉剂敏感性不同,注射量可适当增减(手术时室温应控制在25C28C之间).2.3.2.5待动物麻醉失去知觉后,将5只一组按顺序采取仰卧式放在一块滤纸上,并用3%碘酒棉球和75%酒精棉球消毒鼠尾。2.3.2.6用左手食指按住动物尼根,左手拇指按住尾尖,固定鼠尾并使其微微伸展,然后右手持解剖刀,刃面朝上,与尾部皮肤成2030夹角,在尾静脉上部或两条尾静脉之间,在离尾部5mm处削下一片宽约2mm3mm,长约7mm8mm的皮肤,其厚度前者以没有严重出血,后者能足以暴露出白色的肌腱但又不割伤血管为宜。2.3.2.7右手将刀片逆时针方向交给左手,附着在刀片上的皮片相应转180,将皮片用眼科极子取下贴在原创面上,并尽量使其吻合,用一小片滤纸覆盖,再轻轻按压一下,然后取掉滤纸片,该移植作为自体移植对照。2.3.2.8按照2.3.2.6和2.3.2.7步骤,完成另4只动物的自体移植对照。2.3.2.9按照2.3.2.6和2.3.2.7步骤,参照皮肤移植相互循环系统图示,进行循环皮肤移植。亦即2

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