1、农业部2483号公告一2一2016饲料中苯巴比妥钠的测定高效液相色谱法1范围本标准规定了饲料中苯巴比妥钠含量测定的高效液相色谱法。本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料和添加剂预混合饲料中苯巴比妥钠的测定。本标准的检出限为0.5mg/kg,定量限为1mg/kg。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T14699.1饲料采样GB/T20195动物饲料试样的制备农业部2483号公告一4一2016饲料中苯巴比妥钠的
2、测定液相色谱一串联质谱法3原理试样中苯巴比妥钠在酸性条件下转化为苯巴比妥，经提取、净化和浓缩后，高效液相色谱仪测定，外标法定量。根据测得的苯巴比妥含量计算苯巴比妥钠含量。4试剂和材料除非另有说明，所有试剂均为分析纯和符合GB/T6682规定的一级水。4.1甲醇：色谱纯。4.2乙腈：色谱纯。4.3正己烷。4.4盐酸溶液：c(HCl)=0.5mol/L。吸取42mL盐酸，用水稀释并定容至1000mL。4.5乙酸铅溶液：22g/L。称取22g乙酸铅，用约300mL水溶解并定容至1000mL。4.62%甲醇水溶液：取2mL甲醇，用水定容至100mL。4.720%甲醇水溶液：取20mL甲醇，用水定容至1
3、00mL。4.8甲醇盐酸溶液：甲醇十0.5mol/L盐酸溶液=20+80。4.9氨化甲醇：取5mL氨水，加甲醇定容至100mL。4.10苯巴比妥标准品：纯度99.0%。4.11苯巴比妥标准储备溶液：称取苯巴比妥标准品100mg(精确至0.01mg),用甲醇溶解，定容至100mL,配成浓度为1mg/mL的标准储备溶液。28保存，有效期3个月。4.12苯巴比妥标准中间溶液：准确移取苯巴比妥储备溶液10mL,用甲醇定容至100mL,配成浓度为100ug/mL的苯巴比妥标准中间溶液。28保存，有效期1个月。4.13苯巴比妥标准工作溶液：分别准确移取苯巴比妥标准中间溶液适量，用20%甲醇水溶液(4.7)稀释定容，配制成浓度分别为0.5g/mL、1.0g/mL、2.0g/mL、5.0g/mL、10.0g/mL、20.0ugmL、50.0g/mL的标准工作溶液。现用现配。4.14固相萃取柱：亲水亲脂平衡固相萃取柱，60mg/3L:或其他性能类似的固相萃取柱。
