1、1.红细胞形态(xngti)检查:方法、正常及常见异常红细胞形态。2.血细胞比容测定:概念、测定方法、参考值及临床意义。3.网织红细胞计数:概念、计数方法、参考值及临床意义。,第一页,共三十页。,红细胞形态检查(jinch)方法,先低倍镜:再用油镜:,制备(zhbi)血涂片,染色(rns),镜检,检查区域:体尾交界处,细胞分布均匀,红细胞紧密排列但不重叠。,估计细胞分布和染色情况,浏览全片是否存在异常细胞。,观察红细胞形态。,第二页,共三十页。,红细胞的形态(xngti)检查,1.正常(zhngchng)形态,2.大小(dxio)异常,3.染色异常,4.形态异常,5.结构异常,第三页,共三十页
2、。,双凹圆盘形,细胞大小相似,平均直径7.2m(69.5m),厚约2m;瑞氏染色(rns)后呈淡粉红色,中央1/3为生理性淡染区;无核,胞质内无异常结构。,外周血正常(zhngchng)红细胞形态,第四页,共三十页。,红细胞大小(dxio)异常,红细胞大小(dxio)不均(anisocytosis),小红细胞(microcyte):,大红细胞(macrocyte):,巨红细胞(megalocyte):,直径(zhjng)小于6m,直径大于10m,直径大于15m,第五页,共三十页。,正常(zhngchng)红细胞,巨红细胞,小红细胞,第六页,共三十页。,正色素性(normochromic),红细
3、胞染色(rns)异常,低色素性(hypochromic),高色素性(hyperchromic),嗜多色性(polychromatic),第七页,共三十页。,红细胞形态(xngti)异常,球形红细胞,椭圆形红细胞,靶形红细胞,镰状红细胞,口形(kuxng)红细胞,棘状红细胞,半月形红细胞,泪滴形红细胞,第八页,共三十页。,染色质小体(HowellJolly body),红细胞结构(jigu)异常,卡波环(Cabot ring),嗜碱性(jin xn)点彩红细胞(basophilic stippling cell),有核红细胞(nucleated erythrocyte),第九页,共三十页。,红细
4、胞在全血标本中所占体积(tj)的比值。,一.概念(ginin),二.常规(chnggu)测定方法,Wintrobe法,微量离心法,红细胞间残留血浆较多,故结果偏高。,快速,用血少,残留血浆较少。,(首选常规方法),血细胞比容测定,hematocrit,Hct,Ht,HCT(血液分析仪法)packed cell volume,PCV(离心法),第十页,共三十页。,(一)原理(yunl),(二)试剂(shj),(三)器材(qci),干燥EDTA-K2 或 肝素钠,Wintrobe管(温氏管)离心机,Wintrobe法,(温氏法),血细胞比容测定,温氏管,第十一页,共三十页。,1.静脉血2ml加入(
5、jir)抗凝瓶中,充分混匀。,(四)方法(fngf),2.吸取(xq)抗凝血插入温氏管底部,将血注入 至刻度“10”处,塞紧瓶口。,3.相对离心力2264g,离心30 min,读数,再以同样速度离心10 min,至红细胞层 高度不再下降为止。,4.读出红细胞层柱高的毫米数,乘以0.01,即为血细胞比容测定值。,Wintrobe法,(温氏法),血细胞比容测定,第十二页,共三十页。,离心后血液被分为(fn wi)5层:血浆层 血小板层 白细胞和有核RBC层 还原红细胞层 带氧红细胞层,读数(dsh)层,Wintrobe法,(温氏法),血细胞比容测定(cdng),第十三页,共三十页。,1.所用器材必
6、须清洁(qngji)干燥。(防溶血),(五)注意事项,2.不能使用(shyng)改变RBC体积的抗凝剂。,3.抗凝血应塞瓶口(pn ku),防血浆蒸发。,4.离心的条件必须恒定。,Wintrobe法,(温氏法),血细胞比容测定,5.标本溶血或红细胞形态异常需注明。,第十四页,共三十页。,三.参考值,Wintrobe法:男 0.400.54 女 0.370.47微量法:男 0.470.04 女 0.420.05,血细胞比容测定(cdng),第十五页,共三十页。,四.临床意义,1.与RBC测定(cdng)的临床意义相似。,2.全血粘度的主要因素之一。Hct增高(znggo)可致全血粘度增加。,3.
7、用于红细胞平均值的计算(j sun)。,血细胞比容测定,第十六页,共三十页。,第十七页,共三十页。,Ret是晚幼红脱核后到完全成熟(chngsh)红细胞间的过渡细胞,因其胞浆内残存嗜碱性物质,经煌焦油蓝或新亚甲蓝等活体染色,呈蓝色的网状或颗粒状结构。,网织红细胞,概 念,(reticulocyte,Ret,RET),第十八页,共三十页。,型:丝球型 外周血中无,型:网型 外周血少见(sho jin),型:破网型 外周血可见(kjin),型:点粒型 外周血多见,网织红细胞,形态(xngti)与分型,第十九页,共三十页。,一.试剂(shj),5g/L新亚甲蓝N溶液(rngy),10g/L煌焦油蓝生
8、理盐水(shnglynshu)溶液(试管法),10g/L煌焦油蓝乙醇溶液(玻片法),二.方法,玻片法,试管法,网织红细胞,手工法网织红细胞计数,第二十页,共三十页。,玻片法,1.染液1滴置玻片一端,自然(zrn)干燥备用。,2.取血1滴至干燥(gnzo)的染料上,用推片角混 匀,将两玻片粘合。,3.510 min后,推血片。,方法评价:水分(shufn)易蒸发,故不易涂片;染色时间短,结果偏低。,网织红细胞,手工法网织红细胞计数,4.油镜下计数至少1000个RBC中的Ret数。,第二十一页,共三十页。,试管(shgun)法,1.染液2滴加入(jir)小试管,加血2滴,混匀。,2.室温(sh w
9、n)下染色1520 min。,3.混匀,取1小滴制薄血片,干后计数。,方法评价:水分不易蒸发;染色时间长;可重复推片复查。,(手工法的推荐方法),网织红细胞,手工法网织红细胞计数,第二十二页,共三十页。,三.注意事项,1.玻片法中,应待玻片上煌焦油(jioyu)蓝乙 醇液中乙醇完全挥发后才能加血。,2.染色(rns)时间必须充分。,3.计数区域一般选择红细胞分布均匀 的部位,兼顾(jing)边缘和尾部。,4.试管法染液与血液以1:1为宜。,网织红细胞,手工法网织红细胞计数,第二十三页,共三十页。,Miller窥盘(置于目镜(mjng)中),计数(j sh)小正方形中的红细胞数,计数大正方形中的
10、网织红细胞数。,前提(qint):红细胞散在且均匀分布,作用:提高计数的速度和精度,第二十四页,共三十页。,相对值:成人(chng rn):0.0050.015 新生儿:0.020.06绝对值:成人:(2484)109/L,网织红细胞,参考值,第二十五页,共三十页。,1.判断骨髓(su)红细胞造血情况,2.作为贫血疗效观察(gunch)的指标,减低:表明骨髓造血(zo xu)功能减低。常见于再生障碍性贫血。,增高:表明骨髓红细胞生成旺盛。常见于溶贫和急性大失血后。,网织红细胞计数,临床意义,第二十六页,共三十页。,网织红细胞相对值能准确客观地反映(fnyng)网织红细胞的生成速度吗?,网织红细
11、胞绝对值,网织红细胞百分率红细胞数/L,网织红细胞生成(shn chn)指数(reticulocyte production index,RPI),(代表Ret生成(shn chn)的相对速度),第二十七页,共三十页。,1.红细胞的形态异常包括哪些方面?2.什么是网织红细胞?它有些(yuxi)什么形态?3.选择题:(1)以下哪项不属于微量高速离心法测 定血细胞比容的优点 A、用血量少 B、测定时间短 C、效率高 D、无血浆残留 E、准确度较高,复习(fx)思考题,第二十八页,共三十页。,(2)下列网织红细胞的概念,哪项是错误的A、是介于晚幼红与成熟红细胞之间的尚未 完全成熟的红细胞 B、其胞浆
12、经瑞氏染色后可见蓝色网状结构C、通常比红细胞稍大 D、在骨髓中的数量比外周血高 E、通常以网织红细胞的百分率表示(biosh)(3)不属于红细胞异常结构的是 A、染色质小体 B、杜勒体 C、卡波环 D、嗜碱性点彩红细胞 E、有核红细胞,第二十九页,共三十页。,内容(nirng)总结,1.红细胞形态检查:。概念、测定方法、参考值及临床意义。概念、计数方法、参考值及临床意义。估计细胞分布和染色情况,浏览全片是否存在异常细胞。快速,用血少,残留血浆(xujing)较少。hematocrit,Hct,Ht,HCT(血液分析仪法)。干燥EDTA-K2 或 肝素钠。(reticulocyte,Ret,RET)。型:丝球型 外周血中无。型:破网型 外周血可见。1.染液1滴置玻片一端,自然干燥备用。E、有核红细胞,第三十页,共三十页。,