1、SN/T4042-2014出口酒中叠氮化钠的测定方法1范围本标准规定了出口酒中叠氨化钠的液相色谱和离子色谱的测定方法。本标准适用于发酵型、蒸馏型及配制型酒中叠氮化钠含量的测定。第一法液相色谱法2方法提要样品中的叠氮化钠在pH=4的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲体系中与3,5-二硝基苯甲酰氯衍生化反应，经液相色谱分离，用紫外检测器检测，外标法定量。3试剂和材料除另有规定外，试剂均为分析纯，实验用水符合GB/T6682规定的级水。3.1柠檬酸。3.2柠檬酸钠。3.3乙腈（色谱纯）。3.4叠氨化钠标准物质：叠氮化钠，纯度大于或等于99.0%。3.5叠氨化钠标准储备液：准确称取适量叠氮化钠（精确到0.0001g
2、),用水配制成浓度为1.0mg/mL的标准储备液。该溶液于0保存，保存期6个月3.63,5-二硝基苯甲酰氯溶液：0.1g3,5二硝基苯甲酰氯溶于100mL乙腈。3.7pH=4的柠檬酸-柠檬酸钠缓神溶液：l31nL0.1mol/L柠檬酸溶液+69mL0.1mol/L柠檬酸钠溶液。警告：叠氨化钠属于危险物，长期接触对人体有害，配制和使用该试剂时应配有防护措施，保证安全。4仪器和设备4.1液相色谱仪：配有紫外检测器。4.2天平：感量0.0001g。4.3旋涡震荡器。4.4比色管：10mL,具塞。5测定步骤5.1样品处理移取2mL样品置于10mL比色管中（若像啤酒含有气泡，先超声脱气），加3mLpH=
3、4的柠檬SN/T 4042-2014酸-柠檬酸钠缓冲溶液，再加3mL乙腈，摇匀，加入2mL3,5-二硝基苯甲酰氯，定容至10mL,剧烈振荡2min,过有机膜，待测。5.2标准系列工作液配制准确吸取适量叠氮化钠标准储备液(3.5)，按5.1操作。配制成标准系列工作液，叠氮化钠的浓度依次为0.06 mg/L、0.1mg/L、0.2 mg/L、0.4 mg/L、1mg/L。5.3测定5.3.1液相色谱条件5.3.1.1色谱柱：C1柱，柱长：250mm;内径：4.6mm;粒径：5m,或性能相当者。5.3.1.2流动相：乙腈：柠檬酸钠溶液(10mmol/L)(50+50,体积比)。5.3.1.3流速：1
4、.0mL/min。5.3.1.4柱温：25。5.3.1.5检测波长：254nm。5.3.1.6进样量：20L。5.3.2液相色谱测定外标法定量：标准工作溶液(5.2)和样液等体积进样测定。以标准溶液中被测组分峰面积为纵坐标，标准溶液中被测组分浓度为横坐标绘制标准工作曲线，用标准工作曲线对样品进行定量，标准工作溶液和样液中待测物响应值均应在仪器检测线性范围内。在上述色谱条件下，叠氮化钠的保留时间约为11.13min。标准品的色谱图参见图A.1。5.3.3空白试验除不加试样外，按上述测定步骤进行。6结果计算和表述按式(1)计算试样中叠氮化钠的含量。X=(c-co)XViV2(1)式中：X试样中叠氮化钠的含量，单位为毫克每升(mg/L);c从标准工作曲线得到的叠氮化钠溶液浓度，单位为毫克每升(mg/L);c。从标准工作曲线得到的空白试验中叠氮化钠溶液浓度，单位为毫克每升(mg/L);V最终样液的定容体积，单位为毫升(mL);V2所取样液量，单位为毫升(mL)。计算结果保留到小数点后三位。7测定低限叠氮化钠的测定低限为0.06mg/L。2
