1、GB/T33020一2016前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC271)提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国天津出人境检验检疫局、天津农学院、南开大学。本标准主要起草人：牛春敬、焦克龙、胡佳续、冯洁、廖芳、卜文俊、黄国明、杨韶勇。IGB/T33020-20164方法原理根据苹果瘿蚊危害状，在检疫现场肉眼观察寄主植物，取得幼虫、蛹或成虫，如取得幼虫和蛹需饲养至成虫，解剖雕雄成虫并制成玻片标本，在显微镜下观察，根据形态特征对种类进行判定。5器材和试剂5.1器材显微镜、体视显微镜、干燥箱、解剖针、眼科镊、0号毛笔、解剖穴盘、表
2、面皿、烧杯、载玻片、盖玻片、吸管、医用纱布、橡皮筋、养虫瓶(500mL或1L)、生物培养箱、解剖刀、小剪刀、培养土、标签、封口塑料袋。5.2试剂75%乙醇溶液、95%乙醇溶液、无水乙醇溶液、10%氢氧化钠溶液、二甲苯、苯酚、冰乙酸、香柏油、中性树胶（以上使用化学试剂均为分析纯）。6检测与饲养6.1检测在检疫现场仔细观察寄主植物叶片、果实以及植株所带泥土上是否有幼虫或蛹，如发现有卷叶，则用解剖刀和小剪刀把卷叶剖开查找，如发现幼虫或蛹，连同寄主植物一起装入可封口塑料袋。塑料袋加标签和编号，记录时间、地点、寄主、采集人、虫源地等，带回实验室。6.2饲养现场检查获得的幼虫或蛹需要进一步饲养至成虫再进行鉴定。将带有幼虫的寄主叶片或蛹放人养虫瓶中，期内置放一个盛有培养土的表面皿供幼虫化蛹及羽化，然后将养虫瓶置于温度25一30、相对湿度50%80%的生物培养箱内饲养。7标本的制作准备7.1标本准备饲养羽化后的或直接采集到的瘿蚊成虫，用0号毛笔蘸取75%乙醇溶液将成虫移入75%乙醇溶液中保存，以备制片。7.2雌雄成虫玻片标本苹果瘿蚊雕雄成虫玻片标本制作方法参见附录B。8实验室鉴定8.1瘿蚊科鉴定特征成虫是微小至小型的蚊类昆虫，体长通常0.50mm5.00mm,触角通常较长，翅脉脉序简单，纵脉
