1、 ICS 65.020 CCS B 00 四川省地方标准 DB51/T 29652022 DB51 濒危野生动物及其制品物种鉴定规范 2022-12-27 发布 2023-02-01 实施 四 川 省 市 场 监 督 管 理 局 发布 Specification for species identification of endangered wildlife and their prudocts DB51/T 29652022 I 目次 前言.III 1 范围.1 2 规范性引用文件.1 3 术语和定义.1 4 缩略语.2 5 物种鉴定原则.2 5.1 宏观形态学指标.2 5.2 微观形态学
2、指标.2 5.3 生物化学指标.2 5.4 分子生物学指标.2 6 物种鉴定一般原则.2 7 实验室环境要求.2 7.1 实验室基本要求.3 7.2 实验室区域设置原则.3 8 仪器设备和试剂要求.3 8.1 实验室基本要求.4 8.2 实验耗材和试剂.4 9 人员资质要求.4 10 鉴定程序.4 10.1 样品受理.5 10.2 鉴定原则.5 10.3 样品鉴定.5 10.4 检测样品的保存和处理.6 10.5 结果分析.6 10.6 鉴定的复核.6 10.7 鉴定质量控制.6 10.8 鉴定报告起草.7 10.9 鉴定报告的审核、签发.7 11 方法确认.7 11.1 标准方法确认.7 1
3、1.2 非标方法确认.7 12 档案资料.7 12.1 鉴定档案资料.7 12.2 操作手册.8 12.3 说明书类.8 12.4 方法确认记录.8 12.5 管理档案.8 DB51/T 29652022 II 12.6 其他资料.8 12.7 电子化管理.8 12.8 保密.8 13 生物安全预防与处理.8 13.1 检测样品.9 13.2 检验人员.9 13.3 检验区域.9 14 安全防护.9 15 国际国内合作与援助.9 16 持续能力提升.9 附 录A(资料性附录)CITES 公约目录动物部分.10 DB51/T 29652022 III 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准
4、化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件由中华人民共和国成都海关提出、归口并解释。本文件起草单位：成都海关技术中心、成都农业科技职业学院、成都大学、中华人民共和国成都海关、中国海关科学技术研究中心。本文件主要起草人：张婧、杨苗、安微、林华、谢礼、邬绪龙、蒲静、肖艳、郑晶、高志强、杜思乐、陈世界、严玉宝。本文件为首次发布。DB51/T 29652022 1 濒危野生动物及其制品物种鉴定规范 1 范围 本文件规定了定濒危野生动物及其产品物种鉴定时物种鉴定的一般原则、物种鉴定指标、仪器设备和试剂要求、实验室环境要求、人员资质要求、鉴定程序、方法确认、档案管理、污染预防与处理
5、、安全防护、国际国内合作与援助、持续能力提升等内容。本文件适用于濒危野生动物及其制品物种的鉴定。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 19489 实验室生物安全通用要求 GB/T 27025 检测和校准实验室能力的通用要求 GB/T 27401 实验室质量控制规范动物检疫 GA/T 382 法庭科学DNA实验室规范 NY/T 541 动物疫病实验室检验采样方法 LY/T 2501 野生动物及其产品的物种鉴定规范 SN/T 4
6、495 检验检疫实验室危险品管理规范 SN/T 4626 DNA条形码物种鉴定操作规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。3.1 濒危野生动物 endangered wildlife 指指所有由于物种自身的原因或受到人类活动或自然灾害的影响，而有灭绝危险的野生动物物种。从广义上讲，濒危动物泛指珍贵、濒危或稀有的野生动物。从野生动物管理学角度讲，濒危动物是指濒危野生动植物种国际贸易公约附录所列动物，以及国家和地方重点保护的野生动物。3.2 濒危野生动物制品 endangered wildlife products 前款所指濒危野生动物的任何部分及其已全部或部分加工的衍生物。3.3 物种
7、鉴定 species Identification 采用形态学、生物化学、分子生物学等检验技术，对濒危野生植物及其产品进行分类地位（科、属、种）的 认定。3.4 检测样品材 DB51/T 29652022 2 委托单位（人）提供的、用作物种鉴定的濒危野生动物及其产品。3.5 对照 control 用一组或一类已知样品用于濒危野生植物及其产品鉴定的有效性和准确性的监测。4 缩略语 BOLD：生命条形码数据系统(The Barcode of Life Data System)NCBI：美国国立生物技术信息中心(National Center for Biotechnology Informatio
8、n)CITES：濒危野生动植物种国际贸易公约（the Convention on International Trade in Endangered Species of Wild Fauna and Flora）CITES：濒危野生动植物种国际贸易公约（the Convention on International Trade in Endangered Species of Wild Fauna and Flora）5 物种鉴定原则 5.1 宏观形态学指标 以物种典型或特异的形态特征作为鉴定指标，具体鉴定指标参见LY/T 2501。5.2 微观形态学指标 根据兽毛、羽毛、牙齿、角、蹄、喙等
9、组织的典型或特异性的微观形态学指标。5.3 生物化学指标 以物种典型或特异的生化特征、在阴性和阳性严格对照下作为鉴定指标。5.4 分子生物学指标 以物种DNA长度多态性和序列多态性作为分子生物学指标。应经过有效性验证 6 物种鉴定一般原则 6.1 根据不同检测样品特性进行初步判断，缩小目标物种范围，选择准确鉴定方法。6.2 对宏观不易看清的或肉眼不能看到的微观结构特征的检测样品，可通过显微镜镜检法以鉴定物种种属。6.3 对各部分组织成份理化性质存在差异的检测样品，可通过理化检验法以鉴定物种种属。6.4 形态学方法无法认定，但能够提取 DNA 的样品，可采用分子生物学方法进行鉴定。6.5 形态学
10、方法中具有唯一性的特征指标可以单独使用，如指标特征不具有唯一性，则应联合使用多个以上指标进行鉴定。6.6 当一种分子生物学方法不能可靠地确认样品为物种时，应使用 2 种或以上方法进行联合印证。6.7 必要时，可形态学方法和理化方法及分子生物学方法结合使用。7 实验室环境要求 DB51/T 29652022 3 7.1 实验室基本要求 7.1.1 实验室应设立完善的组织、质量保障和管理体系。7.1.2 实验室的各功能分区应布局合理，通风良好、光线适度、设备完善、达到鉴定的要求。7.1.3 配备生物安全设施，确保人员不受野生动物疫病的侵害。7.2 实验室区域设置原则 7.2.1 实验室区域设置的一
11、般原则 区域设置应符合鉴定实验流程，避免实验过程中检测样品和试剂受到污染，确保鉴定结果准确可靠。7.2.2 基本区域设置 7.2.2.1 宏观形态学鉴定、微观形态学鉴定、生物化学鉴定、免疫学鉴定和分子生物学鉴定应分别设置鉴定区域。7.2.2.2 微观形态学鉴定室和生物化学鉴定室应分别设置样品制备和鉴定两个基本区域。7.2.2.3 分子生物学鉴定实验室应分区，包括样品处理室、核酸提取室、PCR 反应体系配制室（区）、加样室（区）、核酸扩增室、产物分析室、数据分析室。7.2.3 其他区域设置 7.2.3.1 接样室 主要用于检测样品的受理，包括登记、检测样品的初检和照相、录像、固定等，以及来客的接
12、待。7.2.3.2 样品贮存室 主要用于送检测样品料和参考样品的妥善保管和贮存。7.2.3.3 试剂贮存和配制室 主要用于试剂的贮存、配制等。7.2.3.4 数据分析室 主要用于鉴定结果的分析、比对、鉴定报告的形成等。7.2.3.5 档案室 主要用于鉴定资料、质量体系文件、实验操作相关资料的存档保存等：a)实验室应配置与其所应用的检验方法所必需的实验耗材和试剂，且应是具有资质的厂家生产的合格产品。b)所有实验耗材和试剂应处于保质期或有效期内。c)商品试剂盒应标明到货日期和有效期。实验室自行配制的试剂应在容器上标明名称、浓度、配 制时间、配制人、保存条件、失效日期等相关内容。d)每一批次购进的耗
13、材和试剂应进行符合性验证等质控检验。8 仪器设备和试剂要求 DB51/T 29652022 4 8.1 实验室基本要求 8.1.1 实验室应设立完善的组织机构、质量保障和管理体系。8.1.2 实验室的各功能分区应布局合理，通风良好、光线适度、设备完善，达到检验鉴定的要求。8.1.3 配备生物安全设施，确保人员不受野生动物疾病的侵害。8.1.4 仪器设备基本配置应符合下列要求。a)形态学鉴定实验室设备配置：体视显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、放大镜、电锯、电钻、手提紫外光灯、LED 手电、照相机、防护眼镜、防护面罩、破拆工具、切割工具、打磨工具、不同量程的称量工具和测量工具等。b)生物化学鉴定实
14、验室设备配置：气象色谱仪、液相色谱仪、恒温水浴箱、酸度计、电热干燥箱、生化培养箱、恒温磁力搅拌器、超声波清洗机、可见光分光光度计、紫外可见分光光度计、低温离心机、通风橱、组织匀浆机、电子天平、分析天平等。c)免疫学鉴定实验室设备配置：酶标仪、酶标板恒温振荡器、自动洗板机、微量振荡器、数显恒温水箱、微量移液器、超纯水器、高压灭菌锅、d)分子生物学鉴定实验室设备配置：遗传分析仪、冷冻研磨仪、PCR 仪、荧光定量 PCR 仪、电泳仪、凝胶分析成像系统、天平、冷冻离心机、水浴锅、微量加样器（不同规格的）、超低温冰箱、冰柜、超纯水器、高压灭菌锅、漩涡振荡器、微量核酸定量仪、生物安全柜、超净台以及相关的专
15、业分析软件等。8.1.5 鉴定方法所必需的关键（核心）设备所产生的数据或结果应能够被同行认可。8.1.6 仪器设备应定期进行检查、保养和校准。8.1.7 新购置的仪器设备、或原有仪器设备维修保养后，在使用前应当进行校准和测试。8.2 实验耗材和试剂 8.2.1 实验室应配置与其所应用的鉴定方法所必需的实验耗材和试剂。8.2.2 所有实验耗材和试剂应处于保质期或有效期内。8.2.3 商品试剂盒应标明有效期，试剂盒的使用应有记录。8.2.4 实验室自行配制的试剂应在容器上标明名称、浓度、配制时间、配制人、保存条件、失效日期等相关内容。8.2.5 每一批次购进的耗材和试剂应进行质控检验。9 人员资质
16、要求 9.1 工作人员包括实验室负责人、技术负责人、质量负责人、鉴定人和鉴定助理等应遵守国家有关法律法规，诚实守信，有良好的职业道德操守，严格遵守行业主管部门相关规定和要求，严格保守秘密。9.2 技术负责人应具备博士学位或具有中级以上专业技术职称，相关专业，五年以上相关工作经验，具备形态学和分子生物学相关专业背景和熟练操作技能，了解濒危动物物证鉴定领域的前沿技术。9.3 鉴定人应具备中级以上专业技术职称，相关专业，在相关实验室工作一年以上，并通过能力验证或实验室间比对等测试。9.4 鉴定助理应具备相关专业背景具有 6 个月以上相关技术培训的经历。9.5 必要时，技术负责人和鉴定人按照有关要求有配合相关部门履行结果解释和出庭义务。10 鉴定程序 DB51/T 29652022 5 10.1 样品受理 10.1.1 鉴定实验室可具备配合有关部门进行现场取样的能力，现场取样技术要求参照相关指南。10.1.2 建立样品接收、取样、使用、保存、样品处置相关流程和记录。10.1.3 样品受理应由专门人员负责。样品受理人负责验明送样方身份证明材料有效性，对检测样品来源、状态和数目、包装、鉴定目的和要
