1、农业部2031号公告一13一2013转基因植物及其产品成分检测转淀粉酶基因玉米3272及其衍生品种定性PC方法1范围本标准规定了转淀粉酶基因玉米3272转化体特异性定性PCR检测方法。本标准适用于转淀粉酶基因玉米3272及其衍生品种以及制品中3272转化体成分的定性PR检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法NY/T672转基因植物及其产品检测通用要求农业部2031号公告一19一2013转基因植物及其产品检测抽样农
2、业部1485号公告一4一2010转基因植物及其产品成分检测DNA提取和纯化3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1zSSIb基因zSSb gene编码玉米淀粉合酶异构体zSTS-2的基因。3.23272转化体特异性序列event-specific sequence of3272玉米基因组与3272玉米外源插人片段5的连接区序列，包括玉米基因组部分序列和转化载体部分序列。4原理根据转淀粉酶基因玉米3272转化体特异性序列设计特异性引物，对试样DNA进行PCR扩增。依据是否扩增获得预期的DNA片段，判断样品中是否含有3272转化体成分。5试剂和材料除非另有说明，仅使用分析纯试剂和重蒸馏水或符合GB/T6682规定的一级水。5.1琼脂糖。5.210g/L溴化乙锭溶液：称取1.0g溴化乙锭(EB),溶于100mL水中，避光保存。警告一溴化乙锭有致癌作用，配制和使用时应戴一次性手套操作并妥善处理废液。5.310mol/L氢氧化钠溶液：在160mL水中加人80.0g氢氧化钠(NaOH),溶解后，冷却至室温，再加水定容到200mL。5.4500mmol/L乙二铵四乙酸二钠溶液(pH8.0):称取18.6g乙二铵四乙酸二钠(EDTA-Na2),加1
