1、第5 9卷 第3期2 0 2 3年0 6月青 岛 大 学 学 报(医 学 版)J OUR NA LO FQ I N G D AOUN I V E R S I T Y(ME D I C A LS C I E N C E S)V o l.5 9,N o.3J u n e 2 0 2 3 收稿日期2 0 2 2-0 1-0 7;修订日期2 0 2 2-0 6-2 9 基金项目 山东省自然科学基金青年基金项目(Z R 2 0 1 9 1 1-1 2 0 6 5 1)第一作者高珊珊(1 9 9 6-),女,硕士研究生。通信作 者 周 宇(1 9 7 3-),女,博 士,教 授,博 士 生 导 师。E-m
2、 a i l:y u z h o u 7 3 1 01 6 3.c o m。K v 7钾离子通道对大鼠条件性味觉厌恶记忆作用高珊珊,杨鑫,付嘉豪,邵非,翟洪霞,周宇(青岛大学基础医学院生理学教研室,山东 青岛 2 6 6 0 7 1)摘要 目的 探讨基底外侧杏仁核(B L A)微量注射K v 7钾离子通道激动剂或拮抗剂对大鼠条件性味觉厌恶(C TA)情绪记忆获取及提取的影响。方法 成年雄性W i s t a r大鼠B L A埋管后随机分为8组,实验组分别于不同时间经B L A微量注射K v 7钾离子通道激动剂(r e t i g a b i n e)或拮抗剂(X E-9 9 1),其对照组注射
3、生理盐水。采用C TA行为范式评价K v 7通道激动剂及拮抗剂对C TA情绪记忆获取及提取的影响。结果 训练前注射r e t i g a b i n e组大鼠味觉厌恶指数较注射生理盐水组大鼠明显下降,差异有统计学意义(t=3.3 8 4,P0.0 5)。训练前和记忆提取前注射X E-9 9 1组大鼠与注射生理盐水组大鼠相比,味觉厌恶指数差异均无显著性(P0.0 5)。结论 K v 7钾离子通道的激活抑制C TA记忆获取,该作用可能与降低B L A神经元兴奋性有关。关键词 钾通道,电压门控;基底外侧核;情绪;记忆;大鼠 中图分类号 R 3 3 8.2 文献标志码 A 文章编号 2 0 9 6-5
4、 5 3 2(2 0 2 3)0 3-0 3 6 4-0 3d o i:1 0.1 1 7 1 2/j m s.2 0 9 6-5 5 3 2.2 0 2 3.5 9.0 1 9 开放科学(资源服务)标识码(O S I D)网络出版 h t t p s:/k n s.c n k i.n e t/k c m s/d e t a i l/3 7.1 5 1 7.R.2 0 2 3 0 3 0 3.1 1 1 7.0 0 5.h t m l;2 0 2 3-0 3-0 6 1 0:0 9:4 3E F F E C TO FK V 7C H A N N E LO NC O N D I T I O N
5、E DT A S T EA V E R S I O NMEMO R YI NR A T S G A OS h a n s h a n,Y ANGX i n,F UJ i a-h a o,SHA OF e i,ZHA I H o n g x i a,ZHO U Y u(D e p a r t m e n to fP h y s i o l o g ya n dP a t h o p h y s i o l o g y,S c h o o lo fB a s i cM e d i c i n e,Q i n g d a oU n i v e r s i t y,Q i n g d a o2 6 6
6、 0 7 1,C h i n a)A B S T R A C T O b j e c t i v e T o i n v e s t i g a t e t h ee f f e c t o fm i c r o i n j e c t i o no fK v 7c h a n n e l a g o n i s t o r a n t a g o n i s t i n t o t h eb a s o l a t e r a la m y g d a l a(B L A)o nt h ea c q u i s i t i o na n dr e t r i e v a lo fc o n
7、d i t i o n e dt a s t ea v e r s i o n(C T A)m e m o r yi nr a t s.M e t h o d s A d u l tm a l eW i s t a rr a t sw e r er a n d o m l yd i v i d e d i n t oe i g h t g r o u p s a f t e rB L Ac a t h e t e r e m b e d d i n g.T h e r a t s i ne x p e r i m e n t a l g r o u p sw e r eg i v e n i
8、n-t r a-B L A m i c r o i n j e c t i o no fK v 7c h a n n e l a g o n i s t(r e t i g a b i n e)o r a n t a g o n i s t(X E-9 9 1),a n dt h o s e i nc o n t r o l g r o u p sw e r eg i v e n i n j e c-t i o no fn o r m a l s a l i n e.T h eC T Ab e h a v i o r a l p a r a d i g mw a su s e d t oe v
9、 a l u a t e t h e e f f e c t o fK v 7c h a n n e l a g o n i s t o r a n t a g o n i s t o n t h e a c-q u i s i t i o na n dr e t r i e v a l o fm e m o r y.R e s u l t s C o m p a r e dw i t h t h e r a t s i n j e c t e dw i t hn o r m a l s a l i n e,t h e r a t s i n j e c t e dw i t hr e t i
10、 g a b i n eb e f o r eC T At r a i n i n gh a da s i g n i f i c a n t r e d u c t i o n i n t a s t e a v e r s i o n i n d e x(t=3.3 8 4,P0.0 5).T h e r ew a sn o s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e i n t a s t e a v e r s i o n i n d e xb e t w e e n t h e r a t s i n j e c t e dw i t hX E
11、-9 9 1a n d t h o s e i n j e c t e dw i t hn o r-m a l s a l i n eb e f o r e t r a i n i n ga n dm e m o r yr e t r i e v a l(P0.0 5).C o n c l u s i o n K v 7c h a n n e l a c t i v a t i o n i n h i b i t s t h ea c q u i s i t i o no fC T Am e m o r y i nr a t s,p o s s i b l yb yr e d u c i n
12、gB L An e u r o n a l e x c i t a b i l i t y.K E Y WO R D S p o t a s s i u mc h a n n e l s,v o l t a g e-g a t e d;b a s o l a t e r a l n u c l e a r c o m p l e x;e m o t i o n s;m e m o r y;r a t s 杏仁核由基底外侧杏仁核(B L A)和中央杏仁核构成,是情绪学习和记忆最重要的脑结构。B L A的神经元回路对于情绪记忆的获取、巩固、提取和消退至关重要1-4。B L A神经元表达多种不同类型
13、的受体,具有高度的可塑性。B L A脑区NMD A受体依赖的突触可塑性改变可能是情绪记忆获取的关键5-7。K C NQ即K v 7是一种电压依赖的钾离子通道,它参与调节神经元的兴奋性,在学习记忆、行为及感知觉功能调节中起到至关重要的作用8-1 1。抑制K v 7钾离子通道可以通过增强突触后动作电位爆发期间和之后的除极化促进NMD A受体开放,有助于诱导长时程增强的产生1 2。因此,我们猜测调控B L A脑区的K C NQ钾离子通道可能会影响情绪记忆的多个进程,包括记忆的获取、巩固以及提取。本研究旨在利用药理学方法和条件性味觉厌恶(C T A)行为范式,探讨B L A K v 7钾离子通道活动对
14、大鼠味觉厌恶情绪记忆获取和提取的影响。1 材料与方法1.1 实验材料1.1.1 实验动物 成年雄性W i s t a r大鼠,体质量 3期高珊珊,等.K v 7钾离子通道对大鼠条件性味觉厌恶记忆作用3 6 52 8 03 2 0g,购自中国济宁绿康药业实验动物中心。大鼠于(2 12)恒温、(5 01 0)%恒湿、1 2h/1 2h等长日夜循环光照条件下饲养,可自由进水、饮食。实验开始前大鼠至少适应实验室环境1周。本研究得到青岛大学动物伦理委员会的批准。1.1.2 主要试剂 X E-9 1 1和r e t i g a b i n e购自英国TO C R I S公司;氯化锂(L i C l)和甜味
15、剂邻苯甲酰磺酰亚胺钠购于美国S i g m a公司。1.2 B L A埋管大鼠腹腔注射8 0g/L的水合氯醛溶液5m L/k g,待深度麻醉后将其固定于立体定位仪(瑞沃德)上,在颅骨正中顶端开口后剥离组织露出清晰的前囟,将长度为1.5c m的不锈钢外导管(2 2g a u g e)放置于双侧B L A区的上方(前囟后2.8mm,左右旁开各5.2mm,深度7.5mm),用4 1 6胶和自凝牙托粉固定导管,并用不锈钢内芯封闭导管,以免外部杂物堵塞导管。1.3 动物分组及局部微量注射将埋管后大鼠随机分为8组,实验组分别于不同时间经B L A微量注射r e t i g a b i n e或X E-9
16、9 1,其对照组注射生理盐水。微量注射器通过聚乙烯管与注射用内管相连接,注射用内管深入到B L A区域。实验组使用微量蠕动泵以0.2 5L/m i n恒定流量将r e t i g a b i n e(5m o l/L,每侧0.7 5L)1 3或X E-9 9 1(1m o l/L,每侧0.7 5L)1 4缓慢注射到B L A中,对照组注射等量生理盐水。给药2 03 0m i n后进行C T A实验。1.4 C T A实验实验开始前大鼠先禁水2 4h,然后进行适应。在适应时,准备两个装有1 5m L自来水的吸管,让大鼠饮用1 0 m i n;两管交换位置,再让大鼠饮 用1 0m i n。每天定时进行适应,共适应4d。第5天进行训练,准备两个相同的吸管,各装有2g/L的甜味剂1 5m L,让大鼠饮用1 0m i n。2 0m i n后腹腔注射1 0 0mm o l/LL i C l(2m L,1 0 0g),2 4h后进行测试,测试前经埋管注射生理盐水或r e t i g a b i n e或X E-9 9 1,观察给药对C T A记忆的影响。用厌恶指数(A I)来定量评价C T A记忆,
