1、从表 的 值直观分析：最优制备工艺为：微晶纤维素与预胶化淀粉质量比；羟丙甲纤维素 乙醇溶液浓度；烘干温度 ；整粒目数 目。最优制备工艺验证结果：按照正交试验优选出的最佳制备工艺生产 批次左旋多巴片进行工艺验证，结果见表。表 工艺验证结果左旋多巴片批号溶出度（）含量（）硬度（）脆碎度（）按照 项检测各项指标，结果表明 批次样品溶出度，含量大于 ，硬度 ，脆碎度 ，产品质量指标较为理想，正交试验确定的最佳制备工艺稳定可靠。稳定性考察结果：将 批左旋多巴片工艺验证批次样品放置于湿度（），（）条件下进行质量稳定性考察，样品进行加速试验 个月，检测结果表明：批次左旋多巴片验证样品加速试验、月溶出度、脆碎
2、度、硬度没有明显的趋势性变化。加速试验、月溶出度及含量指标略有下降，但是处于可接受范围内，脆碎度无明显差异，硬度，无明显下降趋势。讨论本试验结果表明改进后的处方和优化后的制备工艺，解决了传统工艺中存在的问题。效期内的左旋多巴片产品质量稳定性得到提高。左旋多巴片口服吸收速率受到多种因素的影响，如胃排空延缓等均可影响其生物利用度，溶出度可能并不能完全反映药物在人体内的溶出过程，后续将进一步研究左旋多巴片在体内代谢过程，考察体内、体外指标相关性，同时考察比较自制品与参比制剂的体内代谢差异。参考文献刘疏影，陈彪 帕金森病流行现状 中国现代神经疾病杂志，（）：刘国卿 药理学 北京：中国医药科技出版社，高
3、忠明，何吉庆，姜海波，等 左旋多巴联合普拉克索治疗帕金森病的临床研究 中国预防医学杂志，（）：葛芳芳，张振馨 小剂量左旋多巴启动治疗早期帕金森病的研究 中国临床神经科学，（）：，：，（）：黄雪梅，刘淑华 左旋多巴片的溶出度考察 中国药业，（）：国家药典委员会编 中国药典（年版四部）北京：中国医药科技出版社，：正交设计法优化注射用醋酸地加瑞克工艺黄继玫，刘留成，张金连（南京中医药大学翰林学院，泰州；江苏奥赛康药业有限公司，南京；杭州海善制药设备股份有限公司，杭州）摘要：目的 采用冷冻干燥法制备注射用醋酸地加瑞克，并对制备工艺进行优化。方法 以配液温度、值（醋酸水平）、药液残氧量和光照强度为考察因
4、素，以光密度为评价指标，正交实验优化工艺，并对优化后的工艺进行验证。结果注射用醋酸地加瑞克的最佳工艺为：配液温度为（），药液 值为 ，配制过程充氮保护，配制及灌装过程应避光。优化后的工艺所得冻干制剂光密度为 。本品于、（加速试验）条件下放置 个月，光密度、醋酸含量、黏度和含量均无明显变化，且与原研制剂一致。结论优化后的注射用醋酸地加瑞克工艺具有很好的耐用性、可行性及可控性，为冻干制剂的生产工艺的研究提供了实验参考。关键词：注射用醋酸地加瑞克；工艺优化；正交实验；醋酸含量；光密度中图分类号：文献标识码：文章编号：（）作者简介：黄继玫。通讯作者：刘留成。职称：高级工程师。研究方向：制剂新剂型。，（
5、，；，；，）海峡药学 年 第 卷 第 期：，（），（），（），：；前列腺癌（）是男性特有的恶性肿瘤，其发病率位居男性肿瘤第二位，。近年来，我国前列腺癌的发病率呈现稳步上升的趋势，死亡率较欧美发达国家也高，可能与我国现有的治疗方法有关，欧美已在临床广泛使用了促性腺激素释放激素（）阻断剂，它是雄激素剥夺疗法治疗前列腺癌的有效方法，代表性药物有醋酸地加瑞克，。前列腺癌组织中包含有睾酮依赖性及非依赖性细胞种群，在未接受 阻断剂治疗的肿瘤组织中睾酮依赖的细胞种群占主导地位，在接受 阻断剂治疗的情况下，睾酮依赖的细胞种群停止生长并逐步凋亡。醋酸地加瑞克为第三代 阻断剂，属于人工合成多肽，对 受体具有高度选
6、择性，进而可抑制垂体促性腺激素对性腺组织的作用；本品采用皮下注射方式给药后，可自动形成埋植物，持续缓慢释放药物，维持稳态血药浓度。醋酸地加瑞克起始治疗的给药方案为每次给予 （按照说明书制备成浓度为 的溶液），给药两次；醋酸地加瑞克维持治疗的给药方案为每次给予 （按照说明书制备成浓度为 的溶液），每月给药 次，。注射用醋酸地加瑞克于 年 月 日在美国上市，上市企业为，规格有 和，可用于对需要进行雄激素阻断治疗措施的前列腺癌患者，包括接受了前列腺剪除或放射治疗后前列腺特异抗体仍升高的患者，本品于 年 月 日在我国上市，收录类别为进口原研制剂，国内尚无仿制药上市。为了研制高质量的注射用醋酸地加瑞克仿
7、制制剂，造福中国前列腺癌患者，本课题组按照质量源于设计（英文缩写：）开发思路，课题组通过对产品及工艺的深刻理解，确定了高质量仿制制剂的开发目标和控制策略，本实验采用冷冻干燥制备技术，并采用正交设计试验对注射用醋酸地加瑞克进行工艺优化，。仪器与材料 仪器 型洗瓶机（上海新旭发机械科技有限公司），型全自动胶塞清洗机（上海欣丽实业有限公司），型隧道灭菌烘箱（上海新旭发机械科技有限公司），型真空冷冻干燥机（上海东富龙科技股份有限公司），型溶解氧测定仪（），型高效液相色谱仪（日本岛津公司），型流变仪（），型紫外可见分光光度计（日本岛津公司），型精密 计（），型电子分析天平（），型电子天平（上海衡平仪器仪
8、表厂）。材料 醋酸地加瑞克（中肽生化有限公司），甘露醇（广西南宁化学制药有限责任公司），醋酸（湖南尔康制药股份有限公司），醋酸对照品（含量为，批号为，中国食品药品检定研究院），中硼硅玻璃管制注射剂瓶（规格：，肖特新康药品包装有限公司），注射用冷冻干燥用溴化丁基橡胶塞（规格：三叉，西氏医药包装（中国）有限公司）。方法 醋酸含量测定 色谱条件：色谱柱为 柱（，）；流动相为以磷酸缓冲盐（取磷酸 ，加水溶解并稀释至 ，用氢氧化钠试液调至 ）作为流动相，甲醇作为流动相，按下表梯度洗脱；流速为 ；检测波长为 ；柱温为 ；进样量为；稀释剂为流动相 流动相 。表 时间（）流动相 流动相 专属性试验：取醋酸对照
9、品和三氟乙酸各约 至 量瓶中，精密称定，加稀释剂稀释至刻度，摇匀；精密量取 至 量瓶中，加稀释剂定容至刻度，摇匀。按“”项下色谱条件进样并记录色谱图，结果表明，醋酸与三氟乙酸的分离度大于 ，醋酸达到基线分离且对称性好。对照品溶液的制备：精密称量醋酸对照品 ，置 量瓶中，加稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀；再精密量取 ，置 量瓶中，加稀释剂稀释至刻度，摇匀。供试品溶液的制备：精密称取注射用醋酸地加瑞克，置 量瓶中，加稀释剂使溶解，并稀释至刻度，摇匀。定量限：取醋酸对照品适量，用稀释剂溶剂并制成适宜浓度的溶液，以信噪比为 为定量限（），取定量限溶液，重复测定 次，定量限为，峰面积 为。线性与范围：精密
10、称量醋酸对照品，置 量瓶中，加稀释剂稀释至刻度，摇匀。分别精密量取母液、置、量瓶中，加稀释剂稀释至刻度，摇匀。按“”项下色谱条件进样并记录色谱图，以质量浓度（）为横坐标，峰面积 为纵坐标，得回归方程 ，。表明醋酸质量浓度在 范围内呈良好的线性关系。精密度试验：取醋酸对照品溶液，按“”项下色谱条件测定，重复进样 次，结果峰面积进样 为 ，表明本法进样精密度良好。溶液稳定性试验：取醋酸对照品溶液和供试品溶液，分别于、进样，醋酸峰面积的 分别为 和 ，表明供试品溶液和对照品溶液在 内稳定性良好。准确度试验：通过在注射用醋酸地加瑞克中加入醋酸对照品溶液（加入量可以精确计算），按“”项下色谱条件测定加标
11、溶液的醋酸总量，减去注射用醋酸地加瑞克中醋酸含量，即得醋酸测得量，通过测得量比加入量计算回收率，醋酸含量下限的回收率为，为；醋酸含量上限的回收率为，为。表明本法回收率好，能够满足醋酸含量测定的要求。按优化后的工艺制备的三批样品，检测醋酸含量分别为 、，原研制剂（商品名：，规格：；批号：）的醋酸含量为 ，原研制剂（商品名：，规格：；批号：）的醋酸含量为 。优化后的工艺制备样品与原研制剂醋酸含量一致。注射用醋酸地加瑞克光密度检查根据注射用醋酸地加瑞克生物学特征，与埋植物形成及药品的性能相关最为直接的指标为光密度，埋植物的药物释放情况可通过使用药物配制的溶液的光密度的数值来预测，所以需要对光密度进行
12、控制；光密度的控制标准是 ，如果光密度大于此数值，药物配制后 内由于活性成分的纤维化导致出现浑浊和黏稠的现象，带来临床注射困难，还可能影响药效。光密度与吸光度这两个概念是一致的，均为入射光和透射光的透过率之比值的常用对数值，故光密度就是吸光度。取本品（规格为 ），加超纯水 使溶解，摇匀，于 波长下测定吸光度，吸光度应不得过 。注射用醋酸地加瑞克的制备向配料罐中加入总体积的注射用水（），加入辅料甘露醇（）并搅拌使溶解，开启配料罐夹层冷却系统，控制溶液温度在预先设定值，边搅拌边加入处方量的醋酸地加瑞克（），搅拌使溶解，用醋酸调节至设定值，加冷却的注射用水至全量（），继续搅拌至混合均匀。药液经过滤后
13、，每瓶按 进行灌装。半加塞进冷冻干燥箱执行冷冻干燥程序，当制品达到 ，继续保温；当冷凝器温度在 以下时，开启真空泵，真空达到 以下时，开始升温；设定导热油 升温至，保持；设定导热油 升温至，保持 。冷冻干燥结束后，压紧胶塞，放入无菌空气，出箱，轧盖。单因素考察 将配液温度、药液 值（醋酸水平）、药液残氧量水平、配制及灌装过程光照强度为主要考察因素，以光密度为评价指标（光密度越低，产品质量越好），通过单因素试验对各因素进行考察。配液温度：固定药液 值 ，药液残氧量，配制及灌装光照强度 ，配液温度分别按（），（），（），（），（），按照“”项制备样品并测定光密度。光密度变化情况如图 所示，随着配液
14、温度降低，样品的光密度呈下降趋势。配液温度为（），原料药溶解时间较其他配液温度显著延长，因此选择配液温度（），（），（）进行正交实验。图 不同配液温度对光密度的影响 药液 值（醋酸水平）：固定配液温度（），药液残氧量 ，配制及灌装光照强度 ，用醋酸分别调节药液的 值为 、，按照“”项制备样品并测定光密度。光密度变化情况如图 所示，随着 值降低，样品的光密度先呈下降趋势而后升高。因此选择 值为 、进行正交实验。图 不同药液 值对光密度的影响海峡药学 年 第 卷 第 期 药液残氧量水平：固定配液温度（），药液 值 ，配制及灌装光照强度 ，通过在配料罐中充氮去除氧气，控制药液溶氧值分别为 （药液不充
15、氮）、，按照“”项制备样品并测定光密度。光密度变化情况如图 所示，随着溶氧值降低，样品的光密度呈下降趋势。溶氧量控制在 ，需要对药液进行大流量不间断充氮，产生大量气泡，不利于后续样品的装量控制，残氧量水平为 、光密度无显著性差异，故样品配制过程中只要缓慢充氮就能够保证残氧量 。药液残氧量水平不在正交实验中考察。图 不同残氧量对光密度的影响 配制及灌装过程中光照强度：冻干制剂生产线的隔离器内光源强度一般为 ，隔离器外光源强度为 ，另外常用的配制及灌装过程中控制方式为避光，因此配制及灌装过程中光照强度选择避光、进行正交实验。正交实验 实验设计：在单因素考察基础上，以配液温度（）、药液 值（醋酸水平
16、）（）、配制及灌装过程光照强度（）为主要考察因素，为减少实验误差，本实验增加了空白列来增加实验次数，通过 软件设计了（）正交实验进行配制工艺考察，水平和因素见表。表 正交实验设计因素水平水平因素（）（）空白列 避光 结果根据“”项下的样品制备方法，以光密度为评价指标，筛选注射用醋酸地加瑞克最优工艺。正交试验设计和结果见表，方差分析见表。表 正交实验设计安排和结果实验号光密度（）续表 实验号光密度（）表 正交实验方差分析方差来源离差平方和自由度均方 值 值 误差 图 正交实验各因素的均值主效应图 直观分析和方差分析由表、图 可知，影响注射用醋酸地加瑞克光密度的因素由大到小次序为 。以光密度为指标，最佳工艺为，即配液温度为 、药液 为 、配制及灌装过程应避光。表 方差分析结果表明，配液温度对光密度的影响具有显著性（），药液 值、配制及灌装过程光照强度对光密度的影响无显著性差异。综合考虑：确定注射用醋酸地加瑞克最佳的工艺为配液温度为 、药液 为 、样品配制过程缓慢充氮保护，配制及灌装过程应避光。验证实验 为了检验正交实验的可靠性，采用优化的工艺参数，进行 次平行实验，验证得到光密度分别为 、
