1、医学(yxu)微生物学实验,微生物学(wi shn w xu)教研室 2011年4月,第一页，共二十九页。,实验(shyn)内容,一、细菌分布实验(shyn)空气中细菌的检查（操作）皮肤、日常物品细菌的检查（操作）二、细菌分离接种技术（操作）平板划线接种法；斜面培养基接种法 液体培养基接种法；半固体穿刺接种法三、细菌在培养基上生长现象（示教）,第二页，共二十九页。,目的(md)要求,认识细菌在外界的分布规律掌握(zhngw)细菌分离培养基本技术认识细菌在不同培养基中的生长现象,第三页，共二十九页。,一、细菌的分布(fnb)实验,（1）空气细菌检查 材料：培养基，普通琼脂平皿（2）皮肤（其他物品
2、(wpn)）消毒前后的细菌检查 材料：培养基，无菌生理盐水，75%酒精棉球，2.5%碘酒棉球，无菌棉棒（3）自来水中的细菌检查 材料：培养基，无菌棉棒，酒精灯,第四页，共二十九页。,1.空气中细菌(xjn)的检查(操作,4块/室),取三块琼脂(qingzh)平板，将2个打开皿盖分别置于不同的环境1530min后，盖好皿盖。另外1个不启盖作为对照。置37培养1824h。,材料(cilio)：,普通琼脂平板,方法：,结果：,计数菌落数，观察菌落数的差异。,第五页，共二十九页。,2、皮肤（其他物品）消毒前后的细菌检查(jinch)方法,在1个平皿底部做好标记，分为消毒前与消毒后两个区域。取一支无菌棉
3、签放入无菌盐水中浸泡，在管壁上挤干水后擦拭皮肤或其他物品，然后将该棉签涂布于无菌平皿消毒前区域，作来回划线，注意勿划破琼脂表面。将皮肤区域或物品用碘酒(din ji)棉球及酒精棉球涂擦消毒，另取一支无菌棉棒用消毒前所述方法取材，接种于标有消毒后的平皿区域。平皿37、24h培养后取出观察表面有无细菌生长，比较消毒前后菌落数目，描述菌落特征。,第六页，共二十九页。,结果(ji gu)：,计数(j sh)菌落数,371824h,消毒(xio d)前,消毒后,第七页，共二十九页。,自来水中的细菌(xjn)检查,在1个平皿底部做好标记。用酒精灯对水管口灭菌，拧开水管开关放水15S。取一支无菌棉签蘸取自来
4、水，将该棉签涂布于标有消毒前的无菌琼脂平皿表面，作来回划线，注意勿划破琼脂表面。将平皿于37、24h培养后取出观察平皿表面有无细菌生长(shngzhng)，描述菌落特征。,第八页，共二十九页。,1.半固體培養基接種法（操作(cozu)）2.斜面培養基接種法3.液體培養基接種法,細菌的接種法,（一）分離培養,1.平板(pngbn)分離劃線接種法（操作）,（二）純培養,第九页，共二十九页。,接种(jizhng)环（上）和接种(jizhng)针（下）,无菌操作(cozu),第十页，共二十九页。,无菌操作(cozu),Aseptic area10-20cm,外焰(wi yn),焰芯,内焰(ni yn)
5、,第十一页，共二十九页。,菌液采取(ciq)法,第十二页，共二十九页。,（一）平板划线(hu xin)接种法（分离培养法）,连续划线(hu xin)法 分段划线(hu xin)法,第十三页，共二十九页。,Rotate 90,Flame loop,Rotate 90,Flame loop,（一）平板划线接种(jizhng)法（分离培养法）,第十四页，共二十九页。,培养(piyng)结果,1,3,2,注意事项：,1.区之间接种(jizhng)要灭菌,2.用力适当(shdng)，不要划破 琼脂表面,3.注意无菌操作,第十五页，共二十九页。,（二）液体(yt)培养基接种法,第十六页，共二十九页。,（二
6、）液体(yt)培养基接种法,第十七页，共二十九页。,（三）半固体穿刺(chunc)接种法,用途：观察细菌(xjn)动力，保存菌种。,第十八页，共二十九页。,斜面培养基接种(jizhng)法（操作）,用途：常用(chn yn)于扩大纯种细菌及实验室保存菌种。,第十九页，共二十九页。,斜面(ximin)培养基接种法,第二十页，共二十九页。,液体(yt)培养基接种法,第二十一页，共二十九页。,半固体培养基接种(jizhng)法（操作）,方法(fngf)：穿刺接种,结果(ji gu)：沿穿刺线生长动力-扩散生长动力+,第二十二页，共二十九页。,三、细菌(xjn)在培养基上生长现象（示教）,沉淀(chn
7、din)成链生长浑浊均匀分散生长菌膜表面生长（需氧菌）,1.固体(gt),2.半固体,3.液体,菌落 菌苔,动力+动力-,第二十三页，共二十九页。,固体(gt)培养基生长现象,第二十四页，共二十九页。,液体(yt)培养基中生长现象,沉淀(chndin)生长,混浊(hnzhu)生长,表面生长,第二十五页，共二十九页。,半固体培养基中生长(shngzhng)现象,有鞭毛(binmo)动力+,无鞭毛(binmo)动力,沿刺线生长,混浊生长,第二十六页，共二十九页。,细菌(xjn)在培养基上生长现象,第二十七页，共二十九页。,实验报告,记录细菌分布实验实验结果记录细菌在各种培养基上的生长(shngzhng)现象,第二十八页，共二十九页。,内容(nirng)总结,医学微生物学实验。（2）皮肤（其他物品）消毒前后的细菌检查。材料：培养基，无菌棉棒，酒精灯。盖好皿盖。计数菌落数，观察菌落数的差异。在1个平皿底部做好标记，分为消毒前与消毒后两个区域。将皮肤区域或物品用碘酒棉球及酒精棉球涂擦消毒，另取一支无菌棉棒用消毒前所述方法取材(qci)，接种于标有消毒后的平皿区域。平皿37、24h培养后取出观察表面有无细菌生长，比较消毒前后菌落数目，描述菌落特征。接种环（上）和接种针（下）,第二十九页，共二十九页。,
