1、第五章 血型(xuxng)与输血学检验,第一页,共七十页。,第五章 血型(xuxng)与输血学检验,KEY POINTS,1.The introduction about blood group,blood group antibodies and the clinical valuation of different blood cell markers.2.The measurement of ABO antigen/antibody,Rh antigen/antibody,irregular antibody and HLA antigen,the testing of blood ce
2、ll and serum markers under different clinical conditions.3.Reasonable transfusion and blood component therapy is the sign of modern transfusion,the traditional and non-traditional clinical application of different blood components.4.The testing of blood cell and serum markers before and after stem c
3、ell transplantation.5.The technology and application about autologous transfusion,therapeutic hematopheresis and therapeutic blood components exchange,the testing needed to prevent adverse effects of blood transfusion before transfusion.,第二页,共七十页。,第五章 血型(xuxng)与输血学检验,血型、血型抗原(kngyun)与抗体第一节 红细胞血型第二节 红
4、细胞血型检测技术第三节 白细胞血型第四节 血小板血型第五节 新生儿溶血病第六节 临床输血第七节 发展趋势,主 要 内 容,第三页,共七十页。,第五章 血型(xuxng)与输血学检验,血型(xuxng)、血型(xuxng)抗原与抗体,血型 是人类血液的主要特征之一,表达了血液各种(zhn)成分的遗传性状。血型抗原分类 1.红细胞血型抗原:ABO、Rh、MNS 等 2.白细胞血型抗原:CD、HLA等 3.血小板血型抗原:HPA等 4.其他血型抗原,第四页,共七十页。,第五章 血型与输血(sh xu)学检验,血型(xuxng)抗原,第五页,共七十页。,第五章 血型与输血学检验,完全抗体(kngt)(
5、complete antibody)在血型抗原物质刺激下可形成,与红细胞生理盐水悬液混合后能引起红细胞凝集的特异性抗体。,血型(xuxng)抗体,不完全抗体(low-order antibody)只可使红细胞致敏而不能使红细胞凝集的抗体。血型抗体与红细胞的表面抗原结合后,产生(chnshng)血管内或血管外溶血。,血型抗体(Blood group antibody)在血型抗原物质刺激下可形成的免疫球蛋白。红细胞血型抗体可分为完全抗体和不完全抗体。,第六页,共七十页。,第五章 血型与输血(sh xu)学检验,第一节 红细胞血型(xuxng),是红细胞上的遗传性标志(biozh)。包括ABO、Rh
6、、MNS、P、Lutheran、Kell等。,第七页,共七十页。,第五章 血型与输血(sh xu)学检验,一、ABO血型(xuxng)系统,1901年,Landsteiner发现了人类的第一个血型(xuxng)系统ABO血型(xuxng)系统,含抗原成分不同将人的红细胞分成A、B、O和AB四种血型(xuxng)。,第八页,共七十页。,第五章 血型与输血(sh xu)学检验,ABO血型(xuxng)合成,第九页,共七十页。,第五章 血型与输血学检验,血型物质存在的临床应用:a.测定唾液(tuy)中的血型物质辅助鉴定血型;b.中和ABO血型系统中的“天然抗体”;c.预测胎儿ABO血型等。,发生及分
7、布:胎儿在56周已可测出,表达(biod)相对稳定。存在于多种细胞的细胞膜和其他体液中。,ABO血型分布及存在(cnzi)的意义,第十页,共七十页。,第五章 血型与输血(sh xu)学检验,ABO血型(xuxng)系统独特的性质,1.血清存在反应(fnyng)强的抗体。2.组织细胞及各种体液中存在着ABH物质。,第十一页,共七十页。,第五章 血型(xuxng)与输血学检验,ABO亚型红细胞上的A抗原(kngyun),第十二页,共七十页。,第五章 血型与输血(sh xu)学检验,1.孟买型:无ABH抗原,血清(xuqng)中有其抗体2.B(A)型和A(B)型:红细胞上同时存在B抗原和很弱的A抗原
8、,容易误判为AxB型。,其他(qt)特殊类型的ABO亚型,第十三页,共七十页。,第五章 血型(xuxng)与输血学检验,ABO血型(xuxng)的遗传,第十四页,共七十页。,第五章 血型(xuxng)与输血学检验,第十五页,共七十页。,第五章 血型(xuxng)与输血学检验,二、Rh 血型(xuxng)系统,概述 抗Rh抗体一般指抗-D。Rh血型(xuxng)抗原及抗体 1.Rh抗原:含D、C、E、c和e五种,D抗原性最强。2.Rh抗体:主要通过输血或妊娠免疫而产生。Rh抗体临床意义:引起输血反应或新生儿溶血病。,第十六页,共七十页。,第五章 血型与输血(sh xu)学检验,第十七页,共七十页
9、。,第五章 血型与输血(sh xu)学检验,第十八页,共七十页。,第五章 血型(xuxng)与输血学检验,Rh血型(xuxng)引起的新生儿溶血,第十九页,共七十页。,第五章 血型与输血(sh xu)学检验,三、其它(qt)血型,.P血型系统:P抗原除存在于红细胞,还存在于纤维母细胞和淋巴细胞上。通常不引起新生儿溶血(rn xu)病和溶血(rn xu)性输血反应。.Kell血型系统:主要抗原是K和k,引起严重溶血性输血反应和新生儿溶血病。.Kidd血型系统:抗原为Jka,Jkb。,第二十页,共七十页。,第五章 血型与输血(sh xu)学检验,第二节 红细胞血型检测(jin c)技术,凝集反应(
10、agglutination)沉淀(chndin)反应(precipitation)溶血反应(hemolysis),第二十一页,共七十页。,第五章 血型与输血(sh xu)学检验,一、凝集反应,第二十二页,共七十页。,第五章 血型(xuxng)与输血学检验,二、沉淀(chndin)反应,第二十三页,共七十页。,第五章 血型与输血(sh xu)学检验,1.单扩与双扩原理(yunl),第二十四页,共七十页。,第五章 血型(xuxng)与输血学检验,2.对流(duli)免疫电泳,第二十五页,共七十页。,第五章 血型与输血(sh xu)学检验,三、溶血(rn xu)反应(hemolysis),第二十六页
11、,共七十页。,第五章 血型与输血(sh xu)学检验,一、红细胞血型(xuxng)鉴定,ABO血型(xuxng)鉴定 Rh血型鉴定MN血型鉴定,第二十七页,共七十页。,第五章 血型与输血(sh xu)学检验,ABO血型(xuxng)鉴定,1.正向定型(dng xng)2.反向定型,第二十八页,共七十页。,第五章 血型与输血(sh xu)学检验,3结果(ji gu)判定,第二十九页,共七十页。,第五章 血型与输血学检验,(二)Rh血型(xuxng)鉴定,1原理:(1)单克隆混合试剂检测法 用Rh各抗血清(IgM+IgG型)试剂通过凝集反应对红细胞上Rh抗原进行鉴定。(2)酶介质检测法 酶介质可破
12、坏红细胞表面的唾液酸,降低红细胞表面负电荷,减少细胞间的静电排斥力,使细胞间的距离缩小,有利于IgG型小分子特异性Rh血型抗体与红细胞上的Rh抗原反应,形成(xngchng)肉眼可见的凝集。,返回(fnhu),第三十页,共七十页。,第五章 血型与输血(sh xu)学检验,(三)MN血型(xuxng)鉴定,1原理:用IgM类特异性抗M、抗N单克隆血清(xuqng)来鉴定红细胞上有无相应的M抗原和/或N抗原。,第三十一页,共七十页。,第五章 血型与输血(sh xu)学检验,二、交叉(jioch)配血实验,概念分类 1.“主侧”配血 2.“次侧”配血 3.自身(zshn)对照,第三十二页,共七十页。
13、,第五章 血型与输血(sh xu)学检验,二、交叉(jioch)配血实验技术,1.盐水介质(jizh)法 2.酶介质法 3.抗人球蛋白介质法,第三十三页,共七十页。,第五章 血型(xuxng)与输血学检验,二、交叉配血实验(shyn)技术,4.凝聚(nngj)胺法5.微柱凝胶免疫技术,第三十四页,共七十页。,第五章 血型(xuxng)与输血学检验,第三节 白细胞血型(xuxng),1.包括红细胞血型抗原2.白细胞本身所特有(t yu)的血型抗原3.人类白细胞抗原(HLA),第三十五页,共七十页。,第五章 血型与输血(sh xu)学检验,一、HLA系统基因、抗原(kngyun)结构,HLA基因型
14、:位于6号染色体短臂6p21.3区域。HLA抗原.分为(fn wi)HLA-类分子.HLA-类分子,第三十六页,共七十页。,第五章 血型与输血(sh xu)学检验,HLA抗原临床(ln chun)应用,HLA多态性的研究;器官和骨髓移植前组织相容性配型;亲子鉴定;HLA与某些(mu xi)疾病的关联;遗传学方面。,第三十七页,共七十页。,第五章 血型与输血(sh xu)学检验,二、HLA系统抗原(kngyun)的检测方法,.HLA血清学技术(微量淋巴细胞毒试验)分型血清(xuqng)中含有的抗特定HLA抗原的细胞毒抗体与待检淋巴细胞膜表面的HLA抗原结合后,在补体的参与下损伤细胞膜,经伊红或台
15、盼蓝染色后,观察细胞是否被染色,了解细胞损伤、死亡的情况。,第三十八页,共七十页。,第五章 血型与输血(sh xu)学检验,二、HLA系统抗原的检测(jin c)方法,.HLA的分子生物学检测:PCR-SSP(PCR序列特异性引物)PCR-RFLP(PCR限制性片段长度(chngd)多态性)PCR-SBT(PCR-直接测序分型),第三十九页,共七十页。,第五章 血型(xuxng)与输血学检验,三、粒细胞血型(xuxng),分布:中性粒细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞。分类:.HNA-1抗原:目前发现的唯一具有多态性的粒细胞抗原系统。.HNA-2抗原:其中HNA-2 a具有临床意义。.HNA-3
16、抗原:其中HNA-a表达于淋巴细胞、血小板、内皮细胞、脾脏(pzng)、肾脏、胎盘细胞,是粒细胞聚集因子,与输血相关性肺损伤相关。,第四十页,共七十页。,第五章 血型与输血(sh xu)学检验,(一)粒细胞抗原抗体(kngt)检测方法,1.血清学方法(fngf):a.粒细胞凝集试验b.单克隆抗体特异性粒细胞抗原捕获试验c.粒细胞免疫荧光试验d.流式细胞术2.DNA分型技术:PCR-RFLP、PCR-SSP等。,第四十一页,共七十页。,第五章 血型与输血(sh xu)学检验,(二)粒细胞抗体的临床(ln chun)应用,.新生儿同种免疫粒细胞减少症2.非溶血性发热性输血反应3.输血相关性肺损伤(snshng)4.粒细胞输注无效5.自身免疫性粒细胞减少症,第四十二页,共七十页。,第五章 血型与输血(sh xu)学检验,第四节 血小板血型(xuxng),第四十三页,共七十页。,第五章 血型与输血(sh xu)学检验,第四十四页,共七十页。,第五章 血型与输血(sh xu)学检验,一、血小板同种(tn zhn)抗体,同种血小板抗体一般由输血、妊娠或骨髓移植等免疫刺激而产生。最常见的抗体是HRA