1、GB/T36775-2018坏死,严重时,叶片脱落;果实病斑圆形至不规则形,离散或联合,最大直径可达3cm4cm,嫩果症状常从增生产生瘤状病斑开始,边缘有黄色晕圈,成熟果实的病斑一般是平坦的,病部木栓化(症状图参见附录B图B.1)。7.2菌落特征在V8培养基平板上2428培养30d后,菌落平铺,呈灰白色,气生菌丝旺盛,绒毛状。培养后期,从菌落中央开始变成灰橄榄色,黑灰色至黑色,逐渐菌落边缘菌丝体颜色也逐渐加深,菌落中央隆起,质地逐渐变硬,炭质,表面凹凸不平,菌落背面为深墨绿色。7.3病菌形态分生孢子梗从气孔生出,浅褐色至褐色,具多个隔膜,平滑,宽34m7m,高27um240um,分生孢子梗单生
2、、丛生或形成分散的宽的联丝体,无分枝,直径为12m45m,通常从子座上长出,子座直径为30m60um。分生孢子顶生或顶侧生,单生或2个4个多孢链状生,平滑,透明至浅褐色,圆柱形或稍弯,顶部圆形,基部稍平钝至弧形弯曲,1个6个(通常3个4个)分隔,23m87um长,分生孢子4m5um(4m6.5m)宽,基部24m3um宽。产孢细胞末端具轻微膝状弯曲,产孢位置具明显的孢痕疤,但不增厚(病菌形态特征图参见附录C图C.1)。7.4致病性测定分离得到的病菌分离物得到柯赫氏法则验证。即以柑橘果实为接种材料,利用6.2.4方法接种30d后,柑橘果实出现干腐、组织硬化等症状。从病部得到的分离物培养特征、形态特
3、征与供试接种菌株一致。8结果判定符合下列任一种情况均可判定为检出柑橘斑点病菌:如果病部有明显的病状和病征,进行分离培养后,病菌形态学特征和菌落特征与7.1和7.2吻合。如果病部有病状但无病征,经保湿培养和(或)分离培养所产生的病菌形态学特征和菌落特征与7.1、7.2吻合,致病性测定结果符合7.4。9样品和资料的保存9.1样品的保存检验为阳性的样品标注来源、寄主、分离时间、鉴定人后置于4冰箱保存;病菌纯培养菌株在含20%甘油的冻存管中一80保存,或将菌株转接在PDA斜面上培养,待菌丝体长满斜面后,置于4下保存,并定期(约180d)转管。对鉴定为柑橘斑点病菌的样品至少保存6个月,以备复核谈判和仲裁,样品保存期满后,需无害化处理。