1、ICS13.060C 51DB37山东省地方标准DB37/T 41452020水质丙烯酰胺的测定液相色谱-串联质谱法Water qualityDetermination of acrylamideLiquid chromatography-Tandem mass spectrometry2020 - 09 - 25发布2020 - 10 - 25实施山东省市场监督管理局发布DB37/T 41452020目次前言II1范围12规范性引用文件13方法原理14试剂和材料15仪器与设备26样品27分析步骤28结果计算与表示49精密度与准确度510质量保证和质量控制5前言本标准按照GB/T 1.1200
2、9给出的规则起草。本标准由山东省住房和城乡建设厅提出并组织实施。本标准由山东省城镇给水排水标准化技术委员会归口。本标准起草单位：山东省城市供排水水质监测中心、国家城市供水水质监测网青岛监测站、国家城市供水水质监测网杭州监测站、山东省分析测试中心、山东省济南生态环境监测中心、国家城市供水水质监测网武汉监测站。本标准主要起草人：辛晓东、贾瑞宝、孙韶华、赵清华、许燕、宋艳、王晓芳、黄允河、赵汝松、张厚勇、陈露、葛璇、王晓利、李小敏、梁玉。5水质丙烯酰胺的测定液相色谱-串联质谱法警告：实验中使用的溶剂和试剂均具有一定的毒性，对健康具有潜在的危害，应尽量避免与这些化学品的直接接触。样品制备过程应在通风橱
3、中进行，操作时应按规定要求佩戴防护器具,避免接触皮肤和衣物。1 范围本标准规定了测定生活饮用水及其水源水中丙烯酰胺的液相色谱-串联质谱法。本标准适用于生活饮用水及其水源水中丙烯酰胺的测定。进样量10L时，本标准的方法检出限为0.036g/L，测定下限为0.15g/L。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 5750.22006生活饮用水标准检验方法水样的采集与保存GB/T 5750.32006生活饮用水标准检验方法水质分析质量控制GB/T 32465
4、化学分析方法验证确认和内部质量控制要求GB/T 33087仪器分析用高纯水规格及试验方法HJ/T 91地表水和污水监测技术规范HJ/T 164地下水环境监测技术规范3 方法原理样品经0.22m滤膜过滤后直接进样，经液相色谱仪分离后进入串联质谱仪，采用多反应监测（MRM）模式，根据保留时间和特征离子峰进行定性分析，内标法定量分析。4 试剂和材料4.1 一次性针头过滤器：0.22m，聚四氟乙烯（PTFE）材质。4.2 一次性注射器：2.5mL。4.3 高纯水：水质应满足GB/T 33087的规定。4.4 甲醇：色谱纯。4.5 载气：高纯氮，纯度99.999%。4.6 丙烯酰胺标准溶液：=1000m
5、g/L，溶剂为甲醇，有证标准物质。4.7 丙烯酰胺同位素（D3-丙烯酰胺）标准溶液：=1000mg/L，溶剂为甲醇，有证标准物质。4.8 丙烯酰胺标准贮备液：=10.0mg/L。取1.00mL丙烯酰胺标准溶液（4.6），用甲醇（4.4）稀释并定容至100mL，配制10.0mg/L丙烯酰胺标准贮备液。于4以下冷藏密封避光保存。4.9 D3-丙烯酰胺标准贮备液：=10.0mg/L。取1.00 mL D3-丙烯酰胺标准溶液（4.7），用甲醇（4.4）稀释并定容至100mL，配制10.0 mg/L D3-丙烯酰胺标准贮备液。于4以下冷藏密封避光保存。4.10 丙烯酰胺标准使用液：=10.0g/L。取1
6、00L丙烯酰胺标准贮备液（4.8），用高纯水（4.3）稀释并定容至100mL，配制10.0g/L丙烯酰胺标准使用液。4.11 D3-丙烯酰胺标准使用液：=10.0g/L。取100L D3-丙烯酰胺标准贮备液（4.9），用高纯水（4.3）稀释并定容至100mL，配制10.0g/L D3-丙烯酰胺标准使用液。5 仪器与设备5.1 液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源。5.2 色谱柱：C18色谱柱或其他性能等效的色谱柱。5.3 样品瓶：2mL。5.4 容量瓶：100mL和10mL。5.5 采样瓶：棕色玻璃瓶，具玻璃塞。5.6 微量注射器：1000L。6 样品6.1 样品的采集与保存按照HJ/T 9
7、1和HJ/T 164的相关规定采集样品。用采样瓶（5.5）采集样品。按照GB/T 5750.22006的相关规定保存样品。样品采集后在4以下冷藏保存，24h内完成水样过滤处理并上机测试。若水样中存在残留氯，加入抗坏血酸去除余氯。6.2 试样制备样品经一次性针头过滤器（4.1）过滤，取样品于10mL容量瓶中，加入400L D3-丙烯酰胺标准使用液（4.11），用样品定容至刻度。置于进样瓶中，待测。如水样浓度较高或基体复杂，可将样品适当稀释后，再经过一次性针头过滤器过滤。6.3 空白试样制备用高纯水（4.3）代替样品，按照与试样制备（6.2）相同的步骤制备空白试样。7 分析步骤7.1 色谱分析条件
8、7.1.1 流动相：A相甲醇（4.4），B相水（4.3），A:B=10:90（V:V），等度洗脱。7.1.2 流速：0.3mL/min。7.1.3 柱温：30。7.1.4 进样体积：10L。7.2 质谱分析条件7.2.1 离子源：电喷雾离子源，正离子模式。7.2.2 离子源温度：350。7.2.3 扫描方式：MRM，多反应监测条件见表1。表1 质谱分析参考条件物质名称母离子子离子FragmentVCEV丙烯酰胺72.155.143927.14317D3-丙烯酰胺755844943.844157.3 校准曲线的绘制7.3.1 本方法使用内标法定量。7.3.2 校准系列的配制：取5个10mL容量瓶
9、，用微量注射器（5.6）依次准确加入200L、500L、1000L、1500L和2000L丙烯酰胺标准使用液（4.10）及400L D3-丙烯酰胺标准使用液（4.11），用高纯水（4.3）定容至刻度，配制浓度为0.20g/L、0.50g/L、1.00g/L、1.50g/L和2.00g/L的校准曲线系列。现用现配。7.3.3 按照质量浓度从低到高依次进样，以标准系列溶液中目标组分的浓度与内标物浓度的比值为横坐标，以其对应的峰面积与内标物峰面积的比值为纵坐标，建立校准曲线。7.4 试样测定7.4.1 采用自动进样器进样，进样量为10L。7.4.2 按照与校准曲线的绘制（7.3）相同的步骤进行试样（
10、6.2）的测定。7.4.3 丙烯酰胺和D3-丙烯酰胺MRM色谱图见图1、图2所示。图1 丙烯酰胺MRM色谱图图2 D3-丙烯酰胺MRM色谱图7.5 空白试验按照与试样测定（7.4）相同的步骤进行空白试样（6.3）的测定。8 结果计算与表示8.1 定性结果根据丙烯酰胺和D3-丙烯酰胺MRM色谱图中的保留时间和特征离子对进行定性分析。8.2 定量结果根据计算公式（1）计算样品中组分的含量，结果以微克每升（g/L）表示。丙烯酰胺的定量离子对为72.155.1，D3-丙烯酰胺的定量离子对为7558。测定结果位数的保留与测定下限一致，最多保留三位有效数字。(1)式中： 水样中目标化合物的质量浓度，单位为
11、微克每升（g/L）； 水样中同位素内标化合物的质量浓度，单位为微克每升（g/L）； 水样中目标化合物对应的离子峰面积； 水样中同位素内标化合物对应的离子峰面积；目标化合物的平均相对响应因子；稀释倍数。9 精密度与准确度9.1 精密度5家实验室分别测定浓度为0.1g/L2.0g/L的纯水加标样品，实验室内相对标准偏差为2.0%12%；实验室间相对标准偏差为6.8%12%；重复性限为0.029g/L、0.07g/L和0.35g/L；再现性限为0.042g/L、0.078g/L和0.80g/L。9.2 准确度5家实验室分别测定地表水、地下水及生活饮用水加标样品。加标浓度为0.1g/L2.0g/L，加标回收率为85.6%119%。10 质量保证和质量控制 10.1 空白试验每批次样品应做空白试验，测定结果不能超过方法的检出限。10.2 校准曲线要求分析样品之前，应建立能够覆盖样品浓度范围的至少5个浓度点的校准曲线，曲线的相关系数r2应大于0.995。10.3 平行样平行双样测定结果的相对偏差满足GB/T 5750.32006的要求。10.4 基体加标基体加标样品的加标回收率范围满足GB/T 32465的要求。_
