1、 ICS 65.020.01 B 38 DB52 贵州省地方标准 DB 52/T 9192014 金线莲规范化生产技术规程 Technical regulations for Standardized production of Anoectochilus 2014-09-13 发布 2014-10-13 实施贵州省质量技术监督局 发 布 DB52/T 9192014 I 目 次 前言.II 1 范围.1 2 规范性引用文件.1 3 术语和定义.1 4 选种和留种.2 5 组培苗培育.2 6 商品苗.3 7 种植环境.4 8 种植设施.4 9 基质.5 10 种植.5 11 种植管理.5 12
2、 采收与加工.6 附录 A（资料性附录）三个物种鉴定.7 附录 B（资料性附录）培养基配制方法.8 附录 C（资料性附录）种植基质配比.9 附录 D（资料性附录）金线莲主要病害防治表.10 附录 E（资料性附录）金线莲主要虫害防治表.11 DB52/T 9192014 II 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009标准化指导原则 第1部分：标准的结果和编写给出的规则起草。请注意：本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由贵州省农业科学院提出并归口。本标准由贵州省质量技术监督局批准。本标准起草单位：贵州省亚热带作物研究所、贵州省现代中药研究所、贵州师范大
3、学生命科学院。本标准主要起草人：罗晓青、吴明开、乙引、申刚、张宇斌、廖明亮、敖茂宏、张显波、汤毅。DB52/T 9192014 1 金线莲规范化生产技术规程 1 范围 本标准规定了金线莲原植物、选种、留种、组培苗培育、组培苗出瓶分级标准、炼苗、种植环境、种植设施、基质、管理、病虫害防治及产品采收与产地加工的技术要求。本标准适用于贵州省金线莲适生地区，以全草药食兼用为目的的人工种植与推广。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 19630.1 有机产
4、品 GB 3095 环境空气质量标准 GB 5084 农田灌溉水质标准 GB 15618 土壤环境质量标准 中药材生产质量管理规范（试行）（国家药品监督管理局局令第32号，2002）3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。3.1 蒴果 由两个或多个心皮形成的开裂干果。金线莲蒴果中具有大量无胚乳粉末状的种子。3.2 原球茎 由金线莲不同部位如种子、茎尖、茎段等诱导产生，具有发育潜能的细胞团。3.3 不定芽 凡从叶、根、或茎节间或是离体培养的原球茎、愈伤组织等通常不形成芽的部位生出的芽，则统称为不定芽。3.4 丛生芽 DB52/T 9192014 2 不定芽经增殖培养形成的群体丛生芽苗。3.5
5、 基质 种植中用来固定植株及贮存植物所需水分、养分的材料。金线莲种植常采用的基质有腐殖土、草炭土、碎树皮、碎树叶等按一定比例配制。4 选种和留种 4.1 选种 本标准所指的金线莲原植物包括兰科（Orchidaceae）开唇兰属（Anoectochilus）的3个种，即兴仁金线兰（Anoectochilus xingrenensis Z.H.Tsi et X.H.Jin）、金线兰（Anoectochilus roxburghii（Wall.）Lindl.）、台湾银线兰（Anoectochilus formosanus Hayata），经过鉴定确认，鉴定方法见附录A。4.2 留种 留种应选择植物形
6、态特征典型，植物之间形态差异小，长势均匀，生长健壮的植株进行人工授粉结实获得的蒴果。4.2.1 授粉 盛花期进行人工授粉，采用异株异花授粉，母本在授粉后立即套袋，挂牌标记。人工授粉只能在同一种内进行。4.2.2 结实 授粉成功，子房开始膨大时进行疏果，每株留果23个；蒴果成熟时，选择饱满的果实采收备用。4.2.3 蒴果保存 留种蒴果置于冰箱4 保存备用。5 组培苗培育 5.1 种子无菌培养 5.1.1 蒴果处理与播种 蒴果表面先用清水清洗干净，放在75酒精里浸泡3分钟，在酒精灯上快速烧干表面酒精，剖开蒴果，将种子播于培养基上，40天左右种子开始膨大，通过种子萌发，经培养获得大量实生苗。5.1.
7、2 种子萌发培养基 1/2 MS+10%马铃薯原汁+3%蔗糖+0.8%琼脂，pH5.8。5.1.3 增殖分化 种子萌发后适时转接，进行增殖分化培养。DB52/T 9192014 3 5.1.4 增殖分化培养基 MS+(1.02.0 mg/L)6-BA+(0.10.2 mg/L)NAA+10%马铃薯原汁+3%蔗糖+0.8%琼脂，pH5.8。5.1.5 壮苗生根 将分化长至2 cm3 cm的小苗适时转接，进行壮苗生根培养。5.1.6 壮苗生根培养基 MS+（0.51.0 mg/L)NAA+10%马铃薯原汁+3%蔗糖+0.8%琼脂，pH5.8。5.2 丛生芽培养 5.2.1 外植体获取 选择健壮的种
8、植植株或野生植株的茎段作外植体，也可从无菌瓶苗中选择外植体。5.2.2 外植体处理 种植或野生植株金线莲用自来水冲洗干净，清理叶、叶苞鞘、根，用肥皂水浸泡20 min，流水冲洗30 min，在超净工作台上用75%酒精消毒30 s，后用0.1%升汞消毒10 min，再用无菌水洗5次，无菌滤纸吸干水分，将植株切为0.5 cm长带节的茎段备用。无菌瓶苗可直接在超净工作台上取出，无菌操作，将植株切为0.5 cm长带节的茎段备用。5.2.3 不定芽诱导与增殖 将带腋芽的茎段接种于不定芽诱导与增殖培养基中，经继代增殖培养，形成大量丛生芽。5.2.4 不定芽诱导与增殖培养基 MS+(1.02.0 mg/L)
9、6-BA+(0.10.2 mg/L)NAA+10%马铃薯原汁+3%蔗糖+0.8%琼脂，pH5.8。5.2.5 壮苗生根 当丛生芽长至2 cm3 cm时，转入壮苗生根培养。5.2.6 壮苗生根培养基 MS+（0.5-1.0 mg/L)NAA+10%马铃薯原汁+3%蔗糖+0.8%琼脂，pH5.8。5.3 培养条件 光照1000 Lx1500 Lx，光照时间12 h/d，温度（252）。5.4 继代次数 原球茎和丛生芽继代控制在68代。6 商品苗 6.1 商品苗分级 用于种植的苗应无污染，无烂茎，无烂根，叶色正常并展开。商品苗分级标准（见表1）DB52/T 9192014 4 表1 金线莲商品苗分级
10、 分级/项目 根（条）株高（cm）茎粗（cm）优质苗 2 条3 条 5.0 0.25 合格苗 1 条2 条 4.0 0.20 6.2 炼苗 试管苗移栽前将培养瓶放置于与栽培相近的环境中进行炼苗，利用遮光率为80%遮阳网双层遮阴，温度20 28，炼苗1周2周。6.3 出瓶 用镊子从培养瓶中取出组培苗，清水反复漂洗干净，用杀菌液浸根10 min左右。杀菌液应符合GB/T 19630.1有机产品规定。7 种植环境 符合GB 3095 环境空气质量标准，GB 5084 农田灌溉水环境质量标准，GB 15618土壤环境质量标准。8 种植设施 8.1 设施准备 金线莲以保护地种植为宜，可使用温室或大棚等设
11、施种植，配备遮阳网、防虫网、喷雾和灌溉设备。8.2 薄膜大棚 单栋或连栋大棚。大棚上方和东、西两侧设两层遮光率为80的遮光网。连栋大棚要确保通风，面积不宜超过1500 m2。8.3 简易棚 用热镀锌钢管（或其它坚固材料）插地建成，棚高度 2.8 m3.5 m。棚上方和东、西两侧覆盖两层遮光率为80的遮光网。8.4 喷灌系统 安装可以形成雾状的喷头进行喷灌。8.5 种植苗床 8.5.1 高架苗床 高架苗床,材料选用钢架或其它坚固材料，架高0.6 m0.8 m，架宽1.0 m1.5 m，架间距0.4 m0.6 m。8.5.2 水泥瓦苗床 用砖块支撑离地面高0.2 m0.3 m的水泥瓦苗床，苗床宽1
12、.0 m1.5 m，苗床间距 0.4 m0.6 m。DB52/T 9192014 5 9 基质 9.1 基质选择 基质用腐殖土、草炭土、碎树皮、碎树叶等按一定比例配制而成（见附录B）。9.2 基质处理 树皮和树叶粉碎至0.5 cm1 cm大小。充分腐熟，经太阳暴晒23 d，并用1:1000的高锰酸钾溶液喷雾处理。9.3 基质铺设 9.3.1 将基质铺在种植苗床上，厚约 8 cm10 cm。9.3.2 高架苗床，先用孔径小于 0.5 cm 的塑料网铺于框架上，再铺上种植基质。9.3.3 水泥瓦苗床，先用直径 35 cm 的小石子铺于水泥瓦凹沟里，再铺上种植基质。10 种植 10.1 金线莲种苗
13、种苗应达到本标准“6 商品苗”的合格种苗质量要求。10.2 种苗处理 用清水仔细冲洗种苗根部附着的培养基，清洗干净后用1:1000高锰酸钾溶液浸根10 min左右。10.3 种植季节 金线莲适宜种植季节为每年3月6月。10.4 种植方式 种植前2天将苗床基质浇透、浇均匀，阴干待用。以株为单位种植，株行距按58 cm810 cm。栽植深度以基质盖过根系与少许基部即可。11 种植管理 11.1 光照 5月10月需在大棚顶上和东、西两侧面太阳照射到的地方采用两层80的遮阳网遮阴，其他时间用一层80的遮阳网。11.2 温湿度 金线莲生长适宜温度为20 28，空气湿度为6580。11.3 水分 11.3
14、.1 水源要求符合 GB 5084 农田灌溉水质标准。DB52/T 9192014 6 11.3.2 浇水以保持基质湿润为宜。一般情况每天上午 9:00 之前喷灌，每天一次；持续干旱季节在下午 17:00 以后再喷灌一次。11.3.3 雨季应及时开沟排水，避免棚内及四周积水。11.4 施肥 11.4.1 施肥原则:可少施或不施肥。11.4.2 施肥方法：结合浇水进行叶面喷施。11.4.3 肥料与浓度:可用磷酸二氢钾、功能性复合肥、平衡肥等，叶面喷施浓度以稀释至 15002000倍为宜。11.5 除草 适时人工清除杂草。11.6 病虫害防治 11.6.1 遵循“预防为主、综合防治”的植保方针。1
15、1.6.2 农药的使用应符合GB/T 19630.1 有机产品。11.6.3 金线莲主要病虫害及防治方法见附录 C 和附录 D。12 采收与加工 12.1 采收时间 种植56个月后，植株长到1520 cm即可采收，时间一般在1011月。12.2 采收方法 金线莲全草用药，剔除病株，全草采收，包括根和地上部分。12.3 加工 将植株清洗干净，60 烘干，干品水分小于12%，置于通风干燥处防潮保存。也可采用微波真空干燥，真空包装或充CO2包装。DB52/T 9192014 7 A A 附 录 A（资料性附录）三个物种鉴定 A.1 兴仁金线兰（Anoectochilus xingrenensis Z
16、.H.Tsi et X.H.Jin）地生草本，具肉质匍匐根状茎，茎肉质，圆柱形，植株高1520 cm；叶25枚，卵形，长25 cm，宽23 cm，上面暗绿色，具57条金黄色脉，近圆形，具柄，叶柄长1.52 cm，基部扩大为包茎鞘；花葶直立，长610 cm，密被具多节的腺柔毛，花序轴具23鞘；总状花序具35朵花；苞片卵状披针形，长11.2 cm，带红色，先端渐尖，背面被短柔毛；花倒置，萼片带红色，具1脉，背面被短柔毛；中萼片卵形，凹陷，长57 mm，宽35 mm，先端急尖，花瓣白色，斜卵形，无毛，长68 mm，宽23 mm，基部稍狭，先端急尖，具1脉，两侧不等；唇瓣倒置，位于下方，外伸呈Y形，爪两侧具48个短齿，较萼片长。基部有距，距长34 mm，基部宽2 mm，蕊柱粗短，长约1 mm。注：资料来源贵州植物志（第十卷）2004年。A.2 金线兰（Anoectochilus roxburghii（Wall.）Lindl.）地生草本，具肉质匍匐根状茎，茎肉质，圆柱形；叶卵形或卵圆形，长1.53.5 cm，宽13 cm，上面暗紫色，有金红绢丝光泽的网脉，背面淡紫红色，先端急尖，基部圆形，叶柄长
