1、农业部1068号公告一2一2008前言本标准附录A为资料性附录。本标准由中华人民共和国农业部畜牧业司提出。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所国家饲料质量监督检验中心(北京)、河南省饲料产品监督检验站、农业部饲料质量监督检验中心（济南）。本标准主要起草人：李兰、索德成、班付国、谭旭信、杜红鸽、贾振民、吴宁鹏、刘素梅、任爱丽、李俊玲。农业部1068号公告-2一2008氢可的松标准贮备液(4.9.1)各5mL,置于50mL棕色容量瓶中，甲醇(4.2)定容至刻度。该溶液中泼尼松龙、醋酸可的松、甲基泼尼松龙、倍氯米松、氟氢可的松浓度均为1
2、00g/mL,于一20保存可使用1个月。4.9.3糖皮质激素标淮混合工作液：准确移取糖皮质激素标准中间液(4.9.2)1.0mL、2.5mL、5.0mL、10.0mL于50mL棕色容量瓶中，用甲醇(4.2)定容至刻度，此时溶液中各种糖皮质激素的浓度分别为1ug/mL、5g/mL、10g/mL、20g/mL。于-20保存，可使用2周。5仪器和设备5.1实验室常用仪器和设备。5.2电子天平：感量0.0001g和0.001g。5.3涡轮混合器。5.4振荡器。5.5离心机：12000r/min15000r/min(离心力为17212g26895g)。5.6旋转蒸发器5.7SPE活性炭吸附柱：500mg
3、/6mL。5.8SPE氨基柱：500mg/6mL。5.9氮吹仪。5.10针头过滤器：备孔径为0.454m有机微孔滤膜。5.11高效液相色谱仪：配紫外检测器。6试样的制备按GB/T14699.1采样。按GB/T20195制备样品。7分析步骤7.1试液的制备7.1.1提取称取配合饲料5g(精确至0.001g),置于50mL聚四氟乙烯离心管中，加人15mL的甲醇(4.3)，于涡轮混合器(5.3)涡旋混合30s,于振荡器(5.4)振荡提取20mi。于离心机(5.5)上以17212g的离心力离心，上清液转移至50mL旋转蒸发瓶中。重复上述步骤提取、离心、转移一次，合并两次上清液备用。7.1.2浓缩于旋转
4、蒸发器(5.6)上4050将(7.1.1)中的液体全部蒸干（避免爆沸）。加人4mL甲醇(4.3),于超声波超声30s溶解残渣，再加入16mL水，混合超声30s,充分混合，转移至另一支50mL聚四氟乙烯离心管中，以26895g的离心力离心5min,上清液备用。7.1.3净化用6mL二氯甲烷(4.4)、6mL甲醇(4.3)、6mL水活化活性炭吸附柱(5.7)。准确加入(7.1.2)中的试液10mL,加人3mL淋洗液(4.6)淋洗小柱，抽干小柱约30min。用6mL二氯甲烷/甲醇(7+3)活化氨基柱(5.8)，将氨基柱串联在活性炭吸附柱下方。加人6L洗脱液(4.7)洗脱串接小柱并收集洗脱液，氮吹仪(5.9)50氮气吹干，加人0.5mL甲醇(4.3)溶解，过滤膜(5.10)上液相色谱仪(5.11)测定.注：对高含量的样品，应调整过柱体积，保证活性炭吸附柱上组分的量小于35g。7.2测定2
