1、中中华华人人民民共共和和国国国国家家环环境境保保护护标标准准HJ 961-2018土壤和沉积物氨基甲酸酯类农药的测定高效液相色谱-三重四极杆质谱法Soil and sedimentDetermination of carbamate pesticidesHighperformance liquid chromatography-triple quadrupole massspectrometry（发布稿）本电子版为发布稿。请以中国环境出版社出版的正式标准文本为准。2018-07-29 发布2019-01-01 实施生生态态环环境境部部发 布i目次前言.ii1适用范围.12规范性引用文件.13方
2、法原理.14干扰和消除.15试剂和材料.26仪器和设备.27样品.38分析步骤.49结果计算与表示.710精密度和准确度.911质量保证和质量控制.1012废物处理.10附录 A（规范性附录）方法检出限和测定下限.11附录 B（资料性附录）方法精密度和准确度.12ii前言为贯彻中华人民共和国环境保护法，保护生态环境，保障人体健康，规范土壤和沉积物中氨基甲酸酯类农药的测定方法，制定本标准。本标准规定了测定土壤和沉积物中15种氨基甲酸酯类农药的高效液相色谱-三重四极杆质谱法。本标准的附录A为规范性附录，附录B为资料性附录。本标准为首次发布。本标准由环境监测司、科技标准司组织制订。本标准起草单位：浙
3、江省环境监测中心。本标准验证单位：江苏省环境监测中心、浙江省舟山海洋生态环境监测站、杭州市环境监测中心站、苏州市环境监测中心、绍兴市环境监测中心站和嘉兴市环境保护监测站。本标准生态环境部2018年7月29日批准。本标准自2019年1月1日起实施。本标准由生态环境部解释。1土壤和沉积物氨基甲酸酯类农药的测定高效液相色谱-三重四极杆质谱法警告：实验中使用的溶剂和标准溶液对人体健康有害，溶液配制及样品前处理过程应在通风橱内进行；操作时应按要求佩戴防护器具，避免直接接触皮肤和衣物。1适用范围本标准规定了测定土壤和沉积物中15种氨基甲酸酯类农药的高效液相色谱-三重四极杆质谱法。本标准适用于土壤和沉积物中
4、杀线威、灭多威、二氧威、涕灭威、恶虫威、克百威、残杀威、甲萘威、乙硫苯威、抗蚜威、异丙威、仲丁威、甲硫威、猛杀威、棉铃威等 15 种氨基甲酸酯类农药的测定。当取样量为 10 g，试样定容体积为 1.0 ml，进样体积为 1.0 l 时，15 种氨基甲酸酯类农药的方法检出限为 12 g/kg，测定下限为 48 g/kg。详见附录 A。2规范性引用文件本标准引用了下列文件或其中的条款。凡是不注日期的引用文件，其有效版本适用于本标准。GB 17378.3海洋监测规范第 3 部分：样品采集、贮存与运输GB 17378.5海洋监测规范第 5 部分：沉积物分析HJ 494水质采样技术指导HJ 613土壤干
5、物质和水分的测定重量法HJ 783土壤和沉积物有机物的提取加压流体萃取法HJ/T 166土壤环境监测技术规范3方法原理土壤或沉积物中的氨基甲酸酯类农药经有机溶剂提取、固相萃取柱净化、浓缩、定容后，用高效液相色谱-三重四极杆质谱法测定，根据保留时间、特征离子定性，内标法定量。4干扰和消除具有相近保留时间及分子离子峰的物质对测定产生干扰，可通过改变流动相、改变定量离子对或采用高分辨质谱消除干扰。25试剂和材料除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，实验用水为新制备的不含目标物的纯水。5.1甲醇（CH3OH）：液相色谱级。5.2二氯甲烷（CH2Cl2）：液相色谱级。5.3乙酸铵（CH3C
6、OONH4）：优级纯。5.4无水硫酸钠（Na2SO4）。马弗炉中 450灼烧 4 h，稍冷却后置于干燥器中备用。5.5甲醇-二氯甲烷混合溶剂：1+2。用甲醇（5.1）和二氯甲烷（5.2）按 1：2 体积比混合。5.6甲醇-二氯甲烷混合溶剂：1+9。用甲醇（5.1）和二氯甲烷（5.2）按 1：9 体积比混合。5.7乙酸铵溶液：c（CH3COONH4）=5 mmol/L。取 192.5 mg 乙酸铵（5.3），用水溶解定容至 500 ml。5.8甲醇-乙酸铵混合溶液：2+3。用甲醇（5.1）和乙酸铵溶液（5.7）按 2：3 体积比混合。5.9氨基甲酸酯类农药标准贮备液：=100 mg/L。直接购买
7、市售有证标准溶液，按标准溶液证书要求保存。5.10氨基甲酸酯类农药标准使用液：=10 mg/L。取 500 l 氨基甲酸酯类农药标准贮备液（5.9）于 5 ml 容量瓶中，用甲醇（5.1）定容，混匀，置于-18冰箱，密封、避光保存，保存期为 6 个月。5.11内标标准贮备液：=100 mg/L。直接购买市售甲萘威-D7和灭多威-D3有证标准溶液，按标准溶液证书要求保存。5.12内标标准使用液：=10 mg/L。取 500 l 内标标准贮备液（5.11）于 5 ml 容量瓶中，用甲醇（5.1）定容，混匀，置于-18冰箱，密封、避光保存，保存期为 6 个月。5.13固相萃取柱：石墨化炭黑/N-丙基
8、乙二胺复合填料萃取柱（500 mg/6 ml）或其它性能相近的固相萃取柱。5.14硅藻土：0.60.9 mm（3020 目）。5.15石英砂：150830 m（200100 目）。马弗炉中 450灼烧 4 h，稍冷却后置于洁净干燥器中备用。5.16滤膜：0.22 m 聚四氟乙烯或其它等效材质。5.17氮气：纯度99.99%。5.18氩气：纯度99.99%。6仪器和设备6.1高效液相色谱-三重四极杆质谱仪。36.1.1质谱仪：三重四极杆质谱，配有电喷雾离子源，具备多反应监测功能。6.1.2色谱仪：具备梯度洗脱功能。6.1.3色谱柱：低键合十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，填料粒径为 1.7 m，柱长为
9、 50 mm，内径为 2.1 mm。也可使用满足分析要求的其它性能相近的色谱柱。6.2冷冻干燥仪。6.3提取装置：加压流体萃取仪（配有 50 ml 以下萃取池）、索氏提取装置、自动索氏提取仪或其他性能相当的提取装置。6.4浓缩装置：氮吹浓缩仪、旋转蒸发仪或其他性能相当的设备。6.5分析天平：感量为 0.01 g。6.6一般实验室常用仪器和设备。7样品7.1样品采集和保存按照 HJ/T 166 的相关要求采集和保存土壤样品，按照 HJ 494 的相关要求采集水体沉积物样品，按照 GB 17378.3 的相关要求采集海洋沉积物样品。样品采集后，04密封、避光保存，7 d 内完成萃取。7.2样品的制
10、备除去样品中的异物（枝棒、叶片、石子等），将样品完全混匀。如样品水分含量较高，应先用冷冻干燥仪（6.2）干燥。称取两份约 10 g（精确至 0.01 g）的样品。土壤样品一份用于测定干物质含量；另一份用于提取。使用加压流体萃取法提取时，加入适量硅藻土（5.14），装入萃取池中。使用索氏提取时，加入适量无水硫酸钠（5.4），装入提取管中。沉积物样品一份用于测定含水率；另一份用于提取，提取方法参照土壤样品。7.3水分的测定按照 HJ 613 测定土壤样品干物质含量，按照 GB 17378.5 测定沉积物样品含水率。7.4试样的制备7.4.1提取7.4.1.1加压流体萃取采用甲醇-二氯甲烷混合溶剂（
11、5.5）提取样品中氨基甲酸酯类农药，压力 10.34 Mpa，萃取温度 80C，加热时间 5 min，静态萃取时间 5 min，冲洗量 80%，萃取后氮气吹扫 60 s，循环萃取 3 次。或按照 HJ 783 进行萃取条件的设置和优化。7.4.1.2索氏提取将滤筒置于索氏提取器回流管中，在圆底溶剂瓶中加入 200 ml 甲醇-二氯甲烷混合溶剂4（5.5），提取 12 h，回流速度控制在 46 次/h。提取完毕，取出圆底溶剂瓶，待浓缩。注注：若经过验证也可使用其它等效提取方法。7.4.2浓缩用浓缩装置（6.4）将萃取液（7.4.1）浓缩至近 1.0 ml，待净化。7.4.3净化用 5.0 ml
12、甲醇-二氯甲烷混合溶剂（5.6）以 2 ml/min 的速度活化固相萃取柱（5.13），在填料即将暴露于空气之前，将浓缩液（7.4.2）转移至柱头，在填料即将暴露于空气之前，用5.0 ml 甲醇-二氯甲烷混合溶剂（5.6）洗脱萃取柱，收集洗脱液于刻度管中。注注：使用不同批次萃取柱净化样品时，需通过实验确定洗脱溶剂用量。7.4.4净化后浓缩用氮吹浓缩仪（6.4）将洗脱液（7.4.3）30C 以下浓缩至近干，加入 20 l 内标标准使用液（5.12），用甲醇-乙酸铵混合溶液（5.8）定容至 1.0 ml，过滤膜（5.16），待测。处理好的试样应于-18以下冰箱冷冻保存，在 30 d 完成分析。7.
13、5空白试样的制备用石英砂（5.15）替代实际样品，按照与试样制备（7.4）相同的步骤制备空白试样。8分析步骤8.1参考测量条件8.1.1色谱条件流动相：流动相 A 甲醇（5.1），流动相 B 乙酸铵溶液（5.7），梯度洗脱程序见表 1。流速：0.2 ml/min；进样体积：1.0 l；柱温：45C。表 1梯度洗脱程序时间（min）流动相 A（%）流动相 B（%）040605.09915.59917.040608.1.2质谱条件电喷雾源，正离子模式，毛细管电压：3000 V，脱溶剂气温度：350C，源温：110C，脱溶剂气流量：500 ml/min，锥孔气流量：50 ml/min。检测方式为多反
14、应监测，具体条件见5表2。注：对于不同质谱仪器，参数可能存在差异，测定前应将质谱参数优化到最佳。表 2目标物多反应监测条件编号化合物监测离子对（m/z）锥孔电压（V）碰撞能量（V）1杀线威237.1 71.9*1210237.1 90.112122灭多威163.4 88.4*159163.4 106.015103二氧威224.4 123.4*2515224.4 167.125134涕灭威208.5 116.3*1010208.5 88.91085恶虫威224.4 167.4*189224.1 109.118106克百威222.4 165.4*2515222.4 123.025147残杀威210
15、.5 111.3*2013210.5 168.120128甲萘威202.4 145.2*2018202.4 127.120169乙硫苯威226.4 107.2*159226.4164.1151210抗蚜威239.5 72.4*1819239.5 182.2181811异丙威194.5 95.0*1512194.5 137.2151212仲丁威208.4 95.3*1512208.4 152.0151513甲硫威226.4 169.4*2013226.4 121.0201214猛杀威208.4 109.4*2015208.4 151.2201615棉铃威400.5 238.2*128400.5
16、91.1121016灭多威-D3166.1 88.1*15917甲萘威-D7209.0 152.1*2018注：带*为定量离子对。8.1.3质谱仪的校正按照仪器说明书进行质谱仪质量数和分辨率校正，仪器性能正常后进行测试。68.2校准8.2.1标准曲线的建立移取适量的氨基甲酸酯类农药标准使用液（5.10）于 5 ml 容量瓶，加入 100 l 内标标准使用液（5.12），用甲醇-乙酸铵混合溶液（5.8）稀释至标线，配制至少 5 个浓度点的标准系列，标准系列浓度分别为 0.02 g/ml、0.05 g/ml、0.10 g/ml、0.20 g/ml 和 0.50 g/ml（此为参考浓度）。由低浓度到高浓度依次对标准系列溶液进样，按照测量条件（8.1）分析，以目标物浓度为横坐标，目标物的峰面积和对应内标物浓度乘积与对应内标物峰面积的比值为纵坐标，建立标准曲线。8.2.2平均相对响应因子计算标准系列第 i 点中目标物的相对响应因子iRRF，按照公式（1）计算：iISiISiiiAARRF（1）式中：iRRF标准系列中第 i 点目标物的相对响应因子；iA标准系列中第 i 点目标物的峰面积；ISiA
