1、收稿日期：2022-03-29基金项目：山东省重大创新工程项目：绿色生物合成医药中间体关键技术研究及产业化示范（编号：2019JZZY010520）作者简介：刘亚方，硕士，工程师，主要从事药物分析和质量控制工作，E-mail:*通讯作者：杨琪，工程师，主要从事药物分析和质量控制工作，E-mail: 激光散射测定甲苯磺酸拉帕替尼粒度方法的建立和验证刘亚方，张治云，郭新艳，王 静，王 帆，杨 琪*（山东省药学科学院 山东省皮肤与黏膜给药工程技术研究中心，山东 济南250101）摘 要：目的 建立激光散射法测定甲苯磺酸拉帕替尼原料药的粒度分布。方法 采用Malvern Mastersizer 200
2、0型激光粒度分析仪及Hydro 2000MU型湿法进样器，样品采用2%十二烷基硫酸钠分散，样品折射率1.5，样品吸收率1，遮光比8%20%，超声50 s，循环速度2000 r/min，样品测量5次。结果 d(0.5)值的RSD均小于3%，d(0.1)和d(0.9)值的RSD均小于5%。结论 本法可准确测定甲苯磺酸拉帕替尼原料药的粒度。关键词：甲苯磺酸拉帕替尼；激光散射法；粒度中图分类号：R917 文献标识码：A 文章编号：1672-979X（2023）02-0119-04DOI：10.3969/j.issn.1672-979X.2023.02.005Establishment and Veri
3、fication of Method for Determination of Particle Size of Lapatinib Tosylate Monohydrate by Laser Light ScatteringLIU Ya-fang,ZHANG Zhi-yun,GUO Xin-yan,WANG Jing,WANG Fan,YANG Qi(Shandong Provincial Engineering Technology Research Center of Mucosal and Transdermal Drug Delivery Technologies,Shandong
4、Academy of Pharmaceutical Sciences,Jinan 250101,China)Abstract:Objective To establish a laser light scattering method for the determination of particle size distribution of lapatinib ditosylate.Methods A Malvern Mastersizer 2000 laser particle size analyzer and a Hydro 2000MU wet autosampler were us
5、ed.2%SDS was used as the dispersion agent.The determination conditions were screened as sample refractive index of 1.5,sample absorbency of 1,shading degree of 8%-20%,ultrasonic treatment for 50 s,pump speed of 2000 r/min,and measurement for 5 times.Results The RSDs for d(0.5)values were lower than
6、3%,and RSDs for d(0.1)and d(0.9)values were lower than 5%.Conclusion This method is accurate for the determination of particle size of lapatinib tosylate monohydrate.Key Words:lapatinib tosylate monohydrate;laser light scattering;particle size甲苯磺酸拉帕替尼是由葛兰素史克公司开发的一种小分子的可逆性酪氨酸激酶抑制剂（TKI），于2007年在美国率先上市，
7、用于联合用药：合用卡培他滨治疗过度表达2型人表皮受体（HER2）的晚期或转移性乳腺癌，合用来曲唑治疗过度表达HER2、激素受体阳性的转移性乳腺癌绝经期患者1-3。药物颗粒的大小及其粒度分布情况对药物的安全性、有效性和稳定性具有重要影响3。甲苯磺酸拉帕替尼在水中几乎不溶，其粒度直接影响到制剂的溶出速度，从而影响药物制剂的质量和疗效，因此粒度为其质量控制的重要指标之一。有效的粒度检测方法对于粒度控制分析尤为关键，故对其粒度进行方法筛选及验证。目前，在国内尚未见有甲苯磺酸拉帕替尼原料药粒度测定方法的文献报道。根据中国药典2020年版四部通则0982粒度和粒度分布测定法4的规定，本文采用第三法光散射法
8、，运用激光散射原理5-6，采用湿法测定甲苯磺酸拉帕替尼原料药的粒度，该方法重复性好，易于操作，数值真实性强。原料药粒度测定方法的建立，有助于在处方筛选前筛选出合理的原料药粒径，可在一定程度上简化处方筛选过程，进一步完善了原料药粒径的研究，为生产出批间差异小、质量稳定的产品增加了保障。食品与药品 Food and Drug 2023年第25卷第2期 1191 仪器与试药1.1 仪器Malvern Mastersizer 2000型激光粒度分析仪，Hydro 2000MU型湿法进样器（英国Malvern公司）。1.2 试药甲苯磺酸拉帕替尼（自制，测定前过60目筛，批号：20190901，20191
9、008，20191103；含量：99.87%，99.83%，99.80%）；十二烷基硫酸钠（SDS，分析纯，天津市大茂化学试剂厂，批号：20181201）；曲拉通X-100（化学纯，国药集团，批号：20180119）；六偏磷酸钠（化学纯，国药集团，批号：20180506）；水（纯化水）。2 方法与结果2.1 参数的选择及优化甲苯磺酸拉帕替尼在水中几乎不溶，故首选湿法测定。以水为分散介质时样品不能很好地分散，故选择增加合适的分散剂将供试品制成稳定的混悬液后，加入含900 ml水的测量杯中进行测定。仪器参数初步设定为：样品折射率1.5；样品吸收率1；分散介质折射率1.33；遮光比8%20%；超声5
10、0 s；循环速度2000 r/min；测量次数5。在此基础上，对各参数进行优化及确定。2.1.1 分散剂的选择 粒径分布测定过程中分别尝试将六偏磷酸钠、SDS、曲拉通配制成一定浓度的溶液作为分散剂，经试验发现2%六偏磷酸钠溶液作为分散剂时，甲苯磺酸拉帕替尼漂浮在上层，无法均匀分散；采用2%曲拉通和2%SDS作为分散剂时，两者均可将甲苯磺酸拉帕替尼分散，采用2%曲拉通作为分散剂，样品在测定过程中发生团聚现象，遮光度显著下降，而采用2%SDS时，样品分散均匀，体系较稳定，故最终选择2%SDS作为分散剂。2.1.2 分散剂的制备及用量考察 取SDS 2 g，加水100 ml，超声溶解，摇匀，0.45
11、 m滤膜过滤。称取甲苯磺酸拉帕替尼约0.3 g，共3份，分别加入2%SDS 1，2，4 ml，充分搅拌后，加入含900 ml水的湿法进样器中，按2.1项下参数分别测定，不同用量分散剂的粒度分布测定结果见表1。表1 不同用量分散剂的考察结果（n=5）用量/mld(0.1)/m（RSD）d(0.5)/m（RSD）d(0.9)/m（RSD）12.454（5.66）14.256（5.13）53.419（4.89）22.414（2.37）13.642（1.73）50.236（1.36）42.425（2.79）13.377（1.80）50.376（1.65）结果表明，当分散剂用量为1 ml时仍有部分颗粒团
12、聚，导致测定结果偏大；当分散剂用量为2 ml时，分散效果较好，5 次测试RSD值最小；当分散剂用量为4 ml时，分散效果较好，但可能由于产生的气泡较多，遮光度不稳定，5 次测试RSD 变大，导致测量误差增大。综合比较，选择分散剂用量为2 ml。2.1.3 光学参数的考察 根据激光散射粒度分析仪的测定原理，在测定方法建立时，需设置3个光学参数，分别为分散介质折射率、样品吸收率和样品折射率7。分散介质采用2%SDS水溶液，折射率为1.33；甲苯磺酸拉帕替尼为亮黄色结晶性粉末，吸收率设定为1，折射率为1.5。称取甲苯磺酸拉帕替尼约0.3 g，共6份，各加入2%SDS 2 ml，充分搅拌后作为供试品溶
13、液，加入含900 ml水的湿法进样器中，吸收率分别设定为0.01，0.1，1，或将折射率分别设定为1.45，1.5，1.55，其他参数不变，粒度测定结果见表2。表2 光学参数考察结果（n=5）参数d(0.1)/m（RSD）d(0.5)/m（RSD）d(0.9)/m（RSD）平均残差/%吸收率 0.01 2.429（2.59）13.866（2.04）50.902（1.54）1.050.1 2.443（2.47）13.650（1.90）50.676（1.46）0.9412.414（2.37）13.642（1.73）50.236（1.36）0.89折射率1.45 2.394（2.46）13.418（
14、1.81）49.940（1.38）0.911.5 2.414（2.37）13.642（1.73）50.236（1.36）0.891.55 2.403（2.54）13.868（1.76）50.607（1.43）1.03结果表明，综合d(0.1)、d(0.5)、d(0.9)值的RSD及平均残差，当折射率为1.5，吸收率为1 时，d(0.1)、d(0.5)、d(0.9)值的RSD及平均残差最小，故折射率选定为1.5，吸收率选定为1。2.1.4 超声参数的考察 称取甲苯磺酸拉帕替尼约0.3 g，共3份，各加入2%SDS 2 ml，充分搅拌后加入含900 ml水的湿法进样器中，以超声频率2000 Hz分
15、别超声45，50，55 s后进行测定，其他参数不变，每份样品连续测定5次，测定数据见表3。表3 超声参数的考察结果（n=5）超声时间/sd(0.1)/m（RSD）d(0.5)/m（RSD）d(0.9)/m（RSD）452.540（2.66）14.256（2.03）51.019（1.54）502.414（2.37）13.642（1.73）50.236（1.36）552.301（1.98）13.028（1.89）49.962（1.35）结果显示，超声时间在4555 s内样品粒度测定的结果及RSD无明显差异，本文选择超声时间50 s。2.1.5 搅拌器循环速度的考察 称取甲苯磺酸拉帕替尼约0.3 g
16、，共3份，各加入2%SDS 2 ml，充分搅拌后加入含900 ml水的湿法进样器中，分别以循环速120 食品与药品 Food and Drug 2023年第25卷第2期度1800，2000，2200 r/min平衡3 min，其他参数不变，分别进行测定，每份样品连续测定5次，测定数据见表4。表4 不同循环速度的考察结果（n=5）循环速度/rmin-1d(0.1)/md(0.5)/md(0.9)/m18002.381(2.07)13.807(1.90)51.014(1.52)20002.414(2.37)13.642(1.73)50.236(1.36)22002.325(2.51)13.456(2.01)50.376(1.72)结果显示，不同循环速度测定的结果及RSD基本一致，为保证搅拌速度以使物质不产生沉降，同时又避免搅动过大产生气泡干扰测定结果，选择2000 r/min的循环速度。2.2 测定方法的确定称取甲苯磺酸拉帕替尼约0.3 g，加分散剂（2%SDS）2 ml，充分搅拌后作为供试品溶液，加入含900 ml水的湿法进样器中，设定样品折射率为1.5，样品吸收率为1，分散介质折射率为
