1、复旦学报（医学版）Fudan Univ J Med Sci2023 May，50（3）补体旁路途径与经典途径活化在糖尿病肾病进展中的作用杨单植 张颖 权松霞 胡瑞敏 杨杨 杨雨蒙 邢国兰（郑州大学第一附属医院肾脏内科 郑州 450052）【摘要】目的研究补体系统活化成分在糖尿病肾病（diabetic kidney disease，DKD）患者血浆、尿液中的水平，并分析其与 DKD 临床、病理特征及预后的相关性。方法选取郑州大学第一附属医院经肾穿刺活检证实为 DKD 患者（DKD 组）50例，糖尿病（diabetes mellitus，DM）无肾损害患者（DM 组）及健康成年人（健康对照组）各
2、50例，采用酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）对血浆及尿液中 5种补体成分（H 因子、B 因子、P 因子、C1q、C5a）水平进行了测定。应用 COX 比例风险回归模型分析影响肾脏预后的独立危险因素，并绘制 ROC 曲线分析 B因子及 C5a预测肾脏预后的价值。结果DKD 患者血浆中补体 B因子、P因子、C1q及 C5a均显著高于健康对照组及 DM 组（P0.05），H 因子低于健康对照组（P=0.03）及 DM 组（P0.001）。尿补体 B因子、P因子及 C5a均显著高于健康对照组及 DM 组（P0.05），H 因子低于健康对照
3、组（P0.001）及 DM 组（P=0.008），3组尿 C1q水平无明显差异。旁路途径活化因子 H 因子、B 因子、P因子、C5a水平与蛋白尿程度、肾功能及肾组织病理改变程度有关。多因素 Cox风险比例分析显示，尿补体 B因子（HR=2.63，95%CI：1.3775.023，P0.001）及尿补体 C5a（HR=1.33，95%CI：1.061.668，P=0.014）是影响肾脏预后的独立危险因素。结论在 DKD患者中，补体旁路途径不同程度被激活，且与 DKD 患者蛋白尿、肾组织病理改变、较差的肾脏预后相关。而补体经典途径起始因子 C1q水平与 DKD的发生发展及预后无明显相关性。【关键词
4、】糖尿病肾病（DKD）；补体旁路途径；补体经典途径；肾脏病理；预后【中图分类号】R587.1 【文献标志码】A doi：10.3969/j.issn.1672-8467.2023.03.008Alternative and classical complement pathway activation in patients with diabetic kidney diseaseYANG Shan-zhi，ZHANG Ying，QUAN Song-xia，HU Rui-min，YANG Yang，YANG Yu-meng，XING Guo-lan（Department of Nephrolo
5、gy，the First Affiliated Hospital of Zhengzhou University，Zhengzhou 450052，Henan Province，China）【Abstract】Objective To analyze the levels of components in complement system，in plasma and urine of diabetic kidney disease（DKD）patients，and their correlation with clinical，pathological features and progno
6、sis.Methods The plasma and urine samples of 50 biopsy-diagnosed DKD patients（DKD group）and 50 cases of diabetic patients without no renal injury（DM group）and 50 cases of normal control groups were collected.Five complement components（factor H，factor B，factor P，C1q and C5a）were measured by enzyme-lin
7、ked immunosorbent assay（ELISA）.COX proportional hazard regression model was used to analyze the independent risk factors affecting renal prognosis，and ROC curve was drawn to analyze the value of factor B and C5a in predicting renal prognosis.ResultsIn DKD patients，plasma 国家自然科学基金面上项目（81870480）；国家重点研
8、发计划（2018YFC1314002）Corresponding author E-mail： 网络首发时间：2023-05-09 14 08 37 网络首发地址：https：/ of complement factor B，factor P，C1q and C5a were significantly higher than those in DM group and normal control subjects（P0.05），factor H was lower than the healthy control group（P=0.03）and the DM group（P0.001）.
9、Urine complement factor B，P factor and C5a were significantly higher than the healthy control group and the DM group（P0.05），and factor H was lower than the healthy control group（P0.001）and the DM group（P=0.008）.There was no significant difference in the level of urinary C1q among the three groups.Th
10、e levels of factor H，factor B，factor P and C5a were related to proteinuria，renal function and pathological changes of renal tissue.Multivariate Cox analysis showed that both urinary complement factor B（HR=2.63，95%CI：1.377-5.023，P0.001）and C5a（HR=1.33，95%CI：1.06-1.668，P=0.014）were independent risk fa
11、ctors for renal prognosis.Conclusion In DKD patients，the alternative complement pathway is activated to varying degrees and is associated with proteinuria，renal histopathological changes，and poor renal prognosis.There was no significant correlation between the levels of classical complement pathway
12、initiation factor C1q and the occurrence，development and prognosis of DKD.【Key words】diabetic kidney disease（DKD）；complement alternative pathway；complement classical pathway；renal pathology；prognosis*This work was supported by the General Program of National Natural Science Foundation of China(81870
13、480)and the National Key R&D Program of China(2018YFC1314002).日益增长的糖尿病发病率已经成为全球医疗保健领域的主要问题，每年有超过 100 万人的死亡可 归 因 于 糖 尿 病1。一 直 以 来，糖 尿 病 肾 病（diabetic kidney disease，DKD）的治疗方式集中在应用降糖药物、肾素-血管紧张素-醛固酮受体拮抗剂来控制血压及降血脂治疗，但糖尿病患者发展为DKD 并进展为终末期肾病的比例仍居高不下。既往研究认为，DKD 为非炎症性肾脏疾病，其发病机制涉及肾血流动力学改变、氧化应激、缺氧、肾素-血管紧张素-醛固酮系
14、统（RAAS）的过度激活以及高血糖状态下的分子修饰（即晚期糖基化终产物的形成）2。然而，全基因组转录组分析研究一致表明，炎性信号通路在 DKD 中被激活3。近年来，已有大量研究发现炎症在 DKD 发病中起着重要作用4-6。而作为固有免疫系统的重要组成部分，补体系统在DKD中的作用已经引起研究者的广泛关注。补体系统通常由经典途径、旁路途径和凝集素途径 3 种途径激活。以往关于补体系统在 DKD 的研究大多集中在凝集素途径上7-9。近年来，有线索提示经典途径和旁路途径在 DKD 发病机制中也有一定作用。Xu 等10对补体级联相关 hub 基因与DKD 临床特征的相关性分析表明，C1QA、C1QB、
15、C3、CFB 可能参与了 DKD 的发生发展。然而，这些补体活化途径及其在 DKD 发生发展中的作用仍不清楚。为全面了解补体经典途径与旁路途径在DKD 发生发展过程中的变化，探讨其可能的临床病理意义，本研究测定了 50 例各个阶段 DKD 患者血浆和尿液中补体旁路途径负向调节因子 H 因子，正向调节因子 B 因子、P 因子，经典途径起始因子 C1q以及补体活化终末产物5a的水平，并分析其与临床、病理指标及肾脏预后的关系，为 DKD 的诊治提供新的依据和思路。资 料 和 方 法研究对象 对 2018 年 8 月2021 年 1 月期间在郑州大学第一附属医院肾脏内一科进行肾脏活检 的 糖 尿 病
16、患 者 实 施 筛 查（图 1）。其 中 糖 尿 病（diabetes mellitus，DM）和 DKD 的诊断标准分别根据美国糖尿病协会制定标准11和 2010 年美国肾脏病理学会制定标准12。至少由 2 名肾脏病理学家进行诊断。排除标准：（1）合并各种感染，急性肾损伤、移植术后患者等；（2）患者本身存在可使血清补体活化的因素，如慢性肝病、类风湿关节炎、系 统 性 红 斑 狼 疮（systemic lupus erythematosus，SLE）活动期等；（3）合并免疫系统疾病病史患者；（4）存在其他可导致肾脏病变的患者。为了准确描 述 表 皮 生 长 因 子 受 体（epidermal growth factor 371复旦学报（医学版）2023年 5月，50（3）receptor，eGFR）下降的轨迹，将入组条件限制在以下患者：（1）在随访期内每年至少测量 3 次血清肌酐水平；（2）所有血清肌酐检测都在我院进行，以尽量减少方法学差异。最终，本研究共纳入 50 例DKD 患者，均于肾活检当天采集血、尿标本。同时收集同时期我院确诊的未合并肾病的糖尿病患者（DM 组）及健康体检者（健
