1、谢进等：不同白术样品中白术内酯、含量的比较93-加工贮藏 检测分析湖南农业科学（HUNAN AGRICULTURAL SCIENCES）引用格式：谢进，陈阳峰，何爽，等.不同白术样品中白术内酯、含量的比较 J.湖南农业科学，2023（7）：93-96.DOI:DOI:10.16498/ki.hnnykx.2023.007.0182023（7）：93-96中 药 白 术 为 菊 科（Composetae）苍 术 属（Atractylodes）植物白术（Atractylodes macrocephala Koidz）的干燥根茎1，原产于浙江宁波（为道地产区），现分布于我国的浙江、安徽、甘肃、湖南及
2、江西等地2。白术内酯（、）是一类从白术中提取的内酯化合物。近 20 a 来对白术内酯的研究表明，白术内酯具有抗癌、抗炎、抗血小板、抗骨质疏松、抗菌活性、保护神经系统的功能并有调节血糖和血酯的作用。由于结构上的差异，白术醇和白术醇都具有显著的抗癌活性，而白术醇和白术酮具有显著的抗炎和神经保护活性3-5。不同不同白术样品中白术内酯、含量的比较谢进1，陈阳峰2，何爽2，朱校奇1，宋荣1（1.湖南省农业科学院，湖南省农业环境生态研究所，湖南 长沙 410125；2.湖南农业大学园艺学院，湖南 长沙 410125）摘要：研究以岛津 Column Shim-pack GIST C18（250 nm4.6
3、nm）为色谱柱，甲醇-水为流动相，流速 1 mL/min，柱温 40，检测样品中的白术内酯。白术内酯和、的检测波长分别为 275 和 220 nm，进样量为 10 L，白术内酯的线性关系方程为 Y=1.049107X 4.090105（r=0.999 8）,在 41 023 g 范围内线性关系良好；白术内酯的线性关系方程为 Y=6.872106X 1.194106（r=0.999 0）,在3.7933 g范围内线性关系良好；白术内酯的线性关系方程为Y=4.819106X3.969105（r=0.999 0），在 3.7933 g 范围内线性关系良好。研究还测定了不同产地（山东、安徽、湖南）、不
4、同采收时间（2022 年 12 月 1、10、20、27 日）的白术和不同温度（50、60、70、80 和 90）所制白术的白术内酯（、）含量。结果表明：安徽亳州的白术样品中白术内酯、的含量较高，白术内酯、含量分别为 1.07、0.43、2.40 mg/g；以 12 月 20 日采收的白术样品中白术内酯、的含量较高，分别为 1.49、0.53、1.96 mg/g；而 50烘干白术样品中白术内酯、的含量较高，分别为 1.50、2.37、1.45 mg/g。关键词：白术；白术内酯；白术内酯；白术内酯；高效液相色谱中图分类号：S482.4文献标识码：A文章编号：1006-060X（2023）07-0
5、093-04Comparative Study on the Contents of Atractylenolide I,II and III in Atractylodes macrocephala Samples XIE Jin1,CHEN Yang-feng2,HE Shuang2,ZHU Xiao-qi1,SONG Rong1（1.Hunan Institute of Agricultural Environment and Ecology,Hunan Academy of Agricultural Sciences,Changsha 410125,PRC;2.College of H
6、orticulture,Hunan Agricultural University,Changsha 410125,PRC）Abstract：This study has revealed the differences of contents of atractylenolide I,II and III in Atractylodes macrocephala samples from various origins(Shandong,Anhui,Hunan),harvest time(2022,Dec.1st,10th,20th,and 27th)and drying temperatu
7、res(50,60,70,80 and 90).The seperation and detection of atractylenolide I,II and III was performed under the conditions of Shimadzu Column Shim-pack GIST C18(250 nm4.6 nm)chromatographic column,methanol-water mobile phase,1mL/min flow rate,and 40 C column temperature.The detection wavelength for atr
8、actylenolide I was 275 nm,for atractylenolide II and III was 220 nm,and the injection volume was 10L.The linear equation of atractylenolide I was Y=1.049107X4 .090 105(r=0.999 8),performing well in the range of 4-1,023 g.The linear equation of atractylenolide II was Y=6.872106X+1.194106(r=0.999 0),p
9、erforming well in the range of 3.7-933 g.The linear equation of atractylenolide III was Y=4.819106X3.969105(r=0.999 0),acting well in the range of 3.7-933 g.The detection results showed that the contents of atractylenolide I,II and III in the samples from Bozhou,Anhui were high,reaching 1.07,0.43 an
10、d 2.40 mg/g,respectively,in the samples harvested on Dec.20th were high,reaching 1.49,0.53 and 1.96 mg/g,respectively,and in the samples dried at 50 were high,reaching 1.50,2.37 and 1.45 mg/g,respectively.Key words：Atractylodes macrocephala Koidz;atractylenolide I;atractylenolide II;atractylenolide
11、III;high performance liquid chromatography收稿日期：20230509基金项目：湖南创新型省份建设专项高新技术产业科技创新引领计划（2020SK2033）作者简介：谢进（1984），女，满族，湖南株洲市人，助理研究员，主要从事植物生物化学与分子生物学研究。通信作者：宋荣湖南农业科学（HUNAN AGRICULTURAL SCIENCES）2023 年 7 月94-加工贮藏 检测分析的产区生产的白术，或同一产区不同时间采收的白术，白术内酯 3 种有效成分可能存在差异，试验收集了来自包括山东、安徽、湖南等地方的白术样品，进行白术内酯提取，通过高效液相色谱对其
12、白术内酯、的含量进行比较测定，并对湖南白术样品进行不同采收时期、不同温度烘干后其白术内酯、的含量的变化进行比较，研究成果有助于了解不同地区、不同采收时间及不同温度处理白术有效成分的差异，对白术有效成分的影响，同时为白术有效成分的质量控制提供了简单、快捷、可靠的方法。1材料与方法1.1试验材料、仪器与试剂试验仪器有岛津高效液相色谱 LD40DXR（日本岛津公司）和 BX5200H 超声波清洗仪（上海新苗医疗器械制造有限公司）。试验试剂包括白术内酯（纯度 99.8%）、白术内酯（纯度 99.8%）和白术内酯（纯度 99.8%）对照品（上海诗丹德标准技术服务有限公司），及甲醇（色谱纯，哈利威尔公司）
13、。白术样品采自山东、安徽、湖南等白术种植基地。1.2白术内酯提取、检测方法1.2.1标准品制备精准称取白术内酯、标准品2.8、2.8和3.07 mg，分别加入10 mL容量瓶中，加入甲醇至刻度，配制成标样原液，逐级稀释成 5个浓度梯度，并配制备成 5 组梯度混合标样，备用。1.2.2样品提取（1）不同来源白术样品提取。取1 g 白术干粉（经过 60烘干，磨粉，过筛后得到），加入 10 mL 甲醇，超声 30 min，过滤，取续滤液，作为供试品溶液。（2）不同处理温度白术样品提取。将白术样品采用 50、60、70、80 和 90 进行烘干，再采用不同来源白术样品的方法进行样品提取。1.2.3方法
14、评估将白术内酯、分别进入高效液相色谱检测，调整流动相洗脱梯度，将 3 个标准品完全分离，并添加标准品添加到样品中进行提取，得到了整个提取检测方法的回收率。2结果与分析2.1白术内酯提取、液相检测方法评估通过对白术内酯、标样分别进样检测，根据保留时间，色谱峰峰型等对色谱流动相梯度进行调整，得到最佳分离检测条件为：岛津 Column Shimpack GIST C18（250 nm4.6 nm）色谱柱，流动相：A 为甲醇，B 为水，洗脱梯度：016 min，40%20%B；16.120 min，20%0%B；20.130 min，0%B；30.135 min，40%B，柱温 40，进样量 10 L
15、。从图 1 可见，3 个样品峰完全分开，后期清洗平衡色谱柱，在高效分离样品的同时，对仪器进行了清洗平衡，节约了实验时间。将白术内酯、分别配置成 5 个浓度梯度：1.1、4.4、17.5、70 和 280 g/mL，白术内酯标样配置成5 个浓度梯度：1.2、4.8、19.2、76.75 和 307 g/mL，分别按浓度梯度混合，备用。通过试验，得到白术内酯、的标准曲线、相关系数及线性范围，同时对保留时间及其标准偏差，加标回收率进行了计算，得到表 1，说明该方法检测白术内酯、有良好的重复性和稳定性。2.2不同来源白术中白术内酯含量比较通过高效液相色谱对不同来源白术提取液进行分离检测，得到表 2 数
16、据，由数据比较可以看出，产自安徽亳州、湖南长沙高桥镇的白术样品中白术图 1梯度洗脱标样色谱图（1：白术内酯；2：白术内酯；3：白术内酯）600500400300200100002.55.07.510.012.51215.017.520.022.525.027.530.032.535.037.540.0500400300200100002.55.07.510.012.5315.017.520.022.525.027.530.032.535.037.540.0275 nm200 nm谢进等：不同白术样品中白术内酯、含量的比较95-加工贮藏 检测分析表 1白术内酯检测方法评估名 称保留时间（分）保留时间相对标准偏差（%）加标回收率（%）标准曲线相关系数（R2）线性范围（g）白术内酯12.570.60117.130.43Y=4.819106X 3.9691050.999 041 023白术内酯15.520.0899.530.51Y=6.872106X+1.1941060.999 03.7933白术内酯18.840.70101.100.49Y=1.049107X 4.090 1050.999 8
