1、2023 年 2 月Vol.50 No.1第 50 卷 第 1 期Feb.2023国际神经病学神经外科学杂志Journal of International Neurology and Neurosurgery散发成年型神经元核内包涵体病的临床及病理特点分析丛璐1，程敏1，范洋溢1，洪道俊2，徐燕1，刘尊敬11.北京大学人民医院神经内科，北京 1000442.南昌大学第一附属医院，江西 南昌 330006摘要：目的分析散发成年型神经元核内包涵体病（NIID）患者的临床表型、影像特点及皮肤病理改变。方法回顾性分析2018年3月至2021年3月就诊于北京大学人民医院的7例经NOTCH2NLC基因检
2、测确诊的成年型NIID患者的临床、影像学及皮肤病理特点。结果该组患者起病年龄3373岁，平均（54.4315.47）岁。主要临床表现除认知功能障碍、发作性脑病等核心症状外，前期发生恶心、呕吐及腹痛、腹泻等消化道症状比较突出。7例患者中，有5例患者颅脑磁共振成像显示弥散加权成像皮髓质交界区呈异常高信号。7例患者均被发现NOTCH2NLC基因非编码区中存在GGC异常重复扩增，重复扩增次数为93177次。皮肤活检可见汗腺导管的上皮细胞和成纤维细胞中有酸性核内包涵体。免疫组织化学染色显示为p62阳性；电镜下呈不具膜结构的细丝状物质。结论散发成年型NIID具有高度临床异质性，皮肤病理检查和基因检测是明确
3、诊断的必要手段。国际神经病学神经外科学杂志,2023,50(1):5054关键词：神经元核内包涵体病；NOTCH2NLC基因；消化道症状中图分类号：R741 DOI:10.16636/ki.jinn.1673-2642.2023.01.010Clinical and pathological features of sporadic adultonset neuronal intranuclear inclusion diseaseCONG Lu1，CHENG Min1，FAN Yangyi1，HONG Daojun2，XU Yan1，LIU Zunjing11.Department of N
4、eurology，Peking University Peoples Hospital，Beijing 100044，China2.Department of Neurology，First Affiliated Hospital of Nanchang University，Nanchang，Jiangxi 330006，ChinaCorresponding author：LIU Zunjing，Email：Abstract：Objective To investigate the clinical phenotype，imaging features，and skin pathologic
5、al changes in patients with sporadic adult-onset neuronal intranuclear inclusion disease（NIID）.MethodsA retrospective analysis was performed for the clinical data of seven patients with adult-onset NIID who attended Peking University Peoples Hospital from March 2018 to March 2021 and were diagnosed
6、based on NOTCH2NLC genetic testing，including clinical，imaging，and skin pathological manifestations.ResultsThe age of onset ranged from 33 to 73 years in these patients，with a mean of（54.4315.47）years.Besides the core symptoms such as cognitive impairment and encephalopathy-like episode，the main clin
7、ical manifestations also included gastrointestinal symptoms such as nausea，vomiting，abdominal pain，and diarrhea in the early stage.Among the seven patients，five were found to have abnormal hyperintensity on diffusion-weighted imaging along the corticomedullary junction.All seven patients were found
8、to have abnormal GGC repeat expansion in the untranslat-ed region of the NOTCH2NLC gene，which ranged from 93 to 177 times.Skin biopsy revealed intranuclear inclusions in su-doriferous duct epithelial cells and fibroblasts.Immunohistochemical staining showed positive p62，and thin filamentous ma-teria
9、l without a membrane structure was observed under an electron microscope.ConclusionsSporadic adult-onset NIID has high clinical heterogeneity，and dermal pathology and genetic testing are necessary means to make a confirmed 论著 收稿日期：2022-11-14；修回日期：2023-01-28作者简介：丛璐（1985），女，主治医师，博士，主要从事神经肌肉病方向研究，Email
10、:。通信作者：刘尊敬（1976），男，主任医师，博士，主要从事脑血管病方向研究，Email:。电子、语音版diagnosis.Journal of International Neurology and Neurosurgery,2023,50(1):50-54Keywords：neuronal intranuclear inclusion disease；NOTCH2NLC gene；gastrointestinal symptoms神经元核内包涵体病（neuronal intranuclear inclusion disease，NIID）是一种慢性进行性神经系统退行性疾病1，以神经元和体
11、细胞中存在嗜酸性透明核内包涵体（intranuclear inclusions）为特征2，其临床表型具有高度异质性3。但大部分NIID患者的颅脑磁共振成像（mag-netic resonance imaging，MRI）都特征性地表现为沿皮髓质交界区弥散加权成像（diffusion weighted imaging，DWI）呈异常高信号1，3，使其成为诊断成年型 NIID 的敏感指标4。NIID通常需要通过皮肤活检来确诊，检查细胞中是否存在嗜酸性的核内包涵体。2019年后，国内外多个团队5-8先后报道了NIID与NOTCH2NLC基因5非翻译区域（UTR）GGC重复扩展突变相关，明确了NIID
12、的致病基因，基因检测使临床确诊变得更为简单易行。在本研究中，我们回顾性地总结了7例经基因检测确诊为散发成年型 NIID 患者的临床、影像学和病理改变特征。1对象和方法1.1研究对象本研究为回顾性病例研究，病例来自2018年3月至2021年3月就诊于北京大学人民医院神经内科，经基因检测证实 NOTCH2NLC 基因 5UTR 中 GGC 重复扩增异常，以及经皮肤病理活检明确核内包涵体阳性的7例NI-ID患者。所有患者均签署知情同意书。符合中国生物伦理法和 赫尔辛基宣言 的规定。本研究获得北京大学人民医院医学伦理委员会的批准（批准号：2021PHB230-001）。1.2临床资料收集收集的临床资料
13、包括发病年龄、临床症状、家族史等，以及颅脑MRI、神经电生理、脑脊液等检查结果。采用简易精神状态检查（Mini-Mental State Examina-tion，MMSE）来评定患者是否存在认知功能障碍。1.3基因检测采用重复引物聚合酶链反应（repeat-primed poly-merase chain reaction，RP-PCR）来确定 NOTCH2NLC基因5UTR中的重复扩增。RP-PCR反应条件在Deng等8报道的反应体系基础上进行的。PCR引物混合物包含3个引物，即 NOTCH2NLC正向：5-FAM-GGCATTTGCGCCT-GT GCTTCGGACCGT-3；M13-（
14、GGC）4（GGA）2反向：5-CAGGAAACAGCTATGACCTCCTCCGCCGCC-3；M13-linker反向：5-CAGGAAACAGCTATGACC-3。电泳图中出现的锯齿状逐步降低的峰图提示存在GGC重复扩增。用荧光扩增子长度PCR（AL-PCR）来检测GGC重复扩展的长度。除了使用50 ng基因组DNA作为模板和不同的引物对，PCR混合物的组成与RP-PCR相同。NOTCH2NLC-AL 正向：5-vic-cat ttgcctgtgcttcggac-3；NOTCH2NLC-AL 反向：5-agagcggcagggcggcatctt-3。PCR条件与RP-PCR相同。在 35
15、00XL 基 因 分 析 仪（Thermo Fisher Scientific，Waltham，MA，USA）上进行毛细管电泳分离，采用 Gene-Mapper软件（Thermo Fisher Scientific）分析数据。利用扩增等位基因的最高信号峰的长度来计算重复次数。脆性X染色体综合征FMR1基因未见GGC异常扩增。1.4皮肤病理活检本组所有7例患者均进行了皮肤病理活检。取外踝上方10 cm处的皮肤；标本用4%的福尔马林溶液固定，石蜡包埋；切成 4 mm 厚的切片，进行苏木精伊红染色。一部分标本用2.5%戊二醛固定，随后用1%四氧化锇固定，并嵌入Epon 812中；超薄切片采用电子显微
16、镜检查。为了提高核内包涵体阳性的检出率，共进行了3次超微结构病理观察。1.5免疫组织化学染色组织切片后，进行p62抗体（sc-28359，Santa Cruz Bio-technology）和泛素（sc-471120，Santa Cruz Biotechnology，Santa Cruz，CA，USA）的免疫组织化学染色。2结果2.1临床特征本组7例患者均为成年人，其中男性4例，女性3例；起病年龄3373岁，平均（54.4315.47）岁。临床表现主要包括认知功能障碍（5例）、发作性脑病（4例）、头痛（3例）、构音障碍（1例）、肢体无力（1例）、震颤（2例）、膀胱功能障碍（2例）、瞳孔缩小（2例）。另外，有6例患者出现了消化道症状，其中恶心、呕吐4例，腹痛、腹泻2例。7例患者中均未发现视物异常和共济失调表现。本组患者均为散发型，无家族史。见表1。7例均进行了颅脑MRI检查，其中5例弥散加权成像（diffusion weighted imaging，DWI）可见皮髓交界区曲线样高信号；6例T2液体衰减反转恢复（fluid attented inver-sion recovery，FLAI
