1、ICs67.040C53中华人民共和国国家标准GB/T5009.82-2003代替GB/T12388-1990食品中维生素A和维生素E的测定Determination of retinol and tocopherol in foods2003-08-11发布2004-01-01实施中华人民共和国卫生部中国国家标准化管理委员会发布591GB/T5009.82一2003食品中维生素A和维生素E的测定1范围本标准规定了食品中维生素A和维生素E的测定方法。本标准适用于食品中维生素A和维生素E的测定。本标准检出限分别为：Va:0.8g;a-E:91.8ng;Y-E:36.6ng;0-E:20.6ng。
2、第一法高效液相色谱法2原理试样中的维生素A及维生素E经皂化提取处理后，将其从不可皂化部分提取至有机溶剂中。用高效液相色谱C反相柱将维生素A和维生素E分离，经紫外检测器检测，并用内标法定量测定。3试剂3.1无水乙醚：不含有过氧化物。3.1.1过氧化物检查方法：用5mL乙醚加1mL10%碘化钾溶液，振摇1min,如有过氧化物则放出游离碘，水层呈黄色或加4滴0.5%淀粉溶液，水层呈蓝色。该乙醚需处理后使用。3.1:2去除过氧化物的方法：重蒸乙醚时，瓶中放人纯铁丝或铁末少许。弃去10%初馏液和10%残馏液。3.2无水乙醇：不得含有醛类物质。3.2.1检查方法：取2mL银氨溶液于试管中，加人少量乙醇，摇
3、匀，再加人氢氧化钠溶液，加热，放置冷却后，若有银镜反应则表示乙醇中有醛。3.2.2脱醛方法：取2g硝酸银溶于少量水中。取4g氢氧化钠溶于温乙醇中。将两者倾入1L乙醇中，振摇后，放置暗处两天（不时摇动，促进反应），经过滤，置蒸馏瓶中蒸馏，弃去初蒸出的50L。当乙醇中含醛较多时，硝酸银用量适当增加。3.3无水硫酸钠。3.4甲醇：重蒸后使用。3.5重蒸水：水中加少量高锰酸钾，临用前蒸馏。3.6抗坏血酸溶液(100g/L):临用前配制。3.7氢氧化钾溶液(1+1)。3.8氢氧化钠溶液(100g/L)。3.9硝酸银溶液(50g/L)。3.10银氨溶液：加氨水至硝酸银溶液(3.9)中，直至生成的沉淀重新溶解为止，再加氢氧化钠溶液(3.8)数滴，如发生沉淀，再加氨水直至溶解。3.11维生素A标准液：视黄醇（纯度85%）或视黄醇乙酸酯（纯度90%）经皂化处理后使用。用脱醛乙醇溶解维生素A标准品，使其浓度大约为1mL相当于1g视黄醇。临用前用紫外分光光度法标定其准确浓度。3.12维生素E标准液：a-生有酚（纯度95%），Y-生育酚(95%)，8-生育酚（纯度95%）。用脱醛乙醇分别溶解以上三种维生素E标准品，使其浓度大约为1L相当于1mg。临用前用紫外分光光度计分别标定此三种维生素E溶液的准确浓度。593
