1、肝功能常规(chnggu)生化检验,第一页,共六十一页。,2,第二页,共六十一页。,主要(zhyo)内容,肝功检测项目(xingm):(肝十二项)AST(谷草转氨酶)、ALT(谷丙转氨酶)D-BIL(直接胆红素)、T-BIL(总胆红素)TP(总蛋白)、ALB(白蛋白)、GLOB(球蛋白)ALP(碱性磷酸酶)GGT(-谷氨酰基转移酶)CHE(胆碱酯酶)TBA(总胆汁酸)PALB(前白蛋白),3,第三页,共六十一页。,肝功能检测(jin c),肝脏(gnzng)的基本功能 肝脏的代谢功能 肝脏的生物转化功能 肝脏的分泌与排泄功能,4,第四页,共六十一页。,肝脏的代谢(dixi)功能,接受来自消化道
2、的各种物质合成除-球蛋白以外几乎所有的血浆蛋白合成胆汁酸加工和处理体内产生(chnshng)或外界进入的非营养物质肝脏是多种激素在发挥调节作用后降解的 主要部位,5,第五页,共六十一页。,肝脏(gnzng)的生物转化功能,某些(mu xi)生物活性物质,代谢(dixi)终产物,外界异物,氧化、还原,水解,剩余物质,结合,葡萄糖醛酸硫酸氨基酸,增加溶解度,排出体外,甲基化,乙酰化,排出体外,排出体外,6,第六页,共六十一页。,肝脏(gnzng)的分泌与排泄功能,胆固醇,合成(hchng),初级(chj)胆汁酸,胆酸鹅脱氧胆酸,胆汁,结合形式,大部分,小肠,回肠末端,门静脉,95%,重吸收,结合胆
3、汁酸,经细菌分解形成次级胆汁酸,7,第七页,共六十一页。,8,第八页,共六十一页。,血清(xuqng)转氨酶的测定,ALT(谷丙转氨酶)各器官中按含量(hnling)多少依次为:肝脏、肾脏、心脏、骨骼肌等。在肝细胞中主要存在于细胞质中,只有少量在线粒体中,肝细胞中ALT活性比血清高2850倍。AST(谷草转氨酶)各器官中按含量多少依次为:心脏、肝脏、骨骼肌、肾脏等。在肝细胞中约80%存在于线粒体中,约20%存在于胞质中,血清中AST和ALT的活性比值约为1.15参考值 AST 37U/L(37)(酶速率法)ALT 42U/L(37)(酶速率法)AST/ALT 1.15左右,9,第九页,共六十一
4、页。,10,第十页,共六十一页。,11,第十一页,共六十一页。,谷丙转氨酶(ALT),检测原理ALT+L-丙氨酸+-酮戊二酸 丙酮酸+L-谷氨酸 丙酮酸+NADH L-乳酸(r sun)+NAD+在340nm处检测NADH的吸收峰来推算 血清中ALT的浓度,LDH,12,第十二页,共六十一页。,谷草(gco)转氨酶(AST),检测原理AST+天门冬氨酸+-酮戊二酸 草酰乙酸+L-谷氨酸草酰乙酸+NADH L-苹果酸+NAD+在340nm处检测NADH的吸收峰来推算(tu sun)血清中AST的浓度,MDH,13,第十三页,共六十一页。,临床意义,1、急性(jxng)病毒性肝炎 ALT、AST均
5、升高,急性肝炎早期,AST/ALT1 重症肝炎临终期会出现“酶胆分离”现象,即血中ALT浓度下降,甚至在正常范围内,而此时胆红素却进行性增高,14,第十四页,共六十一页。,2、慢性肝炎和脂肪肝 AST、ALT轻度上升,一般不超过参考值的3倍,有时可降至正常 但是慢性活动性肝炎,ALT多数升至参考值的35倍,且长期(chngq)维持在一个较高的水平,如果伴有肝坏死,可升至参考值的10倍以上。脂肪肝时,ALT可持续轻度升高 并伴有高脂血症,15,第十五页,共六十一页。,3、肝硬化 取决于肝细胞坏死和肝纤维化程度 肝硬化病变累及线粒体时,多数AST升高程度可超过ALT(肝细胞中,AST80%存在于线
6、粒体中)4、原发性肝癌 ALT可轻度升高或正常,提示可能并发肝坏死,预后(yhu)严重5、其他疾病 AST升高如急性心肌梗死、右心 功能不全、肌营养不良、溃疡性结 肠炎、外伤等,16,第十六页,共六十一页。,附注(fzh):,正常新生儿ALT水平比成年人约高2倍,出生后约3 个月降至成年人的水平。新生儿的肝细胞膜通透性较大,ALT 从肝细胞渗入(shnr)血浆较多,使血清ALT 水平升高。血清不宜反复冻融,以免影响酶活性。血清置41周,酶活性无显著变化。在常规ALT 测定中,不推荐冰冻保存血清标本。宜用血清标本测定。草酸盐、肝素、枸橼酸盐虽不抑制酶活性,但可引起反应液轻度混浊。红细胞内ALT
7、含量为血清中3 5 倍,应 避免标本溶血。,17,第十七页,共六十一页。,血清(xuqng)胆红素的测定,黄疸(hungdn)血清中胆红素含量过高,则可扩散至组织中,组织被黄染。分类 溶血性 肝细胞性 胆汁淤积性,18,第十八页,共六十一页。,19,第十九页,共六十一页。,20,第二十页,共六十一页。,21,第二十一页,共六十一页。,22,第二十二页,共六十一页。,直接胆红素 血清与重氮试剂(shj)混合后,在规定时间内所测定的胆红素相当于直接胆红素含量,总胆红素减去直接胆红素即为间接胆红素 参考值:直接胆红素 06.8mol/L 间接胆红素 1.713.2mol/L,23,第二十三页,共六十
8、一页。,总胆红素测定(cdng)原理:血清胆红素+重氮试剂 偶氮胆红素 出现呈色反应,颜色深浅与胆红素含量成正比 参考值:3.420.5mol/L,甲醇(ji chn)、咖啡因,加速(ji s)剂,24,第二十四页,共六十一页。,临床意义:,总胆红素 判断有无黄疸 根据血清胆红素的分类(fn li),判断黄疸类型直接胆红素 当总胆红素水平升高时,D-BIL/T-BIL可来 协助鉴别黄疸 肝细胞黄疸 D-BIL/T-BIL常为40%60%梗阻性黄疸 D-BIL/T-BIL常 60%,25,第二十五页,共六十一页。,附注(fzh):,应空腹采血,避免脂血引起反应液浑浊,轻度溶血对本法无影响,但是明
9、显溶血可使测定结果偏低。血液标本和标准液应避免阳光直照,防止胆红素的光氧化。胆红素对光(du gung)的敏感度与温度有关,血标本应避光置冰箱保存。标本保存冰箱可稳定3天,-70暗处保存可稳定3个月。,26,第二十六页,共六十一页。,总蛋白(dnbi)(TP)测定,是血清所含各种蛋白质的总和可一定程度(chngd)反映肝脏合成和储备功能测定方法:(推荐)双缩脲比色法 蛋白质中的肽键在碱性条件下与 Cu2+作用生成蓝紫色的化合物。,27,第二十七页,共六十一页。,测定原理:在碱性(jin xn)条件下,蛋白质多肽链中的肽键与铜离子(Cu2+)络合形成紫红色化合物参考值;6080g/L,28,第二
10、十八页,共六十一页。,临床意义:,生理性波动:由于体液分布原因,长久卧床者比直立活动时约低45g/L;新生儿比成人低58g/L;60岁以上的老年人比成人低2g/L增高:血液浓缩(nn su):导致TP相对增高:如严重腹泻、呕吐、高热时急剧失水、休克、慢性肾上腺皮质功能减退 血浆蛋白质合成增加:主要见于 球蛋白合成增加、多发性骨髓瘤患 者,29,第二十九页,共六十一页。,减低:血液稀释:导致TP浓度相对减低:静脉注射过多低渗溶液或各种(zhn)原因引起的水、钠潴留 摄入不足或消耗增加:如食物中长期缺乏蛋白质、长期消化不良或某些消耗性疾病(结核、甲亢、恶性肿瘤等)蛋白质丢失:严重烧伤(血浆大量 丢
11、失)、大量失血、肾病综合症时大 量蛋白尿或溃疡性结肠炎(肠道长期 丢失蛋白质),30,第三十页,共六十一页。,白蛋白(ALB)测定(cdng),由肝实质合成,是血浆中含量最多的蛋白质,占TP的40%60%内源性氨基酸源的营养源,具有缓冲酸碱的能力血浆中重要的载体(胆红素、胆汁酸盐、前列腺素、类固醇激素,金属离子等)维持血浆胶体渗透压,其在体液中的 浓度可作为各种膜屏障(pngzhng)完好的指标(分子量较小66400),31,第三十一页,共六十一页。,测定方法:,溴钾酚绿法(BCG法):溴钾酚绿是一种阴离子染料,在PH4.2的缓冲液中,在非离子(lz)去垢剂聚氧乙烯月桂醚存在时,可与白蛋白结合
12、成蓝绿色复合物,溶液由黄色变成蓝绿色,在660nm时比色参考值:3550g/L,32,第三十二页,共六十一页。,临床意义:,受饮食中蛋白质的摄入量影响,可在一定程度上作为个体营养状态的评价指标增高:严重脱水减低:合成降低:急、慢性肝病 营养或吸收不良 分解或代谢增加:大面积组织损伤或 炎症 消耗性疾病:严重感染、恶性肿瘤等 异常丢失:肾病(shn bn)综合症、慢性肾炎 分布异常:门静脉高压腹水,33,第三十三页,共六十一页。,球蛋白及其与白蛋白的比例(bl),球蛋白增高:多见于炎症、免疫系统疾病 和肿瘤 细菌、病毒、寄生虫引起的急慢性 感染,如结核(jih)、麻风病、血吸虫 病、病毒性肝炎等
13、 自身免疫性疾病:系统性红斑狼 疮、风湿、类风湿等 多发性骨髓瘤和淋巴瘤,34,第三十四页,共六十一页。,球蛋白降低:见于血液稀释、严重营养不良、胃肠道疾病白蛋白与球蛋白比值(A/G)参考值:12:1 临床上常用来衡量肝脏疾病的严重程度 比值倒置(dozh):A/G1时,是慢性 肝炎或肝硬化的特征之一,35,第三十五页,共六十一页。,前白蛋白(P-ALB)测定(cdng),由肝细胞合成,在电泳分离中(PH8.6)移速比白蛋白快,半寿期很短,仅12小时。除可作为组织修补的材料,还是一种运载蛋白,可以和T3、T4结合,还可以和视黄醇结合而具有(jyu)运载维生素A的作用。,36,第三十六页,共六十
14、一页。,检测原理:血清中的PA与抗PA抗体在液相中反应成抗原抗体复合物,使反应液呈现(chngxin)浊度。当一定量抗体存在时,浊度与血清中PA(抗原)的含量成正比,利用散射比浊或透射比浊技术,与同样处理的PA标准比较,求得样品中PA 含量。参考值:散射比浊法:22 40 mg/dL,37,第三十七页,共六十一页。,临床意义:诊断和监测营养不良:血清P-ALB在无感染的情况下,是儿童营养不良的灵敏指标。诊断肝病:在肝炎早期,其浓度(nngd)下降往往早于其他血清蛋白成分的改变。有研究表明,动态随访测定血清P-ALB对重型肝炎预后有较大的参考价值。P-ALB明显上升,往往预后良好,P-ALB持久
15、下降,预后险恶。是一种负性急性时相反应蛋白,急性时相反应时下降。有研究表明,P-ALB可以作为癌症的筛 选指标。,38,第三十八页,共六十一页。,附注(fzh):,血清(xuqng)蛋白质的浓度用“g/L”表示,因为血清中各种蛋白质的相对分子质量不同,所以不能用mol/L 表示。本法属浊度反应,试剂有任何可见的混浊,应弃去不用,否则对结果有较大影响。血清标本如不能及时测定,应置28 冰箱保存,可稳定2天。,39,第三十九页,共六十一页。,碱性(jin xn)磷酸酶(ALP)的测定,一组在pH 910.5的碱性环境中能催化有机磷酸酯水解的酶。血清ALP主要来源于肝脏、骨骼,少部分来自(li z)
16、小肠和妊娠期胎盘组织。肝细胞产生的ALP一般从胆道排入小肠。,40,第四十页,共六十一页。,测定方法(酶动力法):以磷酸对硝基酚为底物,2-氨基-2-甲基丙醇为缓冲液对硝基酚磷酸盐在ALP的作用下产对硝基酚和磷酸盐,在405nm除检测(jin c)对硝基酚的吸收峰,计算出血清中的浓度。参考值:1 12 岁 500 U/L;12 15 岁 750 U/L;25 岁以上 40 150 U/L。,41,第四十一页,共六十一页。,临床意义:生理性增高:妊娠3个月 即可产生ALP 9个月 到达高峰(可为同龄(tn ln)妇女的3-4倍)分娩后1个月 恢复正常 新生儿、儿童、青少年骨骼生长期比成人要高 15岁(第一个高峰)是成人的23倍 1018岁(第二个高峰)是成人的45倍 肝胆管梗阻:ALP升高。(ALP分布在肝细胞的血窦侧和毛细胆 管侧的微绒 毛上,经胆汁排入小肠。梗阻性黄疸时,由于肝内、外梗阻胆 汁排出不畅,再加上胆汁具有表面活 性剂作用可洗脱ALP返流入血,使血 中浓度升高),42,第四十二页,共六十一页。,肝炎(n yn)或肝硬化:可轻度升高,但很少超 过上 限3倍 原发或继发性肝癌: