1、农业部1782号公告一1一2012(5.3)调pH至8.0，加水定容至100mL。在103.4kPa(121)条件下灭菌20min。5.51mol/L三羟甲基氨基甲烷-盐酸溶液(pH8.0):称取121.1g三羟甲基氨基甲烷(Tis)溶解于800mL水中，用盐酸(HCl)调pH至8.0，加水定容至1000mL。在103.4kPa(121)条件下灭菌20 min.5.6TE缓冲液(pH8.0):分别量取10mL三羟甲基氨基甲烷一盐酸溶液(5.5)和2mL乙二铵四乙酸二钠溶液(5.4)，加水定容至1000mL。在103.4kPa(121)条件下灭菌20min。5.750TAE缓冲液：称取242.2
2、g三羟甲基氨基甲烷(Tis),先用500mL水加热搅拌溶解后，加人100mL乙二铵四乙酸二钠溶液(5.4)。用冰乙酸调pH至8.0，然后加水定容至1000mL。使用时，用水稀释成1XTAE。5.8加样缓冲液：称取250.0mg溴酚蓝，加人10mL水，在室温下溶解12h:称取250.0mg二甲基苯腈蓝，加10mL水溶解：称取50.0g蔗糖，加30mL水溶解。混合以上三种溶液，加水定容至100mL,在4下保存。5.9DNA分子量标准：可以清楚地区分100bp1000bp的DNA片段。5.10 dNTPs混合溶液：将浓度为I0mmol/L的dATP、dTTP、dGTP、dCTP四种脱氧核糖核苷酸溶液
3、等体积混合。5.11 Taq DNA聚合酶、PCR反应缓冲液及25mmol/L氯化镁溶液。5.12 Lectin基因引物：leetin-F:5-GCCCTCTACTCCACCCCCATCC-3lectin-R:5-GCCCATCTGCAAGCCTTTTTGTG-3预期扩增片段大小为118bp。5.13356043转化体特异性序列引物：356043-F:5-CTTTTGCCCGAGGTCGTTAG-3356043-R:5-GCCCTTTGGTCTTCTGAGACTG-3预期扩增片段大小为145bp(参见附录A)。5.14引物溶液：用TE缓冲液(5.6)或水分别将上述引物稀释到10mol/L。5.15石蜡油。5.16PCR产物回收试剂盒5.17DNA提取试剂盒。6仪器6.1分析天平：感量0.1g和0.1mg。6.2PCR扩增仪.6.3电泳槽、电泳仪等电泳装置。6.4紫外透射仪。6.5凝胶成像系统或照相系统。6.6重蒸馏水发生器或纯水仪。6.7其他相关仪器和设备。7操作步骤7.1抽样按NY/T672和NY/T673的规定执行。建筑321一标准自询下载网w,jz321.ne
