1、新药(xn yo)药代动力学研究,北京大学(bi jn d xu)医学部 基础医学院 药理系 楼 雅 卿,第一页，共四十八页。,新药(xn yo)药代动力学研究,药理学(Pharmacology)药效学(Pharmacodynamics)(药理作用、作用机制和毒、副作用)药代动力学(Pharmacokinetics)(药物(yow)吸收、分布、代谢和排泄,ADME).,第二页，共四十八页。,新药(xn yo)药代动力学研究,非血管途径给药-吸收过程|血管给药-进入血液循环-分布和消除|(代谢(dixi),排泄)进入药物作用部位及其他组织|临床药理效应或毒性反应,第三页，共四十八页。,新药研究(
2、ynji)、开发及上市的药代动力学研究(ynji),1.非临床(动物)的药代研究:*先导(xindo)化合物药代研究.(筛选)*入选化合物的药代研究.2.临床药代动力学研究*I期临床药代动力学研究.(以正常受试者 为试验对象)*II、III及IV临床药代动力学研究(包括特殊 人群、病人为试验对象),第四页，共四十八页。,新药(xn yo)药代动力学研究,1.化学药物临床前药代动力学研究技术指导 原则(试行).2.速释、缓释、控释制剂临床前药代动力学研究指导原则(试行).3.新生物制品临床前药代动力学技术指导原则(试行).4.化学药物临床药代动力学研究技术指导原则(试行).5.化学药物制剂人体(
3、rnt)生物利用度和生物等效性研究技术指导原则(试行).6.新生物制品临床药代动力学研究指导原则(试行).,第五页，共四十八页。,新药早期(先导(xindo)化物)研究:,1.有效性：选择作用。2.安全性:*肝毒性。*三致试验。*Q-Tc不利影响-心脏毒性。3.药代研究:*吸收试验-Coca-2细胞(xbo)通透性试验或整体动物试验。*P-糖蛋白转运-药物吸收、分布和排泄相关。*药物代谢:,第六页，共四十八页。,新药(xn yo)早期药代研究,1.采用肝微粒体、肝细胞或肝灌流法研究药物代谢途径(tjng)和药酶.2.P450酶系统及及亚型分析.3.整体动物试验.4.计算机模拟代谢物分析.,第七
4、页，共四十八页。,临床前（动物(dngw)）药代动力学研究,目的：探讨新药在动物体内的规律和特点。2为新药研制和开发前景(qinjng)提供信息。3为临床试验设计提供依据。,第八页，共四十八页。,进行(jnxng)临床前药代动力学的基本要求,1.试验目的明确.2.分析方法可靠.3.试验设计合理.4.试验数据科学、全面、能满足新药(xn yo)评价要求.5.实事求是总结分析试验结果,作出客观 的评价.,第九页，共四十八页。,建立分析方法。血药浓度经时变化:*单剂量给药试验。*多剂量给药试验等。药物吸收。蛋白结合率:求结合型/非结合型药物比值(bzh)。组织分布。排泄试验:药物从尿、粪便和胆汁排泄
5、。,研究(ynji)内容:,第十页，共四十八页。,7.药物生物转化（代谢）:*代谢部位。*代谢方式(途径)。*药物代谢酶。*代谢产物。8.细胞色素P450酶(CYP)抑制和诱导作用(zuyng)。9.可能发生的药物相互作用。,研究(ynji)内容:,第十一页，共四十八页。,药品注册(zhc)中临床前药代研究的技术要求:,常用(chn yn)的药物含量分析方法1.色谱法:1)高压液相色谱法(HPLC)HPLC-UV HPLC-F HPLC-ECD HPLC-MSn(LC-MSn)2)气相色谱法(GC)GC-FID GC-NPD GC-ECD GC-MS,第十二页，共四十八页。,2.免疫法:放射免
6、疫法(RIA)酶免疫法(EMIT,ELISA等)萤光免疫法(FIA)萤光偏振(pin zhn)免疫法(FPIA)3.生物测定法:*微生物测定法*靶酶或靶细胞测定法4.放射性同位素示踪法:3H-,14C-,125I-,131I-5.稳定同位素示踪法:2H-,13C-,15N-,18O-等。,常用的药物(yow)含量分析方法,第十三页，共四十八页。,分析(fnx)方法学研究的考察,1.特异性:证明测定的物质为原形药物或其活性代谢,能排 除内源性及其他外源性物质的干扰。2.灵敏度:用最低检测浓度(LLOQ)表示。通常(tngchng)为标准曲线的最小浓度,要求能测出3-5个消除t1/2或Cmax 的
7、1/10或1/20的血药浓度。3.标准曲线制备:至少包括5个药物浓度点,应能覆盖生物样品的浓度范围,不得外推。提供标准曲线性方程式和相关系数(r 0.99)。测定不同生物样品时应提供不同生物样品的药物标淮曲线。,第十四页，共四十八页。,4.精确度:方法回收率表示。选择高、中、低三个浓度。回收率在80-120%范围内。5.精密度:用相对标准误差(RSD)表示。选择高、中、低三个浓度,求日内和日间(rjin)精密度,应10-20%。6.样品稳定性。7.质控。,对分析(fnx)方法学研究考察,第十五页，共四十八页。,试验(shyn)药品,1.药品的正式名称.2.药品的纯度、批号(p ho)和来源.3
8、.保存条件.4.试验用药品的配制方法,应和药效学及毒理学试验一致.,第十六页，共四十八页。,试验动物(dngw)选择,*两种动物:小鼠、大鼠或兔,beagle犬或猴等。*口服药物试验不选用家兔。*选用动物应与药效及毒理试验一致。*最好选用一种能多次采取血样,制成药-时曲线的动物.*试验动物数,每个时间点不少于5个数据(shj),雌雄各半.*生物制品试验应选能产生相应活性动物或与人源蛋白同源性高的动物,如猴,相应转基因动物等。,第十七页，共四十八页。,血药浓度经时变化试验(shyn)目的和内容,目的:探讨药物吸收,分布和消除(xioch)的动力学规律和特点。,试验内容:*单剂量给药。*多剂量给药
9、。*口服药物的绝对生物利用度。*进食(jnsh)对口服药物吸收的影响。*性别因素的影响。,第十八页，共四十八页。,剂量的确定(qudng)和给药途径,1.高、中、低三种(sn zhn)剂量:*主要参考动物药效学和毒理试验剂量(ED50,TD50,LD50,慢毒剂量),*选择其有效剂量范围内,高、中、低三个剂量,高剂量不能 最大耐受量(MTD)。2.给药途径应与药效学、毒理学及以后临床给药途径一致。,第十九页，共四十八页。,1.采样点应能反映药物吸收、平衡/分布和消除三个时相的动力学规律。2.吸收相至少2个采血点.3.平衡相至少3个点.4.消除相为4-6个点.应能反映35个消除半衰 期或1/10
10、或1/20的Cmax。5.求得一条(y tio)完整的药 时曲线。,第二十页，共四十八页。,图1.大耳白家兔单次静脉注射三种剂量(jling)（10mgkg-1，20mgkg-1，30mgkg-1）A1998脂肪乳后平均药-时曲线比较。,第二十一页，共四十八页。,药代参数(cnsh)的估算,*国内多选用3P97软件或其他公认的药代动力学程序软件来估算药代动力学参数。*可采用房室模型或非房室模型程序。*主要药代动力学参数有：血管给药:提供(tgng)t1/2,Vd,CL和AUC等参数。血管外给药:除上述参数外,尚应提供MRT,Cmax,Tmax,和F值。,第二十二页，共四十八页。,家兔静注三种(
11、sn zhn)剂量A1998后的药代动力学参数(n=5),参数(cnsh)10 20 30(mg)T1/2(h)0.360.06 2.670.58 2.362.87 V(c)(L/kg)4.400.57 6.111.36 5.392.40 AUC(ugml/h)1.130.24 4.460.96 6.141.19 CL(mgml.h-1)11.02.56 5.170.82 5.582.79,第二十三页，共四十八页。,提供(tgng)资料,1.各组(各个)的药-时数据和曲线图及其平均值.2.各组(各个)的药代参数及其平均值.3.试验结果分析(fnx)和讨论:*吸收的规律和特点.*血药浓度和剂量相
12、关性.*药物消除动力学的特点.*药物体内分布特点.,第二十四页，共四十八页。,多次给药试验(shyn),药品在临床需长期给药及呈蓄积倾向时,应进行多次给药试验(shyn).1.选用一种有效剂量.2.确定给药间隔时间和给药次数.3.测定3次Cmin,求稳态药-时数据和曲线.4.求算t1/2,AUCss,Cmin,Cav和DF值等.5.比较单、多次给药试验结果:药代规律的差别和蓄积性.,第二十五页，共四十八页。,单剂量(jling)和多剂量(jling)口服加替沙星的药代参数,药代参数(cnsh)单剂量 多剂量(10d)_ Cmax(mg.L-1)3.390.56 3.510.93 Cmin(mg
13、.L-1)0.230.10 0.290.16 Tmax(h)0.90.29 1.150.41 AUC(mg.h.L-1)20.264.24*26.164.53 t1/2(h)7.251.50 7.690.81 Vd(L)102.2732.12 97.2419.23 CL(L.h-1)19.144.24*16.722.93_,第二十六页，共四十八页。,血管外给药的药物吸收(xshu)试验,1.体外Coca-2细胞模型试验.2.在体肠道试验.3.整体生物利用度试验:*绝对(judu)生物利用度试验.*相对生物利用度试验.,第二十七页，共四十八页。,药物的组织(zzh)分布,目的：探讨药物在组织分布
14、(fnb)规律,亲和力及与药效和毒性的相关性。,通常选用大鼠或小鼠。一种有效剂量。13种组织,根据药品特点相应增加。(肺,脾,肝,心,肾,脑,肌,平滑肌,脂肪(zhfng),生殖器,骨髓等)至少三个采样时间点,反映其动力学规律。,第二十八页，共四十八页。,组织(zzh)分布,5.除提供试验数据外,应分析组织/血中药物浓度的比值(bzh)。6.特别注意药物浓度高、蓄积时间长及在靶器官的组织分布.7.采用同位素示踪法时,尽可能提供给药后不同时相的整体放射自显影图像.,第二十九页，共四十八页。,药物的血浆蛋白(dnbi)结合率试验,采用透析法,超滤法等。高,中,低三种药物浓度,应接近体内浓度。两种动
15、物(dngw)和人血浆。,A1998的蛋白(dnbi)结合率 浓度(ug/ml)大鼠 人 6 66.049.8 97.541.78 8 75.832.8 93.158.32 10 77.943.73 97.931.94,第三十页，共四十八页。,药物(yow)排泄试验,目的：探讨药物排泄(pixi)途径,排泄总量,排泄高峰,排泄终点的规律和特点。,大鼠,一种有效剂量内容:粪便,尿和胆汁排泄试验主要排泄途径、排泄速率和排泄量(至药物排泄结束为止)。注意原形药排泄累积总量占剂量的百分比,物料平衡问题(wnt)。是否存在肝肠循环,胃肠循环等现象。,第三十一页，共四十八页。,药物(yow)生物转化(代谢
16、),如原形药在体内生成大量具有药理(yol)活性代谢物,并其排泄总量 50%时,则应进行初步药物代谢试验,代谢部位。代谢途径和药物代谢酶。主要代谢物M1,M2,M3.等。如为前药,要确定主要代谢物的化学结构(jigu),代谢物合成,药理活性和PK试验。,第三十二页，共四十八页。,药酶诱导(yudo)和抑制作用,测定药物对肝微粒(wil)中P450总量的影响.肝微粒体酶促动力学试验(应用巳知被CYP1A2,2C9,2C19,2D6和 3A4等药酶催化的药物进行试验)或药酶抗体反应试验,研究:*药物代谢酶。*药酶诱导作用。*药物抑制作用。,第三十三页，共四十八页。,CYP 典型底物(d w)Km IC50 Ki1A2 非那西丁 54 1000 519.22A6 双香豆素 0.34 1000 253.7 2C9 甲苯磺丁脲 120 532 290.22C19 S-美芬妥英 36.1 1000 419.32D6 异喹胍 57.5*53.3*39.9*2E1 氯唑沙宗 30.4 146 55.23A4 红霉素 55.8*56.5*39.1*,药酶诱导(yudo)作用和抑制作用,第三十四页，共四十
