1、中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准G B5 0 0 9.2 6 52 0 2 1食品安全国家标准食品中多环芳烃的测定2 0 2 1-0 9-0 7发布2 0 2 2-0 3-0 7实施中华人民共和国国家卫生健康委员会国 家 市 场 监 督 管 理 总 局发 布G B5 0 0 9.2 6 52 0 2 1 前 言 本标准代替G B5 0 0 9.2 6 52 0 1 6 食品安全国家标准 食品中多环芳烃的测定。本标准与G B5 0 0 9.2 6 52 0 1 6相比,主要变化如下:将原第二法气相色谱-质谱法修订为第一法,修改了测定项目、样品前处理、气相色谱质谱条件、计算方法等;将原第
2、一法高效液相色谱法修订为第二法,修改了序号,简化了原理,统一了试样制备。G B5 0 0 9.2 6 52 0 2 11 食品安全国家标准食品中多环芳烃的测定1 范围本标准第一法规定了食品中1 6种多环芳烃的气相色谱-质谱测定方法;第二法规定了食品中1 5种多环芳烃的液相色谱测定方法。本标准第一法适用于粮食及其制品、肉及其制品、水产及其制品、动植物油脂及其制品中1 6种多环芳烃(苯并c 芴、苯并a 蒽、环戊并c,d 芘、5-甲基、苯并b 荧蒽、苯并k 荧蒽、苯并j 荧蒽、苯并a 芘、茚并1,2,3-c,d 芘、二苯并a,h 蒽、苯并g,h,i 苝、二苯并a,l 芘、二苯并a,e 芘、二苯并a,
3、i 芘、二苯并a,h 芘)的测定;适用于婴幼儿配方乳粉、婴幼儿辅助食品中4种多环芳烃(苯并a 蒽、苯并b 荧蒽、苯并a 芘)的测定。本标准第二法适用于粮食及其制品、肉及其制品、水产及其制品、蔬菜、动植物油脂中1 5种多环芳烃(萘、苊、芴、菲、蒽、荧蒽、芘、苯并a 蒽、苯并b 荧蒽、苯并k 荧蒽、苯并a 芘、茚并1,2,3-c,d芘、二苯并a,h 蒽和苯并g,h,i 苝)的测定。第一法 气相色谱-质谱法2 原理试样中多环芳烃经溶剂提取,氢氧化钾乙醇溶液皂化,固相萃取柱净化,浓缩后用气相色谱-质谱联用仪测定,同位素内标法定量。3 试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为G B/T6
4、6 8 2规定的一级水。3.1 试剂3.1.1 乙酸乙酯(C4H8O2):色谱纯。3.1.2 二氯甲烷(CH2C l2):色谱纯。3.1.3 丙酮(C3H6O):色谱纯。3.1.4 环己烷(C6H1 2):色谱纯。3.1.5 正己烷(C6H1 4):色谱纯。3.1.6 异辛烷(C8H1 8):色谱纯。3.1.7 无水乙醇(C2H6O):色谱纯。3.1.8 氨水(NH3H2O):质量分数约2 5%。3.1.9 无水乙醚(C4H1 0O)。3.1.1 0 石油醚(C5H1 2O2):沸程为3 06 0。G B5 0 0 9.2 6 52 0 2 12 3.1.1 1 氢氧化钾(KOH)。3.1.1
5、 2 无水硫酸钠(N a2S O4):使用前4 0 0下烘烤2h后放干燥器内待用。3.2 试剂配制3.2.1 氢氧化钾乙醇溶液(0.3m o l/L):称取1.6 8g氢氧化钾,用1 0 0m L无水乙醇超声溶解,临用现配。3.2.2 氢氧化钾乙醇溶液(1.5m o l/L):称取8.4 0g氢氧化钾,用1 0 0m L无水乙醇超声溶解,临用现配。3.2.3 环己烷-乙酸乙酯溶液(1+1):将环己烷和乙酸乙酯按11(体积比)混合均匀。3.2.4 二氯甲烷-乙酸乙酯溶液(1+1):将二氯甲烷和乙酸乙酯按11(体积比)混合均匀。3.2.5 丙酮-异辛烷溶液(1+1):将丙酮和异辛烷按11(体积比)
6、混合均匀。3.3 标准溶液3.3.1 多环芳烃标准溶液多环芳烃标准溶液(含苯并c 芴、苯并a 蒽、环戊并c,d 芘、5-甲基、苯并b 荧蒽、苯并k 荧蒽、苯并j 荧蒽、苯并a 芘、茚并1,2,3-c,d 芘、二苯并a,h 蒽、苯并g,h,i 苝、二苯并a,l芘、二苯并a,e 芘、二苯并a,i 芘、二苯并a,h 芘,1 0.0g/m L或相应浓度):经国家认证并授予标准物质证书的标准溶液,-1 8下避光保存。多环芳烃C A S号见附录A。3.3.2 同位素多环芳烃内标溶液同位素多环芳烃内标溶液(至少含D1 2-苯并a 蒽、D1 2-、D1 2-苯并b 荧蒽、D1 2-苯并a 芘、D1 2-茚并1
7、,2,3-c,d 芘、D1 4-二苯并a,h 蒽、D1 2-苯并g,h,i 苝,1 0 0.0g/m L或相应浓度),-1 8 下避光保存。同位素多环芳烃内标C A S号见附录A。警告 多环芳烃是已知的致癌、致畸、致突变的物质,并且致癌性随着苯环数的增加而增加。进行标准溶液配制等操作时应特别注意安全防护,应在通风柜中操作,尽量减少暴露。3.4 标准使用液配制3.4.1 多环芳烃标准使用液(5 0 0.0n g/m L):吸取多环芳烃标准溶液(1 0.0g/m L)0.5 0m L于1 0m L容量瓶中,用丙酮-异辛烷溶液(1+1)定容至刻度,混匀,将溶液转移至棕色玻璃存储瓶中,4 下避光密封保
8、存,保存期3个月。3.4.2 多环芳烃标准使用液(1 0 0.0n g/m L):吸取多环芳烃标准使用液(5 0 0.0n g/m L)2.0m L于1 0m L容量瓶中,用丙酮-异辛烷溶液(1+1)定容至刻度,混匀,将溶液转移至棕色玻璃存储瓶中,4 下避光密封保存,保存期3个月。3.4.3 同位素多环芳烃内标使用液(2 0 0.0n g/m L):吸取同位素多环芳烃内标溶液(1 0 0.0g/m L)0.1 0m L于5 0m L容量瓶中,用丙酮-异辛烷溶液(1+1)定容至刻度,混匀,将溶液转移至棕色玻璃存储瓶中,4下避光密封保存,保存期1年。3.4.4 多环芳烃标准系列工作液:取8个锥底进
9、样瓶,分别吸取多环芳烃标准使用液(1 0 0.0n g/m L)2 0.0L、4 0.0L、5 0.0L、8 0.0L和多环芳烃标准使用液(5 0 0.0n g/m L)2 0.0L、4 0.0L、5 0.0L、1 0 0.0L,再各加同位素多环芳烃内标使用液(2 0 0.0n g/m L)1 0 0.0L,用丙酮-异辛烷溶液(1+1)补充体积至2 0 0L,多环芳烃标准系列工作液浓度为1 0.0n g/m L、2 0.0n g/m L、2 5.0n g/m L、4 0.0n g/m L、5 0.0n g/m L、1 0 0.0n g/m L、1 2 5.0n g/m L、2 5 0.0n g
10、/m L,内标为1 0 0.0n g/m L,临用现配。G B5 0 0 9.2 6 52 0 2 13 4 仪器和设备4.1 气相色谱-四极杆质谱联用仪(G C-M S):配电子轰击离子源(E I源)。4.2 电子天平:感量为0.0 1g、0.0 0 1g。4.3 高速粉碎机。4.4 均质器。4.5 恒温水浴装置。4.6 超声波清洗器。4.7 氮吹仪。4.8 高速离心机:转速1 00 0 0r/m i n。4.9 涡旋振荡器。4.1 0 精密移液器。4.1 1 固相萃取小柱(苯乙烯二乙烯基苯聚合物)或等效净化柱:6m L,3 0 0m g。5 分析步骤5.1 样品前处理5.1.1 试样制备5
11、.1.1.1 粮食及其制品取样品2 0 0g5 0 0g,用高速粉碎机将其充分粉碎,混合均匀后分出1 0 0g左右,装于洁净样品袋或瓶中,密封标识后-1 8下冷冻保存,供检测用。5.1.1.2 肉及其制品、水产及其制品、蔬菜取样品2 0 0g5 0 0g,将其可食部分先切碎,经均质器充分搅碎,取1 0 0g左右装于洁净样品袋或瓶中,密封标识后-1 8下冷冻保存,供检测用。5.1.1.3 动植物油脂及制品取散装动植物油脂及制品1 0 0g 2 0 0g,装于洁净样品瓶中,密封标识后放阴凉处保存,供检测用。定型包装动植物油脂贴标签放阴凉处保存,供检测用。5.1.1.4 婴幼儿配方乳粉、婴幼儿辅助食
12、品取需粉碎样品2 0 0g5 0 0g,用高速粉碎机将其充分粉碎,混合均匀后分出1 0 0g左右,装于洁净样品袋或瓶中,密封标识后4下冷藏保存,供检测用。不需粉碎的婴幼儿配方乳粉、婴幼儿辅助食品贴标签放阴凉处保存,供检测用。5.1.2 试样提取5.1.2.1 粮食及其制品称取试样5g(精确至0.0 0 1g),置于5 0m L具塞离心管中,加入1 0 0L同位素多环芳烃内标使用液(2 0 0.0n g/m L)振荡混合后静置3 0m i n,加入5g无水硫酸钠、2 0m L环己烷-乙酸乙酯混合溶液(1+1),涡旋提取1m i n,超声提取1 5m i n,以1 00 0 0r/m i n离心3
13、m i n,吸取上清液至1 5m L预称重的离心G B5 0 0 9.2 6 52 0 2 14 管中(精确至0.0 1g),4 5水浴下氮气吹干溶剂得提取物,称重,计算提取物质量(精确至0.0 1g),提取物待皂化。若提取物质量大于1g,则称出1g提取物(精确至0.0 1g),置于另一1 5m L具塞离心管中待皂化。5.1.2.2 肉及其制品、水产及其制品称取试样5g(精确至0.0 0 1g),置于5 0m L具塞离心管中,加入1 0 0L同位素多环芳烃内标使用液(2 0 0.0n g/m L)振荡混合后静置3 0m i n,加入2 0g无水硫酸钠,用金属角匙搅拌分散,加入2 0m L环己烷
14、-乙酸乙酯混合溶液(1+1),涡旋提取1m i n,进一步超声提取1 5m i n,1 00 0 0r/m i n离心3m i n,吸取上清液至1 5m L预称重的离心管中,4 5水浴下用氮气吹干溶剂得提取物,称重,计算提取物质量(精确至0.0 1g),提取物待皂化。若提取物质量大于1g,则称出1g提取物(精确至0.0 1g),置于另一1 5m L具塞离心管中待皂化。5.1.2.3 动植物油脂及制品称取试样0.5g 1g(精确至0.0 0 1g),置于1 5m L具塞离心管中,加入1 0 0L同位素多环芳烃内标使用液(2 0 0.0n g/m L),待皂化。5.1.2.4 婴幼儿配方乳粉称取试
15、样2g(精确至0.0 0 1g),置于5 0m L具塞离心管中,加入1 0 0L同位素多环芳烃内标使用液(2 0 0.0n g/m L),加1 0m L水,涡旋溶解,加2m L氨水充分混匀,在6 55水浴中放置1 0m i n,取出冷却至室温。加入1 0m L无水乙醇,缓慢混匀,加入8m L无水乙醚,漩涡振荡5m i n,再加入8m L石油醚,漩涡振荡5 m i n,1 00 0 0r/m i n离心5m i n,吸出上层有机相至1 5m L预称重的离心管中,4 5水浴下用氮气吹干溶剂得提取物,称重,计算提取物质量(精确至0.0 1g),提取物待皂化。5.1.2.5 婴幼儿辅助食品称取2g(精
16、确至0.0 0 1g)试样,置于5 0m L具塞离心管中,加入1 0 0L同位素多环芳烃内标使用液(2 0 0.0n g/m L),加1 0m L水、1 0m L无水乙醇,涡旋溶解,加入8m L无水乙醚,漩涡振荡5m i n,再加入8m L石油醚,漩涡振荡5m i n,以1 00 0 0r/m i n离心5m i n,吸出上层有机相至1 5m L预称重的离心管中,4 5水浴中用氮气吹干溶剂得提取物,称重,计算提取物质量(精确至0.0 1g),提取物待皂化。5.1.3 皂化5.1.3.1 提取物质量小于或等于0.2g(精确至0.0 1g),加5m L0.3m o l/L氢氧化钾乙醇溶液,涡旋混匀,室温放置5m i n,加4m L水、5m L正己烷,涡旋提取2m i n,1 00 0 0r/m i n离心2m i n,上层正己烷提取液待净化。5.1.3.2 提取物质量在0.2g 1g(精确至0.0 1g)之间,加入5m L1.5m o l/L氢氧化钾乙醇溶液,加盖涡旋混匀,放置7 02水浴中进行皂化3m i n。皂化完成取出用自来水冷却至室温,加4m L水、5m L正己烷,涡旋提取2m i
