1、医学微生物实验,Experiment of Medical Microbiology,第一页，共三十九页。,稳固根底理论、根本概念 学习根本操作 树立无菌概念,微生物实验目的,第二页，共三十九页。,实验室规那么：1.必须穿白大衣；2.尽量保持安静；3.自己的实验器材(试管、平皿等)注明菌种、日期、组、姓名；4.除示教片以外，沾染过传染物的实验器材必须放入消毒缸；5.注意平安；不要随意调动实验室仪器。6.实验结束后，泡手、洗手。,第三页，共三十九页。,细菌的培养法,第四页，共三十九页。,细菌生长繁殖必要条件 营养物质：水、碳源、氮源、无机盐、生长因子 环境条件：酸碱度、渗透压、温度和必要的气体培
2、养基的定义 微生物生长繁殖所需要的营养物质混合而成的营养基 质，一般pH为7.27.6，高压灭菌后使用。,第五页，共三十九页。,培养基分类,按其营养组成和用途不同 根底培养基：营养培养基：选择培养基：鉴别培养基：厌氧培养基：,第六页，共三十九页。,按物理状态不同液体培养基:用于大量繁殖细菌固体培养基:液体培养基中参加1.5%2.5%琼脂粉，用于细菌别离和纯化半固体培养基:琼脂粉含量在0.3%0.5%，用于观察细菌的动力和短期保存菌种,第七页，共三十九页。,细菌在培养基中的生长情况,液体培养基：外表生长 均匀混浊生长 沉淀生长,第八页，共三十九页。,固体培养基：菌落，菌苔,别离培养：将标本或培养
3、物划线接种在固体培养基外表，因划线的分散作用，使许多原混杂的细菌在固体培养基外表分散开，称别离培养。菌落：单个细菌生长后形成的肉眼可见的细菌集团叫菌落。纯培养：挑取一个菌落接种到另一培养基中，生长出来的细菌为纯种，称为纯培养。,第九页，共三十九页。,半固体培养基：,无动力 有动力,第十页，共三十九页。,细菌培养的应用在医学中的应用感染性疾病的病原学诊断细菌学的研究生物制品的制备在工农业生产中的应用在基因工程中的应用,第十一页，共三十九页。,实验三 细菌的培养,培养基 菌种 方法,普通琼脂平板 大肠、金葡混和菌液 平板划线,肉汤培养基 大肠、枯草杆菌 液体接种,半固体培养基 变形、痢疾杆菌 穿刺
4、接种,目的：学习掌握细菌别离和培养的各种根本技术,斜面培养基 大肠杆菌 斜面划线,2人/组,第十二页，共三十九页。,four-area streak plate technique,Rotate 90,Flame loop,Rotate 90,Rotate 90,Flame loop,第十三页，共三十九页。,液体接种,第十四页，共三十九页。,斜面接种,第十五页，共三十九页。,细菌的形态和结构,第十六页，共三十九页。,细菌的形态和结构细菌根本形态：,球菌,杆菌,螺形菌,第十七页，共三十九页。,细菌根本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、核质,细菌特殊结构：,Spore,Capsule,Flagella
5、,Pilus？,第十八页，共三十九页。,细菌的形态和结构：观察示教片：9张,第十九页，共三十九页。,第二十页，共三十九页。,第二十一页，共三十九页。,第二十二页，共三十九页。,第二十三页，共三十九页。,第二十四页，共三十九页。,第二十五页，共三十九页。,第二十六页，共三十九页。,第二十七页，共三十九页。,第二十八页，共三十九页。,真菌形态的观察,第二十九页，共三十九页。,真菌的菌落形态,1.新生隐球菌：酵母型菌落；类似细菌菌落；2.白假丝酵母菌：类酵母菌落(酵母样菌落)；3.霉菌：丝状菌落；多细胞真菌的菌落形式。,第三十页，共三十九页。,真菌镜下形态观察,1.霉菌小培养：菌丝，孢子 2.新生隐
6、球菌墨汁涂片：厚荚膜、芽生孢子 3.白假丝酵母菌：厚膜孢子、假菌丝,第三十一页，共三十九页。,第三十二页，共三十九页。,第三十三页，共三十九页。,第三十四页，共三十九页。,第三十五页，共三十九页。,第三十六页，共三十九页。,革兰染色法,菌种：两个单菌落E、S试剂：生理盐水、结晶紫、碘液、95%乙醇、沙黄材料：酒精灯、接种环、玻片、步骤 涂片 自然枯燥 固定 染色 初染：结晶紫，12滴，时间1分钟，用水冲洗。媒染：碘液，12滴，时间1分钟，用水冲洗。脱色：95乙醇数滴，时间半分钟30秒，用水冲洗。复染：沙黄，12滴，1分钟，用水冲洗。滤纸吸干，油镜观察。,第三十七页，共三十九页。,抗酸染色法,标
7、本：结核病人痰涂片，枯草涂片试剂：石炭酸复红、3%盐酸酒精、碱性美兰步骤 固定 染色 初染：石炭酸复红数滴，时间810分钟，用水冲洗。脱色：3%盐酸酒精数滴，时间0.51分钟30秒，用水冲洗。复染：碱性美兰，12滴，1分钟，用水冲洗。滤纸吸干，油镜观察。,第三十八页，共三十九页。,内容总结,医学微生物实验。环境条件：酸碱度、渗透压、温度和必要的气体。质，一般pH为7.27.6，高压灭菌后使用。固体培养基:液体培养基中参加1.5%2.5%琼脂粉，用于细菌别离和纯化。半固体培养基:琼脂粉含量在0.3%0.5%，用于观察细菌的动力和短期保存菌种。纯培养：挑取一个菌落接种到另一培养基中，生长出来的细菌为纯种，称为纯培养。2.白假丝酵母菌：类酵母菌落(酵母样菌落)。标本：结核病人痰涂片，枯草涂片,第三十九页，共三十九页。,
