1、I C S 6 5.0 2 0.3 0B 4 4臀鹭中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准G B/T 1 4 9 2 6G B/T 1 4 9 2 6G B/T 1 4 9 2 6G B/T 1 4 9 2 6.1 一1 4 9 2 6.6-2 0 0 1.8-1 4 9 2 6-1 7-2 0 0 1.4 1-2 0 0 1.4 4 一 1 4 9 2 6.4 9-2 0 0 1实验动物微生物学检测方法(2)L a b o r a t o r y a n i m a l-Mi c r o b i o l o g i c a l e x a m i n a t i o n m e t h
2、o d s2 0 0 1 一 0 8 一 2 9 发布2 0 0 2 一 0 5 一 0 1 实施中华人民共和国国 家 质 量 监 督 检 验 检 疫 总 局发 布目录1.刁0门白咋才1尸刁门斗0口口户卜州J峪009户6Q八j洲门乃7曰 11n几八八八乃八JA占八峪叹UL门:Jhh户匕门了月了口U只QG B/T 1 4 9 2 6.1-2 0 0 1 实验动物沙门菌检测方法G B/T 1 4 9 2 6.2-2 0 0 1 实验动物单核细胞增生性李斯特杆菌检测方法G B/T 1 4 9 2 6.3-2 0 0 1 实验动物 耶尔 森菌检 测方法G B/T 1 4 9 2 6.4-2 0 0 1
3、 实验动物皮肤病原真菌检测方法 G B/T 1 4 9 2 6.5-2 0 0 1 实验动物多杀巴斯德杆菌检测方法 G B/T 1 4 9 2 6.6-2 0 0 1 实验动物支气管鲍特杆菌检测方法 G B/T 1 4 9 2 6.8-2 0 0 1 实验动物支原体检测方法 。GB/T 1 4 9 2 6.9-2 0 0 1 实验动物鼠棒状杆菌检测方法 G B/T 1 4 9 2 6.1 0-2 0 0 1 实验动物泰泽病原体检测方法G B/T 1 4 9 2 6.1 1-2 0 0 1 实验动物大肠埃希菌。1 1 5 a,c:K(B)检测方法 G B/T 1 4 9 2 6.1 2-2 0
4、0 1 实验动物 嗜肺巴斯德杆菌检测方法G B/T 1 4 9 2 6.1 3-2 0 0 1 实验动物肺炎克雷伯杆菌检测方法G B/T 1 4 9 2 6.1 4-2 0 0 1 实 验动物 金黄色葡萄球菌检测方法G B/T 1 4 9 2 6.1 5-2 0 0 1 实 验动物 肺炎链球菌检测方法G B/T 1 4 9 2 6.1 6-2 0 0 1 实验动物乙型溶血性链球菌检测方法G B/T 1 4 9 2 6.1 7-2 0 0 1 实验动物绿脓杆菌检测方法G B/T 1 4 9 2 6.4 1-2 0 0 1 实验动物无菌动物生活环境及粪便标本的检测方法G B/T 1 4 9 2 6
5、.4 4-2 0 0 1 实验动物念珠状链杆菌检测方法G B/T 1 4 9 2 6.4 5-2 0 0 1 实验动物布鲁杆菌检测方法G B/T 1 4 9 2 6.4 6-2 0 0 1 实验动物钩端螺旋体检测方法G B/T 1 4 9 2 6.4 7-2 0 0 1 实验动物志贺菌检测方法G B/T 1 4 9 2 6.4 8-2 0 0 1 实验动物结核分枝杆菌检测方法G B/T 1 4 9 2 6.4 9-2 0 0 1 实验动物空肠弯曲杆菌检测方法G B/T 1 4 9 2 6.3-2 0 0 1前言 本标准是对 G B/T 1 4 9 2 6.3-1 9 9 4 实验动物假结核耶氏
6、菌检验方法 和GB/T 1 4 9 2 6.7-1 9 9 4 实验动物小肠结肠炎耶氏菌 的修订。本标准删除了原标准 G B/T 1 4 9 2 6.3-1 9 9 4中“3.1磷酸盐一 胆盐一 鼠李糖蛋白陈增菌液，3.3 D H L琼脂，3.4麦康凯琼脂”和G B/T 1 4 9 2 6.7-1 9 9 4中“3.1 S S琼脂，3.2 D HL琼脂,3.4 0.5%N a C l 溶液、0.5 0 a KO H溶液(NK),3.9 苯丙氨酸培养基”的有关内容。增加了几种培养基以及耶尔森菌属的鉴别特征等相关内容。本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口。本标准起草单位:中国实验动物学会。本
7、标准主要起草人;范薇。本标准于 1 9 9 4年1月首次发布。中 华 人 民 共 和 国 国 家 标准GB/T 1 4 9 2 6.3-2 0 0 1实验动物耶尔森菌检测方法La b o r a t o r y a n i ma l-Me t h o d f o r e x a mi n a t io n o f Y e r s i n i a s p.代替 G B/T 1 4 9 2 6.3-1 9 9 4 G B/T 1 4 9 2 6.7-1 9 9 4范 围本标准规定了实验动物耶尔森菌的检测方法本标准适用于小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、兔、犬和猴假结核耶尔森菌和小肠结肠炎耶尔森菌的检测。2
8、引用标准 下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。G B/T 1 4 9 2 6.4 2-2 0 0 1 实验动物 细菌学检测 标本采集 G B/T 1 4 9 2 6.4 3-2 0 0 1 实验动物 细菌学 检测 染色法、培养 基和试剂3 原理耶尔森菌在培养基上有特定的生长、形态和生理生化特征;菌体抗原与相应抗体结合，产生凝集反4 主 要设 备和材料2 5 C恒温培养箱。3 7 C 普通恒温培养箱生物显微镜月.门乙，J5 培养墓及试荆5.1 改良磷酸盐缓冲液(P B
9、 S).5.2 C a r y-B l a ir 运送培养基。5.3 C I N-1 琼脂。5.4 改良Y琼脂。5.5 克氏双糖铁(K I)琼脂56 糖发酵培养基。5.了 氨基酸脱竣酶培养基。5.8尿素琼脂。5.9 半固体琼脂。5 门0耶 氏菌 多价诊断血清中华人民共和国国家质f监督检验检疫总局2 0 0 1 一 0 8-2 9 批准2 0 0 2一 0 5一 0 1实施G s/T 1 4 9 2 6.3-2 0 0 16 检 测程序改良磷酸盐缓冲液 、二，第一周第二周第三周C I N-I 琼脂、改良Y琼脂平皿分离培养 2 5 胡h挑选可疑菌落3-5 个接种克氏双搪 2 5 C!2 4.4 8
10、 h斜面产酸或不产酸，底层产酸不产气血清玻片凝集试验25d生化试验染色镜检半固体动力试验报 告了 操 作步骤了.1采样 采取回盲部内容物、粪便或肛拭子。了.2 分离培养7.2.1 直接分离培养 将已接种的C I N-1琼脂、改良Y琼脂置 2 5 培养4 8 h o7.2.2 增菌分离培养 将已接种的改良磷酸盐缓冲液置 4 C 培养三周，每周转种 C I N-I 琼脂和改良Y琼脂平皿一次，共三次，平皿置2 5 培养4 8 h o7.3 鉴定了.31 菌落特征 本菌在 C I N一 工 琼脂、改良Y琼脂上形成边缘半透明或透明，中心呈深红色，表面湿润凸起的“牛眼 1 1G s/T 1 4 9 2 6
11、.3-2 0 0 1状”菌落。7.3.2 菌体特征 耶尔森菌为革兰阴性球杆菌,(0.8 -6.0)p m X0.8 p m大小7.13 本菌接种于克氏双糖铁琼脂，2 5 培养 4 8 h，斜面产酸或不产酸，底层产酸，硫化氢阴性。7.3-4 将本菌接种两支半固体，其中一支放 2 5 C，另外一支放 3 7 C 培养 2 4 4 8 h后观察结果，2 5 C 培养动力阳性，3 7 C动力阴性。了.3.5生化试验 所有的生化反应均在 2 5 C培养。本菌的主要生化特性以及与其他菌的鉴别见表 t o 表 1 耶尔森菌属的鉴别特性项目鼠疫耶尔森菌假结核耶尔森菌小肠结肠炎耶尔森菌运动性(2 5 C)一+赖氮酸脱竣酶鸟氨 酸 脱 叛 酶一一十尿 素一+卞一 木 糖 昔 酶+一西蒙氏柠檬酸盐(2 5 C靛 基 质 产 生一一d鼠 李 糖一+一蔗 糖一一+纤 维 二糖一一+密 二 糖a+一山 梨 糖一一+山梨 醇一一+棉 子糖一a一丰:阳性;一:阴性;d:不定;7.3.6 血 清玻 片凝集试验 阳性8 结 果报告凡符合上述各项检测结果者作出阳性报告，不符合者作出阴性报告。
