1、718安徽医科大学学报 Acta Universitatis Medicinalis Anhui 2023 Ma y；58(5)网络出版时间：2023-04-21 11：04：29 网络出版地址:h t t ps：/k n s.c n k i.n et/k c ms/d et a il/34.1065.R.20230420.1338.003.h t ml血清外泌体miR-30d-5p靶向RHOB在三氯乙烯药疹样皮炎中的作用蔡曙阳打王 慧巴张雪松1,左绪磊1,马金茹1，洪依婷1,吴奇峰,朱启星心摘要 目的 检测三氯乙烯药疹样皮炎（OMDT）患者血清 外泌体中miR-30d-5p的表达水平及其与肝
2、功能的相关性，再对miR-30d-5p进行生信分析并验证下游靶基因RHOB。方法 收集6例OMDT患者和6例健康对照者血清样本提 取血清外泌体。透射电镜、纳米粒子跟踪分析以及West er n bl o t法对外泌体进行鉴定后提取miRNA,检测其中miR-30d-5p表达水平并与肝功能作相关性分析，用miRWa l k及 miRBD数据库预测miR-30d-5p的靶基因，进行功能聚类和 途径富集分析，最后通过双荧光素酶报告基因实验验证靶基 因RHOBo结果6例OMDT患者在发病高峰期时血清外 泌体中miR-30d-5p表达水平明显降低（P 0.05），并且与肝 功能指标丙氨酸氨基转移酶、天门
3、冬氨酸氨基转移酶、Y-谷 氨酰胺基转移酶水平均呈负相关（相关系数分别为:儿=-0.943,P=0.005；r,=-0.886,P=0.019；r,=-0.886,P=0.019）。生信分析及双荧光素酶报告基因实验显示 RHOB是miR-30d-5p的直接靶基因。结论 OMDT患者血 清外泌体miR-30d-5p表达降低，与肝功能指标呈负相关，并 且可能通过靶向RHOB参与三氯乙烯所致肝损伤过程。关键词 三氯乙烯;外泌体；miR-30d-5p；RHOB中图分类号R135.7文献标志码A 文章编号1000-1492（2023）05-0718-07 d o i:10.19405/j.c n k i.
4、issn l OOO-1492.2023.05.003三氯乙烯（t r ic h l o r o et h y l en e,TCE）是一种工业上 常用的有机溶剂，在TCE接触的职业工人中，少部 分可出现类似于药疹样皮炎的皮肤大面积表皮坏死 和剥脱,临床上称为三氯乙烯药疹样皮炎（o c c u pa-2022-12-10 接收基金项目：国家自然科学基金（编号：82173494、81874259）作者单位J安徽医科大学公共卫生学院职业卫生与环境卫生学系,合肥2300322安徽医科大学第一附属医院皮肤病研究所，合肥2300223安徽医科大学国家教育部皮肤病学重点实验室，合肥230022广东省职业病
5、防治院，广州510000作者简介:蔡曙阳，男，硕士研究生；朱启星，男，教授,博士生导师，责任作者,E-ma il:zq x in g y ea h,n ett io n a l d er ma t it is med ic a men t o sa-l ik e o f t r ic h l o r o et h y l-en e,0MDT）1o除了皮肤损伤夕卜，部分OMDT患者 还伴有严重的肝功能异常，因此，开展TCE引起的 肝脏损伤及其机制研究，具有重大的职业卫生意义O 目前,OMDT通常被认为是一种由T淋巴细胞 介导的IV型变态反应为主的复合免疫反应，早些 研究发现多种免疫细胞可以分泌外
6、泌体，如巨噬细 胞、树突状细胞和NK细胞，这些外泌体广泛 存在于血液、尿液和唾液等体液中，参与免疫细 胞间的通信作用。外泌体中miR-30d-5p被发现参 与多种免疫反应,如非分型流感嗜血杆菌引起的急 性中耳炎、布氏弧杆菌引起的胃肠炎等，但是 在TCE引起的免疫性肝脏损伤中miR-30d-5p是否 发挥作用还尚不明确。因此，该研究旨在探索0M-DT患者肝脏损伤机制中miR-30d-5p的作用及可能 参与的生物信息学过程。1材料与方法1.1病例资料 选取2020年广东省职业病防治院 收治的OMDT患者6例，所有病例均按照GBZ 1852006（职业性三氯乙烯药疹样皮炎诊断标准 进行诊断。纳入标准
7、:有明确的TCE接触史;出现以皮疹、发热、肝功能损害和浅表淋巴结肿 大等临床表现;既往身体健康,无药物、食物过敏 史。排除标准:有激素用药史或肝毒性药物使用 史;有肝病家族史;发病前接触其他明确的职 业危害因素。另在安徽医科大学校医院收集肝功能 正常的健康志愿者6例，与患者按照年龄（3岁）和性别1:1匹配。患者肝功能指标结果由住院病 历中的检测报告单获得。本研究经安徽医科大学第 一附属医院临床医学研究伦理委员会审核批准（批 准号=5101302），所有患者均签署知情同意书。1.2仪器与试剂血清外泌体提取试剂盒、miRNA 提取试剂盒（德国Qia g en公司）；miRNA反转录试 剂盒生工生物
8、工程（上海）股份有限公司;Mix溶 液（瑞士 Ro c h e 公司）；HSP-70 抗体、Fl o t il l in-1 抗 体、CD9抗体（英国Abea m公司）；RIP A裂解缓冲 安徽医科大学学报 Acta Universitatis Medicinalis Anhui 2023 Ma y；58(5)719液、P MSF蛋白酶抑制剂（上海碧云天生物技术有限 公司）；P VDF膜、West em bl o t发光液试剂盒（德国 GE Hea l t h c a r e 公司）；miR-30d-5p mimic s、miR-NC mimic s、野生和突变RH0B质粒、转染试剂（上海吉
9、玛制药技术有限公司）；HEK-293T细胞由安徽医科 大学基础医学院赠予;DMEM培养基、胎牛血清、0.25%胰蛋白酶（含EDTA）JOO|x g/ml链霉素、100 U/ml青霉素（美国Gibic o公司）。聚合酶链式反应 P CR 仪（瑞士 Ro c h e 公司，Lig h t Cy c l er 96）；纳米颗 粒跟踪分析仪（德国P a r t ic l e Met r ix公司，P MX-120）;透射电子显微镜（美国Th er mo Sc ien t if ic公司，Ta i o s L120C G2）；West er n bl o t 全自动化学发光成 像系统（上海勤翔科学仪器有
10、限公司，Ch emisc o pe 6000 To u c h）;微孔板发光检测仪（美国P r o meg a公 司，Gl o Ma x 96）。1.3血清收集与外泌体提取 用含有促凝剂的采 血管收集新鲜全血，室温静置5 min后以3 000 r/min离心15 min,将上层血清分装置于-80七冰箱 保存。取2 ml血清样本，按照血清外泌体提取试剂 盒说明书进行操作，首先将溶解后的血清用0.22 pc m过滤器过滤，与缓冲液XBP等体积混合,2 000 r/min离心1 min,之后加入3.5 ml的缓冲液XWP,12 000 r/min离心5 min,最后加入400以的缓冲液 XE,2 0
11、00 r/min离心5 min,用P BS溶液重悬收集外 泌体。1.4外泌体鉴定1.4.1透射电子显微镜观察将收集的外泌体用 200 pel的P BS溶液重悬后滴至洁净封口膜上，然后 用银子夹取一枚载网置于外泌体液滴上，悬浮10 min,用滤纸缓慢吸干;后转移载网到2.5%戊二醛 液滴上，悬浮5 min,用滤纸吸干;最后将载网转移到 去离子水液滴上漂洗10次，每次2 min,漂洗完毕后 用滤纸吸干，转移载网到40 g/L乙酸双氧铀液滴上 染色10 min,滤纸吸干后转移载网到10 g/L甲基纤 维素液滴上染色5 min,滤纸吸干液体后室温静置干 燥10 min,放入样品架电镜下观察记录。1.4
12、.2纳米颗粒跟踪分析首先用去离子水清洗 机器样本池,然后以聚苯乙烯微球（100 n m）标准品 对机器进行校准,再使用1 X P BS溶液清洗机器样 本池。准备工作完成后将外泌体样本用P BS溶液 稀释至1 x l O/ml,用注射器注入纳米颗粒跟踪分 析仪，每个样本重复测量3次,软件会对样本里颗粒 的运动特征进行记录，同时加以分析后会得到粒径-浓度分布图数据，可以检测外泌体样品的粒径大 小。1.4.3 West er n bl o t法检测外泌体标志蛋白 提取 外泌体样品蛋白并定量，然后使用SDS-P AGE进行 电泳分离,200 mA转膜3 h,将P VDF膜在5%脱脂 牛奶中室温封闭2
13、ho之后将膜与HSP-70（l:1 000）、Fl o t il l in-l（l:1 000）、CD9（l:1 000）抗体 一起置于4戏孵育过夜。第2天，将膜在含有 0.05%Tw een-20 的 TBST 中洗涤3 次，每次 10 min,然后与山羊抗兔Ig G抗体或山羊抗鼠Ig G抗体（1:5 000）起室温孵育2 h。将膜在含有0.05%Tw een-20的TBST中洗涤3次，每次10 min,用ECL 检测试剂盒进行显影。1.5外泌体RNA提取与qRT-PCR检测 使用外 泌体RNA纯化试剂盒提取血清外泌体中包含miR-NA的总RNA,采用加尾法逆转录为c DNA。于P CR 仪
14、中进行扩增，扩增条件:95弋预变性5 min后以 95 V 15 s、52 V 30 s、72 C 30 s 循环 45 次。所得 结果使用比较循环阈值（2-AACt）法分析，以miR-16 作为内参基因，计算miR-30d-5p的相对表达量，每 个样本重复检测3次。引物序列:miR-16（F）：GC-TAGCAGCACGTAAATATTGGCG；miR-30d-5p（F）：TCCTTCATTCCACCGGAGTCTG；通用引物（R）：CGAGGTATTCGCACTGGATACGAC。1.6细胞培养与双荧光素酶报告基因实验验证 将HEK-293T细胞接种于含10%胎牛血清的DMEM 培养基中，
15、置于37咒、5%C02的培养箱中常规培 养。使用购买的RHOB质粒与miR-30d-5p（miR-NC）模拟物进行实验。取对数生长期的HEK-293T 细胞以2X105个/孔的密度接种于6孔板上，根据 说明书进行操作，分别将配套的转染试剂与miR-NC 模拟物、miR-30d-5p模拟物、野生型RHOB质粒、突 变型RHOB质粒等共同加入细胞，随机分为4组:野生型+miR-30d-5p组（共转染野生型质粒和miR-30d-5p模拟物）、野生型+miR-NC组（共转染野生 型质粒和miR-NC模拟物）、突变型+miR-30d-5p组（共转染突变型质粒和miR-30d-5p模拟物）、突变型+miR
16、-NC组（共转染突变型质粒和miR-NC模拟 物）,6 h后弃去换成新的培养基，再过12 h左右完 成转染过程,此时检测各组中萤火虫荧光素酶活性 和海肾荧光素酶活性。1.7生物信息学分析 采用功能聚类（g en e o n t o l og y,GO）数据库对基因产物的属性进行分析，它包含 三大类:生物学过程（bio l o g ic a l pr o c ess,BP）;细胞组 分（c el l u l a r c o mpo n en t,CC）；分子功能（mo l ec u l a r 720安徽医科大学学报 Acta Universitatis Medicinalis Anhui 20
17、23 Ma y;58(5)f u n c t io n,MF)o 在 Gen e On t o l o g y 中输入 miR-30d-5p,并选择物种为人类，检索后得到富集结果。途径 富集(k y o t o en c y c l o ped ia o f g en es a n d g en o mes,KEGG)是分析基因功能、联系基因组信息和功能信 息的数据库。在本研究中，使用KEGG数据库中的 代谢通路数据库进行检索分析，探索miR-30d-5p的 靶基因可能与哪些通路相关。1.8统计学处理 采用SP SS 25.0软件和Gr a phpa d P r ism 8软件进行统计分析，非
18、正态分布数据以 M(P25,P75)表示,采用非参数检验,配对样本比较 采用Wil c o x o n符号秩和检验，独立样本组间比较采 用Kr u sk a l-Wa l l is H检验，相关性分析采用秩相关(Spea r ma n相关)，正态分布数据以 土 s表示，组间 比较采用单因素方差分析(AN0VA),组间均数两两 比较采用最小显著性差异法(LSD),检验水准a取 0.05(双侧)。P 0.05)02.2血清外泌体的鉴定电镜观察外泌体呈圆形、椭圆形，具有双层脂质包膜结构,West er n bl o t法检 测发现外泌体特征性膜蛋白CD9、Ho t o l l in-1和 HSP 7
19、0表达阳性，纳米颗粒跟踪分析仪检测外泌体 粒径约200 r n n,均符合外泌体的特征，见图lo2.3 血清外泌体中miR-30d-5p基因表达水平的 改变q RT-P CR结果显示，对照组、发病高峰期组 和发病恢复期组血清外泌体中miR-30d-5p相对表 达水平分别为：0.90(0.58,2.12),0.14(0.01,0.55),0.93(0.73,1.29)o发病高峰期组血清外泌 体中miR-30d-5p表达水平明显低于其他两组，差异 有统计学意义(H=6.398,P=0.034),见图2。2.4 OMDT患者治疗前后肝功能指标水平的改变 肝功能检査结果显示,6例患者入院时发病高峰期天
20、门冬氨酸氨基转移酶(a spa r t a t e t r a n sa min a se,AST)、丙氨酸氨基转移酶(a l a n in e a min o t r a n sf er a se,ALT)、丫-谷氨酰胺基转移酶(丫-g l u t a my l t r a n sf er a se,GGT)明显升高,与出院时发病恢复期比较差异有统 计学意义(Z=-2.201,P=0.028；Z=-2.201,P=0.028；Z=-2.201,P=0.028),见图 3。2.5 OMDT患者发病高峰期时肝功能指标与 miR-30(b5p表达水平的相关性分析通过相关性 分析发现，患者发病高峰期
21、时血清外泌体miR-30d-5p相对表达量与AST、ALT、GGT水平均呈负相关,见表1。表1 OMDT患者血清外泌体miR30d5p表达水平与肝功能指标的相关性分析肝功能指标rs值p值AST-0.9430.005ALT-0.8860.019GGT-0.8860.0192.6 OMDT患者血清miR-30d-5p表达水平的生 物信息学分析 在miRWa l k数据库中筛选出了 535 个miR-30d-5p的候选靶基因，在miRBD数据库中 筛选出了 736个miR-30d-5p的候选靶基因，两个数 据库的交集显示了46个候选靶基因，采用GO分析A对照组蠢a，翳a图1血清外泌体鉴定A:血清外泌
22、体的透射电镜观察;B:West er n bl o t法检测外泌体特征性膜蛋白;C：纳米颗粒跟踪分析观察安徽医科大学学报 Acta Universitatis Medicinalis Anhui 2023 Ma y；58(5)7213 2 13 2 1*放衩黒ds,POWH电赴豹京T 丄0-a b c图2 患者各组血清外泌体miR0d-5p表达水平a:对照组;b:发病高峰期;c:发病恢复期;与对照组比较:0.05；与发病恢复期比较:#P 0.05 和KEGG分析对这些候选靶基因结果进行进一步 研究。GO分析从生物学过程、细胞组分和分子功 能三个方面对结果进行描述，发现miR-30d-5p主要
23、参与钙调素结合与钙调蛋白依赖性蛋白激酶的激活 等73个分子功能，异三聚体G蛋白与转运囊泡膜 等81个细胞组分以及血管形态学重构与肽基丝氨 酸磷酸化等172个生物学过程，图4中展示的是相 关性较为密切的前10个结果。KEGG分析表明大 多数候选靶基因在胆碱能突触、破骨细胞分化、Ape-l in信号通路、Wn t信号通路和Ox y t o c in信号通路等 途径中富集，图4中展示的是相关性较为密切显著 的前30个条目。上述结果说明miR-30d-5p广泛参 与机体免疫反应的生理病理学过程。2.7 miR-30d-5p靶向调控RHOB基因 为进一 步明确miR-30-5p发挥生物学功能的可能机制，
24、在 上述生信分析结果中选取RHOB基因进行下一步 研究。利用psiCHECK2质粒作为骨架，将预测的io o oo o o6060(T/n I H D D(T/n I H D Do o20200000440000b cO O00003 3J J2 2(T/f w r I V0000 o o(T/n l H s vI b b5000000o o0-b图3 OMDT患者肝功能指标水平b:发病高峰期;c:发病恢复期;与发病恢复期比较:*P 0.05To p 30 o f En r ic h men tP值0 08 10.060.040.02 List Hit1屮勵*2 4，二；豐聖芒t1 wgir
25、t ug pa”n耐$屮WISAm07 14En r ic h men t21 28 35sc o r e图4功能聚类分析和生物通路分析722安徽医科大学学报 Acta Universitatis Medicinalis Anhui 2023 Ma y;58(5)miR-30d-5p与RHOB结合部位序列及其突变体序 列剪切并插入到萤火虫荧光素酶基因下游，分别构 建野生和突变的RHOB表达载体，与miR-30d-5p模 拟物或miR-NC模拟物同时转染入293T细胞进行 双荧光素酶活性检测实验。结果显示：转染miR-30d-5p模拟物可显著下调带有RHOB野生3，-UTR 序列的报告基因荧光素
26、酶活性，而靶基因序列突变 后的荧光素酶活性不受影响，转染miR-NC模拟物 后不影响野生和突变组的报告基因荧光素酶活性,差异有统计学意义(F=11.458,P=0.003),见图 50以上结果证明miR-30d-5p模拟物可特异性靶向 结合RHOB的3，-UTR序列，从而调控RHOB的表 达水平。预测结合位点序列:RHOB 3，UTR：.AUGGUGAGCUUAUGAUGUUUACA.；miR-30d-5p 3 UTR:GAAGGUCAGCCCCUACAAAUGUOd e f g图5双荧光素酶报告基因d：miR-30d-5p模拟物+野生型ROHB质粒；e：miR-30d-5p模拟 物+突变型R
27、OHB质粒;f：miR-NC模拟物+野生型ROHB质粒;g：miR-NC模拟物+突变型ROHB质粒miR-30d-5p模拟物+野生 型RHOB质粒比较：*P 0.053讨论职业人群暴露TCE主要通过呼吸道和皮肤进 入机体发挥毒性作用，影响多种脏器,其中以肝脏最 为多见，可继发肝炎等多种疾病，严重影响患者预 后。本研究6例患者在发病高峰期肝功能指标异常 升高，存在明显的肝脏损伤。目前OMDT的肝损伤 发病机制并未完全阐明，有待进一步研究。一项研究如显示TCE暴露工人的外周血血清 miR-150-5p等miRNA分子表达水平有明显改变，另 一项研究显示血清外泌体miR-21-5p和miR-339-
28、5p表达水平与职业性三氯乙烯超敏反应综合 征相关，外泌体miR-21和miR-690也被发现加重了 TCE介导的免疫炎症反应。因此,血清外泌体包 裹的miRNA作为一种稳定的功能分子，无论是作为 临床治疗的靶点,还是作为早期预测或诊断的生物 标志物，在OMDT的临床研究中都具有广阔的前 景。先前的研究表明,miR-30d-5p可以通过参与 T细胞与B细胞的激活调控机体的免疫反应，并且 与非酒精性脂肪性肝等多种肝脏疾病的发生发展有 关,结合一项关于TCE暴露人群miRNA的芯片研 究，其中miR-30家族有明显差异表达，因此本研 究选择了 miR-30d-5p进行深入探讨。本研究收集了 OMDT
29、患者的血清后提取外泌 体，并对其进行鉴定。目前普遍认为外泌体的直径 在30-150 n m之间,微囊泡的宜径一般在100-1 000 n m之间，本研究结果中显示其直径约为200 n m,属于粒径偏小的一部分,参考相关文献后依然 选择外泌体对其进行描述电镜结果显示其呈 圆形、椭圆形，具有双层脂质包膜结构,West er n bl o t 结果显示其表面的特殊蛋白CD9,Fl o t o l l in-1和 HSP 70表达呈阳性，与文献报道的结果一致如，为 后续研究奠定了基础。q RT-P CR结果显示，OMDT 患者发病高峰期时血清外泌体的miR-30d-5p水平 明显降低,并且与AST、A
30、LT和GGT指标呈现负相 关，推测血清外泌体miR-30d-5p可能参与了 OMDT 患者的肝脏损伤的过程。对miR-30d-5p进行靶基因的预测及生物学信 息分析结果显示,miRWa l k及miRBD数据库共预测 到46个miR-30d-5p的可能靶点，其中RHOB是一 种小的GTP酶，属于GTP a se信号分子家族，是细胞 分裂、膜泡运输、伤口愈合或免疫监视等多种细胞和 生理过程中的关键介质，同时还被发现参与非酒精 性脂肪肝病、肝纤维化等多种肝脏损伤切，这与GO 分析结果高度相似。KEGG结果显示了 RHOB可能 参与的信号通路，其中包括c AMP、Wn t、c a l c iu m在
31、 内的大多数都与免疫性肝病密切相关。miR-30d-5p 与RHOB的靶向关系在多个网站被预测到(h t t p：/w w w.t a r g et sc a n,o r g、h t t p：/g en o me,u c sc.e d u)，双荧 光素酶报告基因结果显示,miR-30d-5p模拟物可特 异性靶向结合RHOB的3，-UTR序列，说明miR-30d-5p可以负向调控RHOB的表达，本研究虽然未 能检测OMDT患者肝脏的RHOB表达水平,但是在 课题组正在进行的TCE致敏小鼠模型研究基础上 发现致敏阳性鼠的肝脏组织中RHOB基因表达水 安徽医科大学学报 Acta Universita
32、tis Medicinalis Anhui 2023 Ma y；58(5)723平明显升高，提示RHOB有望成为OMDT的治疗靶 点之一O综上所述,OMDT患者血清外泌体miR-30d-5p 表达水平降低，与肝脏损伤程度呈负相关,并且本研 究确定了 miR-30d-5p与RHOB基因的靶向调控关 系，为深入研究OMDT患者肝损伤的具体调控机制 提供了指导方向，但本研究实验中并未对miR-30d-5p的表达进行干预，因此还需要进一步研究以获得 确定性的结论。参考文献1 Lin D,Wa n g D,Li P,e t a l.Dy n a mic a n a l y sis o f per iph
33、 er a l bl o o d TCR bet a-c h a in CDR3 r eper t o ir e in o c c u pa t io n a l med ic a men t o sa-l ik e d er ma t it is d u e t o t r ic h l o r o et h y l en e J.Sc i Rep,2021,11(1):9971.2邓丽丹，邓立华,林大枫，等职业性三氯乙烯药疹样皮炎患者 外周血T和B淋巴细胞分析J中华劳动卫生职业病杂志，2020,38(10)：731-5.3 Li Z,Su o B,Lo n g G,et a l.Ex o
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40、 n a l t r ic h l o r o et h y len e h y per sen sit iv it y sy n d r o me J.J Oc c u p Med To x ic o l,2021,16(1):31.12 Ba n eijee N,Wa n g H,Wa n g G,et a l.Dif f er en t ia l ex pr essio n o f miR-NAs in t r ic h l o r o et h en e-med ia t ed in f l a mma t o r y/a u t o immu n e r espo n se a n
41、d it s mo d u l a t io n by su l f o r a ph a n e:d el in ea t in g t h e r o l e o f miRNA-21 a n d miRNA-690 J.Fr o n t Immu n o l,2022,13:868539.13 Er o g l u F,Do k u r M,Ul u Y.Mic r o RNA pr o f il e in immu n e r espo n se o f a l v eo l a r a n d c y st ic ec h in o c o c c o sis pa t ien t
42、s J.P a r a sit e Immun o l,2021,43(7)：el 2817.14 Lee K M,Ba ssig B A,Zh a n g L,et a l.Asso c ia t io n bet w een o c c u pat io n a l ex po su r e t o t r ic h l o r o et h y l en e a n d ser u m l ev el s o f mic r o R-NAs：a c r o ss-sec t io n a l mo l ec u l a r epid emio l o g y st u d y in Ch
43、 in a J.In t Ar c h Oc c u p En v ir o n Hea l t h,2019,92(8)：1077-85.15 To h W S,La i R C,Zh a n g B,e t a l.MSC ex o so me w o r k s t h r o u g h a pr o t ein-ba sed mec h a n ism o f a c t io n J.Bio c h em So c Tr a n s,2018,46(4):843-53.16 Wh it esid e T L.Th e emer g in g r o l e o f pl a sma
44、 ex o so mes in d ia g n o sis,pr o g n o sis a n d t h er a pies o f pa t ien t s w it h c a n c er f J.Co n t emp On c o l(P o zn),2018,22(l A)：38-4017 黄燕飞，王爱华,王喜全，等Rh o激酶及其抑制剂与神经系统 疾病宁夏医学杂志,2019,41(7)：668-72.Role of serum exosomal miR-30d-5p targeting RHOB in occupational medicamentosa-lik e derm
45、atitis due to trichloroethyleneCa i Sh u y a n g1,Wa n g Hu i2,3,Zh a n g Xu eso n g1,Zu o Xu l ei1,Ma Jin r u1,Ho n g Yit in g1,Wu Qif en g4,Zh u Qix in g1,2,3C Dept of Occupational Hygiene and Erwironmental Hygiene,School of Public Health,Anhui Medical University,Hefei 230032；2Dept of Dermatology,
46、the First Affiliated Hospital of Anhui Medical University,Hefei 230022；3 Key Laboratory of Dermatology,Ministry of Education,the First Affiliated Hospital of Anhui Medical University,Hefei 230022；4 Guangdong Province Hospital for Occupational Disease Prevention and Treatment,Guangzhou 510000)Abstrac
47、t Obje c t ive To d et ec t t h e ex pr essio n o f ser u m ex o so ma l miR-30d-5p in o c c u pa t io n a l d er ma t it is med ic a-men t o sa-l ik e o f t r ic h l o r o et h y l en e(OMDT)pa t ien t s a n d it s c o r r el a t io n w it h l iv er f u n c t io n,t h en per f o r m bio in f br ma
48、t-ic s a n a l y sis a n d v er if y t h e t a r g et g en e.Me t hods Ser u m ex o so mes w er e ex t r a c t ed f r o m 6 OMDT pa t ien t s a n d 6(下转第730页)730安徽医科大学学报 Acta Universitatis Medicinalis Anhui 2023 Ma y；58(5)Sigirr deletion upregulates NF-kB and is involved in the development of renal
49、interstitial fibrosis in mice with chronic k idney diseaseTo n g Ziw en1,Xu Depin g1,Wa n g Zh e2,Ya n g P in g1,Tu Zh en zh en1,Za n g Da n d a n3,Zh o u Ha ish en g1,3(1 Dept of Biochemistry,2 School of Basic Medical Science,3 Center far ScientificResearch,Anhui Medical University,Hefei 230032)Abs
50、tract Obje c t ive To in v est ig a t e t h e r o l e a n d mec h a n ism o f Sigirr d el et io n in c h r o n ic k id n ey d isea se c o mpl ic a t ed w it h r en a l in t er st it ia l f ibr o sis(CKD-RIF)in mic e.Me t hods po l y mer a se c h a in r ea c t io n(P CR)w a s u sed f o r id en t if i
